养血解毒方对银屑病角质形成细胞紧密连接的调节作用

目的:观察银屑病样小鼠皮损紧密连接蛋白中水闸蛋白(claduin-1,claudin-7),闭锁蛋白(occludin)的表达,明确养血解毒方对银屑病表皮通透屏障的修复作用,为养血解毒方治疗银屑病提供科学依据。方法:将C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、甲氨喋呤组、养血解毒方组,制备甲氨喋呤溶液、养血解毒方水煎剂对应灌胃干预,同时小鼠背部剃毛后给予咪喹莫特涂抹诱导银屑病样皮损模型。每日拍照记录皮损形态并对严重程度指数(PASI)评分;水油测试笔检测皮损表皮含水量;苏木素-伊红(HE)染色观察其病理改变、测量表皮厚度;免疫荧光法检测增殖相关的核抗原(Ki67);免疫组化法检测表皮兜甲蛋白(loricrin),真皮中CD3^+T淋巴细胞浸润和紧密连接蛋白claduin-1,claudin-7,occludin的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测皮损中claudin-7,occludin的表达。模拟银屑病皮损微环境,建立白细胞介素-17(IL-17,1 mg·L^-1)刺激的角质形成细胞(Hacat)模型,制作养血组分、解毒组分、养血解毒方喷干粉进行干预。采用细胞增殖毒性检测试剂盒-8(CCK-8)法检测药物对Hacat细胞的毒性;细胞免疫荧光法检测药物对角质形成细胞claudin-1,claudin-7,occludin表达的干预作用。结果:与模型组比较,养血解毒方可显著减轻小鼠银屑病样皮损表现,降低PASI评分及皮损表皮厚度(P<0.01),增加皮损区表皮水分含量(P<0.01),减少表皮ki67,loricrin的异常表达和真皮CD3+T细胞浸润(P<0.01),并增加紧密连接蛋白claudin-1,claudin-7,occludin的表达(P<0.05),增加紧密连接结构的完整性;体外研究发现,与模型组比较,养血解毒方组和养血组分组明显升高紧密连接蛋白claudin-1,claudin-7,occludin的表达(P<0.05);与模型组比较,解毒组分组蛋白表达水平无统计学差异。结论:养血解毒方通过调节角质形成细胞间紧密连接的表达抑制其异常的增殖分化过程,进一步恢复破坏的表皮通透屏障,可能是其治疗银屑病的作用机制之一。其中养血解毒方的养血组分对调节紧密连接的修复起主要作用。     

熊果酸联合顺铂对卵巢癌干细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响

目的:观察熊果酸（ursolic acid，UA）联合顺铂(DDP)对卵巢癌干细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移能力的影响及其作用机制。方法:通过体外无血清悬浮培养人卵巢癌SKOV3干细胞并进行细胞鉴定。实验分为SKOV3干细胞组、熊果酸组、熊果酸联合顺铂组。MTT法检测干细胞的增殖，Transwell实验检测干细胞侵袭与迁移能力，采用Annexin V/PI双染法流式细胞术检测干细胞凋亡。Real-time PCR检测上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）相关标记分子Vimentin、N-cadherin、E-cadherin、Fibronectin、Twist的mRNA表达情况，Western-blot检测E-cadherin、Vimentin、Twist蛋白表达情况。结果:熊果酸对SKOV3干细胞增殖有显著抑制作用，呈剂量依赖性（P＜0.05）；流式细胞术显示熊果酸组、熊果酸联合顺铂组均可提高SKOV3干细胞的凋亡率，与SKOV3干细胞组相比有统计学差异（P＜0.05）；熊果酸组、熊果酸联合顺铂组可有效抑制SKOV3干细胞的侵袭和迁移能力（P＜0.05）；Real-time PCR测定熊果酸组、熊果酸联合顺铂组作用SKOV3干细胞后EMT基因表达水平，结果显示Fibronectin、Twist、Vimentin、N-cadherin表达降低，E-cadherin表达升高（P＜0.05）；Western-blot结果显示熊果酸组、熊果酸联合顺铂组可上调E-cadherin蛋白的表达，下调Vimentin、Twist蛋白的表达；与熊果酸组相比，熊果酸联合顺铂组对干细胞凋亡率更高，迁移和侵袭能力更低，E-cadherin表达更高，Vimentin和Twist表达更低，以上差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论:熊果酸对卵巢癌干细胞有抑制增殖、侵袭和迁移，诱导凋亡的作用，联合顺铂作用效果更优，其机制可能与逆转EMT有关。     

