微RNA-210抑制人退行性变髓核细胞自噬影响椎间盘退行性变

目的探讨微RNA-210(miRNA-210)对退行性变髓核细胞自噬的影响及其参与椎间盘退行性变(IDD)进程的可能机制。方法收集24例IDD患者(IDD组)和6例腰椎骨折患者(对照组)椎间盘组织进行分离,培养髓核细胞。通过实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测髓核细胞中miRNA-210的表达,通过单丹磺酰尸胺(MDC)染色和蛋白质印迹法检测细胞自噬水平。通过FQ-PCR或蛋白质印迹法检测过表达或抑制miRNA-210对细胞自噬和细胞外基质代谢的影响。通过生物信息学手段寻找miRNA-210与自噬相关的靶基因及miRNA-210的结合位点,并应用双荧光素酶报告实验验证。结果与对照组相比,IDD组髓核细胞中miRNA-210表达量增加,细胞自噬水平降低。过表达miRNA-210会抑制髓核细胞自噬,同时降低Ⅱ型胶原(ColⅡ)及蛋白多糖表达量,升高基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和MMP-13表达量。自噬抑制剂3-MA减弱miRNA-210对ColⅡ、蛋白多糖、MMP-3和MMP-13的调节作用。miRNA-210与自噬相关蛋白7(ATG7)存在结合位点,过表达miRNA-210通过沉默ATG7抑制细胞自噬,激活MMP-3和MMP-13,促进细胞外基质(ColⅡ和蛋白多糖)降解。结论在发生退行性变的椎间盘组织中miRNA-210表达量增加。过表达的miRNA-210可能通过直接作用于靶基因ATG7抑制细胞自噬,促进细胞外基质降解,推动IDD进程。     

NgR特异性siRNA筛选及其表达载体构建

目的:将siRNA技术应用于NgR,筛选出高效的NgR(Nogo受体)特异性siRNA,并构建其表达载体。方法:2005-03/2006-03,在杭州新瑞佳生物制药有限公司、解放军第二军医大学神经生物教研室设计筛选NgR特异性siRNA,按照E1bashir等设计原则和siRNA的要求,设计、合成4对siRNA,转染体外培养大鼠原代皮层和海马细胞,筛选出基因高沉默效率的NgR特异性siRNA;2004-03/2005-03上海生工生物工程公司将获得的高沉默效率siRNA设计成带有BamHI、HindⅢ酶切粘性末端、终止识别序列和LOOP环的发卡式RNA,并将其克隆入载体pRNAT-U6.1/Neo,构建NgR特异性siRNA表达载体,然后进行酶切鉴定及基因测序。结果:①4对NgR特异siRNA中,siRNA199下调NgRmRNA的表达水平效率最高,转染72h效果最显著(96.04%)。NgR特异性siRNA199序列为:5’-CCGAAUCUCUUACGUGCCATT-3’。②将该序列的发卡式RNA成功克隆入载体pRNAT-U6.1/Neo,构建成NgR特异性siR-NA199表达载体,酶切鉴定及基因测序表明设计序列完全相符,目的基因序列准确无误。结论:NgR特异性siRNA199及其表达载体构建成功,为进一步合成病毒载体及观察NgR特异性RNA干扰抑制大鼠NgRmRNA表达对脊髓损伤的修复作用奠定了基础。     

颈椎人工椎间盘置换术后患者负性心理的改善及其对预后的影响

目的 观察颈椎病患者行颈椎人工椎间盘置换术后负性心理的改善情况,探讨颈椎病患者抑郁、焦虑等负性心理发生的危险因素及其对预后的影响.方法 回顾性分析2010年1月-2012年1月于本院行颈椎椎间盘置换术的85例患者术前术后抑郁、焦虑心理状况.于术前及术后1周、3个月、6个月、1年及末次随访时采用Zung抑郁自评量表（self-rating depression scale,SDS）和Zung焦虑自评量表（self-rating anxiety scale,SAS）评估患者负性心理,颈部及上肢疼痛视觉模拟量表（visual analogue scale,VAS）评分、日本骨科学会（Japan Orthopedic Association,JOA）评分评估神经功能,SF-36量表评估生活质量,以单因素相关分析对结果进行统计处理.结果 所有患者临床症状和神经功能改善满意.12例（14.12%）患者术前出现明显的抑郁,21例（24.70%）患者出现焦虑;术后1周患者SDS和SAS评分均较术前改善,焦虑改善程度有统计学意义,抑郁改善程度无统计学意义.末次随访时患者抑郁和焦虑评分与VAS和SF-36评分显著相关,但与年龄和JOA评分无显著相关.结论 部分颈椎病患者术前存在抑郁及焦虑,颈椎人工椎间盘置换术可以部分改善这2种心理,患者负性心理对其预后具有负性作用.     

