常规IVF授精后5小时观察卵子极体数量用于预测受精结果的研究

<正>接受常规体外授精-胚胎移植治疗(IVF)的患者中5%～10%出现全部或绝大部分卵母细胞不受精[1],即受精失败。常规IVF中,如何尽早发现受精失败,并及时进行单精子注射(ICSI)治疗,已成为国内外研究的热点。本研究通过在常规IVF授精后5h对部分卵子脱颗粒观察第二极体,探讨其与授精     

生长分化因子5基因原核表达质粒构建和表达及其体内成软骨的诱导活性

背景:生长分化因子5在软骨、四肢和关节的发育、形成中起着重要作用,是目前最常应用的研究早期关节发育的标志分子.克隆人生长分化因子5基因可为软骨、关节缺损的修复奠定研究基础.目的:利用基因工程技术在大肠杆菌中表达人生长分化因子5成熟肽,探讨重组蛋白的体内诱导活性.设计、时间及地点:基因水平观察实验,于2006-01,06在南方医科大学分析测试中心完成.材料:人流产胚胎膝关节区软骨组织取自解放军广州军区总医院妇产科,标本获取征得家属同意.10只KM小鼠购自南方医科大学实验动物中心,雌雄各半,体质量18-22 g,6～8周龄.方法:通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从人胚胎软骨组织克隆生长分化因子5完整成熟肽基因,将所得基因片段插入pET22b(+)载体构建重组原核表达载体pET22b(+)-GDF5,重组质粒转化大肠杆菌BL-21进行IPTG诱导表达.凝胶介质镍离子螯合法纯化目的蛋白,植入小鼠后肢股部肌袋内常规苏木精-伊红染色进行生物学活性鉴定.主要观察指标:琼脂糖凝胶电泳观察目的基因表达条带,测序观察目的基因序列,SDD-PAGE电泳观察目的蛋白表达条带,组织学观察生长分化因子5诱导活性.结果:RT-PCR产物长约350 bp,阳性克隆质粒经双酶切可切出约350 bp的片段,测序表明与Genbank中的序列完全一致.SDS-PAGE电泳显示重组子转化菌在相对分子质量14 100位置处出现特异外源蛋白表达带,和成熟肽相对分子质量13 600接近.纯化后体内植入实验组织切片显示,大量的间充质干细胞聚集和增生,并分化成为成软骨细胞,分泌软骨基质并埋入其中变为软骨细胞.结论:通过RT-PCR法从人胚胎软骨组织中成功克隆出人生长分化因子5完整成熟肽基因,可在大肠杆菌中得到高效表达,经纯化后在动物体内具有成软骨诱导活性.     

口服避孕药预处理对促性腺激素释放激素激动剂长方案妊娠结局的影响

目的评价口服避孕药(OC)妈富隆预处理对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)降调节长方案妊娠结局的影响。方法回顾性分析我中心2011年10月至2012年12月IVF患者450例,其中OC组193例服用妈富隆,于月经周期第21天开始GnRH-a降调节治疗,对照组257例自发排卵后一周同法治疗,比较两组促排卵过程及第一次胚胎移植(鲜胚或冻融胚胎)结局。结果 OC组与对照组在降调节时间、促性腺激素(Gn)用药天数、Gn用药量、获卵数、2PN受精率、优胚率、平均移植胚胎数、宫外孕率、流产率、卵巢囊肿及OHSS发生率方面均无统计学差异(P0.05),OC组HCG日血清LH水平、移植日子宫内膜厚度低于对照组(P0.05),临床妊娠率、种植率、活产率低于对照组(P0.05)。冻融胚胎移植周期OC组与对照组在移植日子宫内膜厚度、平均移植胚胎数、临床妊娠率、种植率、宫外孕率、流产率、活产率均无统计学差异(P0.05)。结论 GnRH-a降调节长方案使用OC预处理可能通过影响子宫内膜厚度降低鲜胚移植周期临床妊娠率及活产率,似乎不影响冻融胚胎移植周期的妊娠结局。     

不同授精方式的选择性单囊胚移植的妊娠结局分析

目的探讨不同的授精方式[体外受精(IVF)和卵胞浆内单精子注射(ICSI)]的D5选择性单囊胚移植妊娠结局分析。方法回顾性分析2012年4月至2013年10月在陕西省妇幼保健院生殖中心助孕的第1周期D5新鲜移植单囊胚的IVF/ICSI患者,其中IVF单囊胚移植组移植288个周期、ICSI单囊胚移植组移植85个周期。分析两组间临床特征、超促排卵情况、胚胎质量、妊娠率、着床率、多胎率、流产率、异位妊娠率。结果两组间的超排卵情况、临床妊娠率、种植率、流产率、异位妊娠率差异均无统计学意义(P0.05)。IVF组的囊胚形成率高于ICSI组(分别为62.24%和56.14%),差异有统计学意义(P0.05)。结论无论授精方式如何,只要囊胚质量好,就可以单囊胚移植;授精方式可能只影响囊胚形成率,对妊娠率等没有明显的影响。     

体外受精-胚胎移植长方案中短效促性腺激素释放激素激动剂在黄体支持中的应用

体外受精一胚胎移植（IVF—ET）技术已经在临床上成功应用了30余年,由于治疗过程中大剂量用药,患者普遍存在黄体功能不足。黄体功能不足、黄体期缩短,直接导致胚胎种植率下降,流产率升高。目前临床进行黄体支持的药物,包括人绒毛膜促性腺激素（hCG）、黄体酮（P）制剂和雌激素类药物。     