齐聪教授治疗妇科病的学术思想总结

齐聪教授从事中医临床工作三十余载,擅长治疗妇科疑难痼疾,积累了丰富的经验。临证中辨证论治,扶正祛邪,标本兼顾,注重补肾健脾,同时衷中参西,重视药食互补,心身调护和外治法,颇获良效。文章总结其学术精要,供同道参考。     

齐聪运用膏方治疗不孕症验案1则

正膏方又称膏滋,是将中药饮片反复煎熬,去渣浓缩,加冰糖或蜂蜜收膏而成,是中药丸、散、膏、丹、汤五大剂型之一,具有剂量小、便于久服、服用可口等优点。膏方不仅有滋补强壮的功效,还具有调理脏腑气血阴阳等作用,多用于治疗慢性疾病及虚证。女性因其特有的经、带、胎、产、乳等生理特点,容易耗气伤血,因此膏方用于治疗妇科疾病具有独特的优势。目前膏方在妇科临床上多用于调经、止带及冬令保健滋补,而用于治疗不孕症的报道很少。齐聪教授系上海中医药大学附属曙光医院妇产科     

齐氏宫腔1方联合宫腔镜治疗宫腔粘连所致胚胎反复移植失败患者的临床观察

目的观察齐氏宫腔1方联合宫腔镜治疗宫腔粘连所致反复移植失败患者的临床疗效。方法将71例宫腔粘连所致胚胎反复移植失败患者(共97个移植周期)随机分为治疗组(35例,47个周期)和对照组(36例,48个周期)。两组均行宫腔镜下宫腔粘连分离术加放环术,治疗组加服齐氏宫腔1方,对照组空白对照,2个月经周期后两组均再次行宫腔镜检查并取环,次月进入移植周期。观察宫腔粘连程度、子宫内膜厚度及临床妊娠结局相关指标的情况。结果 (1)组内治疗前后宫腔粘连程度比较,两组差异均有统计学意义(P0.05);组间治疗后比较,治疗组宫腔粘连改善程度略优于对照组,但两组差异无统计学意义(P0.05)。(2)移植日两组子宫内膜厚度比较,差异无统计学意义(P0.05)。(3)治疗组、对照组治疗后种植率分别为25.0%、8.0%,两组种植率比较,差异有统计学意义(P0.05)。治疗组、对照组生化妊娠率分别为42.6%、14.6%,两组生化妊娠率比较,差异有统计学意义(P0.05)。治疗组、对照组临床妊娠率分别为27.7%、10.4%,两组临床妊娠率比较,差异有统计学意义(P0.05)。(4)治疗组、对照组流产率分别为31.6%、44.4%,两组流产率比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗组、对照组异位妊娠率分别为0.0%、2.1%,两组异位妊娠率差异无统计学意义(P0.05)。结论齐氏宫腔1方联合宫腔镜治疗能够明显提高宫腔粘连所致胚胎反复移植失败患者的种植率及临床妊娠率,其机制可能与改善子宫内膜血供相关。     

顺铂化疗联合用药的增效减毒作用研究进展

摘 要 顺铂在临床上应用于多种肿瘤的治疗,也会引起广泛的不良反应如肾毒性、肝毒性、耳毒性等,限制了其临床应用,因此临床上主张联合用药以达到增效减毒的作用。本文概述了近些年来关于化学药及中药（中药成分、单味中药及中药复方）对顺铂的增效解毒作用方面的研究进展,为化疗药联合用药研究和临床给药方案的制定提供参考依据。     

温肾活血汤联合克罗米芬改善促排卵子宫内膜容受性疗效研究

目的:探讨温肾活血汤联合克罗米芬(clomiphene citrate,CC)促排卵治疗后对子宫内膜容受性的影响。方法:45例排卵障碍型不孕患者随机分成A组(CC)、B组(CC+阿司匹林)、C组(CC+温肾活血中药),每组15例。治疗1～3个疗程,观察排卵率、妊娠率及hCG注射日子宫内膜类型及厚度。结果:C组A+B型内膜率(91.18%)显著高于A组(76.92%,P<0.01)及B组(66.67%,P<0.05);C组内膜平均厚度(9.4±2.2mm)显著高于A组(7.8±1.4mm),P<0.05。周期排卵率C组(82.35%)>B组(76.92%)>A组(69.23%),但各组间无统计学差异(P>0.05);未破裂卵泡黄素化综合征(LUFS)发生率C组(5.88%)显著低于A组(23.08%)(P<0.05)。周期妊娠率C组(23.5%)>B组(15.4%)>A组(10.3%)(P<0.05)。结论:温肾活血汤能提高克罗米芬促排卵治疗后的妊娠率,其机制可能与促进排卵、降低LUFS发生及改善子宫内膜容受性有关,其改善内膜容受性的效果好于阿司匹林联合CC。     