可吸收脊柱椎间融合器的研究与应用进展

颈／腰椎退行性疾病是近年来临床最常见的脊柱外科疾病,严重影响着患者工作和生活,一旦药物及物理非手术治疗无效,手术治疗往往是唯一有效的方法。手术方式已由单纯椎间盘摘除术发展至目前比较常见的脊柱融合术。脊柱融合术是临床上应用广泛的较为有效的手术方式,并且自从椎间融合器Cage应用于脊柱融合术并取得成功以来,各种椎间融合器相继问世,并受到临床广为接受。     

颈前路带锁钢板对单间隙脊髓型颈椎病颈椎曲度及高度的影响

目的 通过对单间隙脊髓型颈椎病颈前路减压植骨融合、使用或不使用颈前路带锁钢板内固定的患者术后随访，分析不同术式对颈椎曲度和高度的影响。方法 对45例单间隙脊髓型颈椎病手术治疗的患者进行随访12-38个月，平均20个月，其中A组行颈前路减压单纯植骨融合20例，B组行颈前路减压植骨融合+颈前路带锁钢板内固定25例，分别在术前、术后1周内、术后2-4个月、术后5-7个月、术后1年以上拍摄颈椎标准侧位片，测量融合节段颈椎前高、后高、颈椎总曲度、融合节段曲度，分析这些参数在手术前后的变化。结果 X线片测量显示，融合节段颈椎前高、后高及节段曲度在术后1周内A、B组在均较术前明显改善，A组分别增加（4.1&;#177;1.6）mm，（2.2&;#177;0.8)mm，（7.1&;#177;5.3)&;#176;，两组间统计学差异无显著性（P&;gt;0.05,t=1.932,1.484,0.420），在术后2-4个月、术后5-7个月及术后1年以上的随访中，A组均有不同程度的丢失，以术后2-4个月尤著，而B组在术后长期随访中无明显丢失，均能较好维持，两组间统计学差异有显著性（P&;lt;0.05,t值为2.435-4.701。颈椎总曲度在术后1周内亦较术前明显改善，A组增加（10.4&;#177;7.7)&;#176;、B组增加（8.1&;#177;3.4)&;#176;，两组间统计差异无显著性（P&;gt;0.05,t=1.364)；在术后2-4个月、术后5-7个月的随访中，A组有逐渐丢失趋势，而B组能较好维持，但两组间统计差异无显著性（P&;gt;0.05,t=0.400,1.330），在术后1年以上随访中，A组回到近于术前水平，而B组仍能较好维持，两组间统计学差异具有显著性（P&;lt;0.05,t=2.814）。结论 对单间隙脊髓型颈椎病行前路减压植骨融合辅以前路带锁钢板内固定，不仅有助于恢复颈椎的生理曲率及椎间高度，并有助于长期维持。     

脊髓型颈椎病合并运动神经元疾病的诊断

目的：分析脊髓型颈椎病（CSM）合并运动神经元疾病的临床特点。方法：回顾分析19例CSM合并运动神经元疾病的临床资料。结果：本组共9例，其中7例伴有颈部疼痛或肢体麻木；8例至少伴有肌萎缩、肌肉颤动、言语不清、饮水呛咳4项症状之一；7例四肢腱反射均亢进，肌张力增高，2例肌萎缩、四肢反射减弱；4例为颈椎外伤后；2例未能及时诊断行颈前路手术后病情加重。结论：CSM完全可并发运动神经元疾病，及时的诊断，避免漏诊后手术而加重原有病情。     

颈椎手术并发症现状与新动向

正手术并发症与外科技术发展如影相随,近10年间关于颈椎外科新技术、新方法的文献有13000篇,较之前10年增加6000篇,而相关手术并发症的文献1100篇,较前并未明显减少。最新文献报道统计[1],颈椎手术的并发症发生率仍在11%~38%左右。而且,随着颈椎外科技术的更新,颈椎手术并发症也出现了一些新的变化动向。1颈椎外科并发症发生率并未明显下降在我国,20年前颈椎手术并发症的总发生率为8.62%[2],而近20年的国内外文献[1]报道颈椎手术并     

