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1.
李琪  周向东 《基础医学与临床》2009,29(11):1139-1143
目的 探讨肿瘤坏死因子TNF-α与香烟提取物共同诱导气道黏液高分泌的相互关系及作用特点。方法 培养的人气道上皮细胞BEAS-2B,转染核转录因子(NF)-κB"decoy"寡核苷酸(ODNs),并以乱序NF-κB ODNs为对照转染组,各组均分别予以TNF-α、10%香烟提取物(CSE)单独刺激及共同刺激,以Western blot、ELISA及RT-PCR法检测各组刺激前后磷酸化表皮生长因子受体(p-EGFR)、黏蛋白(MUC5AC)蛋白及mRNA水平。结果 转染乱序NF-κB ODNs的细胞予以TNF-α、10% CSE刺激后,各组细胞中p-EGFR蛋白水平较对照组升高,伴随MUC5AC蛋白含量及基因转录水平的提高(P<0.05);共孵育组中较单独刺激组升高更为显著(P<0.05)。转染NF-κB"decoy"ODNs组再予以TNF-α刺激,细胞中MUC5AC蛋白含量及mRNA水平与未转染组相比升高不明显,而单用CSE刺激组中的MUC5AC、p-EGFR水平仍有明显升高(P<0.05);共孵育组显示出与CSE单独刺激组相似的结果。结论 TNF-α、CSE能协同促进气道上皮细胞中黏蛋白合成,转录因子NF-κB主要参与TNF-α所致的MUC5AC表达,而在CSE诱导的效应过程中作用不明显。  相似文献
2.
澳门中学生精神信仰的现状研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的考察澳门中学生精神信仰的现状与特点。方法采用中学生精神信仰问卷对1379名澳门中学生的精神信仰进行调查。结果1澳门中学生在一级信仰因素上的均值排列顺序由高到低依次是实用信仰、社会信仰、超自然信仰。在7个二级信仰维度上的均值排列顺序由高到低依次为家庭主义、生命崇拜、国家民族、政治信仰、神灵崇拜、金钱物质、宗教信仰。2女生在宗教信仰和神灵崇拜上的得分显著高于男生。3高三年级学生在金钱物质和国家民族的信仰程度最高,得分高于其他年级。4学生干部在国家民族、政治信仰、生命崇拜和家庭主义上的得分显著高于非学生干部。5学习成绩好的学生和成绩中等的学生在国家民族、政治信仰和家庭主义上的得分显著高于学习成绩差的学生。结论澳门中学生的精神信仰总体上是积极健康向上的。  相似文献
3.
JNK信号转导通路介导吸烟所致的气道黏液高分泌   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
目的:探讨香烟对气道黏液分泌的影响及其信号转导机制。方法: 利用香烟提取物条件培养人气道上皮BEAS-2B细胞,以JNK特异性抑制剂SP600125为干预条件。采用RT-PCR技术观察培养细胞黏蛋白(MUC)5AC转录水平的改变。同时分别采用ELISA和Western blotting法检测培养上清液中MUC5AC和细胞表皮生长因子受体(EGFR)的蛋白水平。结果: 香烟刺激下培养细胞MUC5AC mRNA和蛋白分泌水平显著高于正常培养细胞,同时伴激活态EGFR蛋白含量的显著增高,但EGFR蛋白总量未见显著升高。SP600125显著下调香烟所致MUC5AC表达水平和分泌量的升高水平,而未对激活态EGFR水平的上升产生明显影响。结论: 香烟提取物可从转录水平诱导气道上皮细胞呈现黏液高分泌状态;进一步证明其信号转导机制有EGFR的作用,而JNK信号通路也部分参与其中,且不依赖于EGFR。  相似文献
4.
5.
目前,产前诊断主要依赖于羊水细胞培养作细胞遗传学和生化分析.然而某些单基因或多数多基因遗传病,用羊水细胞则不能诊断.这些病的产前诊断需要直接或间接的直接观察胎儿及获得胎儿组织,之所以选择这些组织,是因它们表达了一定的遗传特性,羊水细胞则不能.间接的直接观察胎儿是用超声显像术或放射照相术.胎儿镜及胎血取样的发展,在宫内诊断方面开辟了一个新的纪元.胎儿镜及胎血取样的回顾及进展1973年,Valenti用一个经小儿膀胱镜改装的"胎儿镜"首次胎血取样成功.1974年,Hobbins等首先应用目前广为使用  相似文献
6.
7.
8.
目的探讨膜连接蛋白Ezrin在中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)诱导气道黏液高分泌的作用及相关调节机制。方法以中性粒细胞弹性蛋白酶刺激培养的人气道上皮HBE16细胞,ELISA法、real-time PCR法测定黏蛋白(MUC)5AC的蛋白及mRNA水平。免疫荧光法检测Ezrin蛋白含量。结果 NE刺激30 min后MUC5AC mRNA表达增强,细胞中及培养上清中黏蛋白MUC5AC的含量均显著高于对照组(P<0.01);转染Ezrin永久磷酸化载体pEGFPN1-Ezrin-T567D的细胞经NE刺激后,胞质内磷酸化Ezrin表达明显增强,且胞膜分布增多。同时,细胞培养上清液中的MUC5AC蛋白含量亦显著高于单纯NE组(P<0.01)。遏制Ezrin磷酸化pEGFP-N1-Ezrin-T567A载体转染组在NE刺激后,Ezrin蛋白与pEGFP-N1-Ezrin-T567D组相比有明显减少,且未出现向胞膜聚集的趋势,同时分泌至培养上清的MUC5AC蛋白也有明显减少(P<0.01),同时伴随胞质内MUC5AC蛋白有所增加(P<0.05)。结论 Ezrin蛋白参与了NE诱导的MUC5AC蛋白分泌,是气道上皮细胞MUC5AC分泌的重要调控分子。  相似文献
9.
10.
目的:构建天然内生多肽Elafin真核表达载体,探讨其对气道粘液高分泌的影响。方法:抽提Elafin行RT-PCR获取Elafin cDNA,双酶切后将片段装载到pMD18-T载体上。以pMD18-T-Elafin为模板行PCR反应,产物胶回收并双酶切后定向克隆至pEGFP-N1上,转化,筛选,双酶切鉴定重组质粒。将pEGFP-N1-Elafin转染正常人支气管上皮细胞HBE16,给予脂多糖(LPS)刺激,Western blot检测细胞内Elafin蛋白的相对含量,RT-PCR检测各组Elafin mRNA和粘蛋白(MUC)5AC mRNA表达水平,荧光素酶报告基因检测系统测定核转录因子-κB(NFκ-B)的活性;ELISA法分析各组细胞MUC5AC蛋白的相对含量。结果:成功构建Elafin真核表达载体,转染重组Elafin的HBE16细胞成功表达Elafin蛋白。LPS刺激可增强NF-κB的活性,该活性在转染重组Elafin后显著降低;MUC5AC蛋白含量及mRNA水平在LPS刺激后也显著升高,在转染重组Elafin后二者的表达水平明显降低。结论:Elafin真核表达载体成功构建,初步发现Elafin可通过降低NFκ-B的活性来下调MUC5AC的表达,为进一步深入研究其对气道粘液高分泌的调节机制奠定了基础。  相似文献
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