消瘤方对子宫内膜异位症模型大鼠子宫内膜细胞Wnt通路的影响

目的:探讨消瘤方对子宫内膜异位症模型大鼠子宫内膜细胞Wnt通路的影响。方法:雌性8~12周龄SD大鼠,采用自体移植法手术造模成功后,随机分为模型组、西药组、消瘤方高剂量与低剂量组;另设正常组、假手术组为对照。模型组和假手术组灌胃0.9%Na Cl溶液,西药组灌胃丹那唑混悬液,消瘤方高、低剂量组灌胃不同剂量(55.0、27.5 g·kg-1·d-1)的消瘤方药液,连续给药4周。剖腹观察子宫内膜组织种植及生长情况,并采用Western-blot法检测药物干预后模型大鼠在位及异位子宫内膜细胞Wnt7a、β-catenin蛋白表达的变化。结果:模型组异位内膜组织生长良好,中药高剂量与西药组异位内膜组织萎缩,而各组在位的子宫内膜组织肉眼观察无明显变化;与模型组比较,中药高剂量组和西药组在位、异位内膜细胞中Wnt7a、β-catenin蛋白的表达水平下降(P0.05),且均优于中药低剂量组(P0.05)。结论:消瘤方可促进子宫内膜细胞凋亡,并可抑制Wnt通路的关键调节因子。     

补肾健脾方改善自然衰老小鼠卵巢反应性的实验研究

目的观察补肾健脾方对自然衰老小鼠卵巢反应性及卵巢储备的影响。方法将48只10月龄C57BL/6J雌性小鼠随机分为老年对照组、补肾健脾方组、DHEA组,给予相应处理;并以2~3月龄小鼠为青年对照组。观察各组干预前后血清抗苗勒管激素(AMH)水平,获取卵数、MII卵子数、受精卵数、受精率及各级卵泡计数变化情况。结果 1补肾健脾方组小鼠血清AMH水平较老年对照组和DHEA组均升高(P0.05);2补肾健脾方组小鼠在体外受精过程中获卵数、MII卵子数、受精卵数及受精率均明显高于较老年对照组和DHEA组(P0.05);3补肾健脾方组小鼠成熟卵泡数较老年对照组和DHEA组均显著升高(P0.05)。结论补肾健脾方可改善衰老小鼠的卵巢低反应性和提高卵巢动态储备。     

熊果酸对卵巢癌干细胞荷瘤裸鼠耐药的逆转作用

目的探讨熊果酸对于卵巢癌干细胞荷瘤裸鼠耐药的逆转作用。方法选用人卵巢癌Skov3细胞通过无血清悬浮培养法富集干细胞,接种于裸鼠皮下,建立裸鼠人卵巢癌干细胞皮下移植瘤耐药模型。随机分为Skov3贴壁细胞组、干细胞组,熊果酸高、中、低剂量组,顺铂组,顺铂联合熊果酸组。连续给药14天,空白组给予0.9%Na Cl溶液。每天测量瘤体积,绘制肿瘤生长曲线,计算抑瘤率。给药结束后,取肿瘤组织,HE染色观察肿瘤细胞形态、结构,免疫组化检测ABCG2的表达,TUNEL法检测凋亡细胞。结果熊果酸可以抑制肿瘤组织生长,并且抑瘤率随剂量增加而上升,熊果酸与顺铂联用明显优于顺铂(P0.01)。不同剂量的熊果酸干预后,ABCG2的表达下调,肿瘤干细胞凋亡增多,均具有剂量依赖性。并且熊果酸联合顺铂组较单用顺铂组,ABCG2的表达明显被抑制,细胞凋亡数明显升高。结论熊果酸可以抑制卵巢癌干细胞荷瘤裸鼠的瘤体生长,通过下调耐药指标ABCG2,促进细胞凋亡,提高顺铂诱导的细胞凋亡来达到逆转耐药的作用。