纳米羟基磷灰石/甲基丙烯酸2-羟基乙酯人工骨支架的制备及其功能评价

[目的]体外研究评价纳米羟基磷灰石/甲基丙烯酸2-羟基乙酯(nHA/pHEMA)生物支架的生物特性及其对转染骨形态发生蛋白-7(bone morphogenetic protein 7,BMP-7)的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal-stem cells,BMSCs)成骨分化的影响。[方法]将nHA与pHEMA复合构建nHA/pHEMA复合物支架。将BMP-7体外转染BMSCs并作为种子细胞接种至n HA/p HEMA支架。采用MTT、荧光显微镜及电镜扫描评价nHA/pHEMA支架的生物相容性和细胞毒性。ALP活性和RT-PCR检测分析BMP-7对复合nHA/pHEMA支架BMSCs成骨分化的影响。最后进行无侧限抗压试验评价nHA/pHEMA支架的生物力学特性。[结果]MTT荧光显微镜及电镜检测结果表明接种于nHA/pHEMA支架的BMSCs生长及增殖情况良好。BMP-7转染组与BMSCs组的细胞增殖水平差异无统计学意义(P0.05)。ALP活性检测发现BMP-7-BMSC组的ALP水平在培养第7 d和14 d明显高于BMSCs组(P0.05),RTPCR发现BMP-7-BMSCs组的RUNX2、COLI、OPN和OCN表达水平在培养第7 d和第14 d显著高于BMSCs组(P0.05)。生物力学检测发现nHA/pHEMA支架在高压力负荷及形变条件下未出现脆性骨折。[结论]nHA/pHEMA支架具有良好的生物相容性及生物力学特性,BMP-7能够显著促进复合nHA/pHEMA支架的BMSCs成骨分化,BMP-7-BMSCs与nHA/pHEMA支架复合可以作为理想的骨修复材料促进骨形成。     

初发腰腿痛年轻人群中腰椎间盘退变与椎旁肌群改变的相关性

[目的]探寻腰椎间盘退变程度与腰椎旁肌肉群之间的关系。[方法]本研究包括患者组27例,为首次发生腰腿痛或未经过保守治疗的腰椎间盘突出症患者,平均年龄(22.33±1.64)岁;对照组25人,平均年龄(22.16±1.60)岁,为来院体检的健康人群。全部研究对象接受磁共振检查,按Pfirrmann标准对退变椎间盘进行分级,并在T2相上测量椎旁肌群与相应节段椎体间的横截面积比(MVr),脂肪浸润情况。[结果]患者组中的多裂肌群显著小于对照组(P=0.046),而最长肌、腰大肌在两组间无显著差异。患者组中的脂肪浸润等级显著高于对照组(P0.01)。在患者组中,脂肪浸润等级与椎间盘退变等级之间并不存在线性相关联系。椎旁肌群的MVr与椎间盘退变等级之间存在着中等的线性相关联系。[结论]腰椎多裂肌、最长肌、腰大肌与椎间盘突出程度之间存在着中等联系,其中多裂肌可能更为重要。椎间盘患者组中的腰椎旁肌群有更明显的脂肪浸润,然而脂肪浸润与椎间盘突出之间可能并不存在线性联系。     

肌间隙入路与传统后路单开门成形术治疗多节段颈椎退行性疾病的临床疗效

目的比较肌间隙入路与传统后路单开门成形术治疗多节段颈椎退行性疾病的临床疗效。方法 2016年3月—2016年8月,本院收治40例多节段颈椎退行性疾病患者,其中多节段脊髓型颈椎病(MCSM)伴颈椎椎管狭窄症18例,颈椎后纵韧带骨化症(OPLL)22例;均采用后路单开门椎管扩大椎板成形术治疗。患者随机平均分为2组:A组采取传统门轴侧肌肉椎板剥离入路方式,B组采取改良的门轴侧经多裂肌间隙入路。记录2组患者的住院时间、手术时间、术中出血量、术后引流量,手术前后日本骨科学会(JOA)评分、疼痛视觉模拟量表(VAS)评分、颈椎功能障碍指数(NDI)、椎管矢状径以及术后门轴侧组织液渗出面积,并进行比较。结果所有患者均手术顺利,无切口感染、脑脊液漏等情况发生,手术切口均一期愈合。2组患者住院时间、术后JOA评分、术后椎管矢状径差异均无统计学意义(P0.05);2组间手术时间、术中出血量、术后引流量、术后VAS评分、术后NDI、门轴侧渗出液面积差异有统计学意义(P0.05),B组优于A组。结论颈椎后路单开门椎管扩大椎板成形术治疗MCSM伴椎管狭窄及多节段颈椎OPLL具有良好的疗效,经多裂肌间隙入路与传统肌肉骨膜下剥离入路相比不会增加手术并发症的发生,且在手术时间、术中出血量、VAS评分及NDI改善等方面具有一定优势,值得临床推广应用。