不同年龄患者行冻融胚胎移植内膜准备方案的选择

目的:回顾分析417个不同年龄组患者行胚胎解冻移植周期(FET)的临床方案及治疗结局,探讨各年龄组患者行FET的最佳内膜准备方案。方法:首先,按照内膜准备方案将患者分为2组,人工周期207例,自然周期210例;其次,按照年龄将患者分为3组,A组≤30岁,B组30～35岁,C组>35岁,比较采用人工周期或自然周期各年龄组之间妊娠结局的差异。结果:无论自然周期还是人工周期A组、B组及C组在平均子宫内膜厚度、移植胚胎数及胚胎质量上均无统计学差异(P>0.05),人工替代周期中3组之间的妊娠率亦无统计学差异(P>0.05);自然周期中C组妊娠率(31.03%)低于A组(50.50%)和B组(51.90%),也低于人工替代周期中C组妊娠率(50.00%)。结论:年轻患者无论人工周期或自然周期FET,对妊娠结局无影响,35岁以上患者人工周期FET可提高临床妊娠率。     

桌面干式培养箱在体外受精胚胎培养中的临床效果观察

目的 评估桌面干式培养箱与传统湿式培养箱在胚胎培养中的效果差异。方法 回顾性分析2019年1月至2022年9月于我院生殖中心就诊行体外受精(IVF)治疗的共3 177个周期的临床资料。根据培养环境不同分为两组：以传统湿式箱培养的为C200(湿式)组(n=2 820),以桌面干式培养箱培养的为MIRI(干式)组(n=357),比较两组的患者一般情况、胚胎培养情况和妊娠结局。结果 两组间女方年龄、体质量指数(BMI)、不孕年限、不孕类型、基础卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E₂)、窦卵泡数计数(AFC)、促性腺激素(Gn)总量比较均无显著差异(P>0.05);两组间双原核(2PN)率、D3优胚率、D3可用胚胎率、囊胚形成率比较均无显著差异(P>0.05)。在D3卵裂期胚胎新鲜移植的患者中,C200(湿式)组活产率显著低于MIRI(干式)组(36.06%vs. 46.09%,P<0.05),两组间胚胎种植率、临床妊娠率、流产率、早产率、双胎率及胎儿出生体重比较均无显著差异(P>0.05)。在D5囊胚新鲜移植患者中,C200(湿式...     

钩吻素子对神经胶质瘤细胞U251生长抑制及诱导凋亡作用

目的：探讨钩吻素子体外对神经胶质瘤细胞U251的生长抑制作用及诱导凋亡的作用.方法：利用MTT法和台盼蓝拒染法观察钩吻素子对神经胶质瘤细胞U251生长抑制作用.应用激光共聚焦、流式细胞仪、电子显微镜检测钩吻素子诱导U251细胞的凋亡作用.结果：MTT结果显示钩吻素子在（5-50mg/L）的浓度范围内对人神经胶质瘤U251细胞具有显著的抑制作用.生长曲线结果显示药物的各个浓度对U251的抑制作用呈时间依赖性.流式细胞仪可以观察到明显的＂亚G1期＂峰（凋亡峰）,且凋亡率达到22.4%.激光共聚焦显微镜可以观察到典型的凋亡核形,如核固缩和核碎裂等.透射电子显微镜下见到典型的早期凋亡形态学表现.结论：在一定的浓度范围内,钩吻素子可以抑制U251细胞的生长,并呈剂量和时间依赖效应.其抗肿瘤的特性与引起肿瘤细胞的凋亡有关.     

精子畸形率对体外受精-胚胎移植治疗结局的影响

目的回顾性分析我中心接受常规体外受精（IVF）及卵胞浆内单精子注射（ICSI）治疗中,男方精子畸形率对受精率、胚胎质量及临床结局的影响。方法选取本中心2008年9月至2010年5月接受IVF的344对及ICSI的178对夫妇,分为常规IVF组和ICSI组,组内按照男方精子畸形率分为正常形态组（IVF266／ICSI76）和畸精子症组（IVF78／ICSI102）。受精后分别统计IVF及ICSI两组内畸精子症组和正常形态组正常受精率、优质胚胎率、种植率、临床妊娠率及流产率的差别。结果在IVF中,畸精子症组和正常形态组的正常受精率、种植率、临床妊娠率及流产率分别为64．32％／60．09％、33．78％／37．02％、42．03％／54．62％及12．5％／4．23％。两组间受精率无显著性差别,畸精子症组的临床妊娠率显著性低于正常形态组,而早期流产率显著高于正常形态组（P〈0．05）;ICSI组中,畸精子症组和正常形态组的正常受精率、种植率、临床妊娠率及流产率分别为68．01％／64．59％、32．26％／33．78％、43．75％／52．63％及4．76％／5％。畸精子症患者的临床妊娠率较正常组显著性降低（P〈0．05）。将两种受精方式的畸精子症组间比较,IVF的患者早孕流产率显著高于ICSI者（P〈0.05）。结论常规IVF中畸精子症不影响正常受精。对于畸精症子患者,其临床妊娠率均较精子形态正常组低,但是采用ICSI治疗可以显著降低早孕流产率。‘     

早期补救卵胞浆内单精子注射在常规受精失败周期中的应用

目的评估早期补救卵胞浆内单精子注射(r-ICSI)在常规体外受精(IVF)失败(低下)中的有效性。方法对59周期因全部受精失败或受精率低下进行早期r-ICSI受精(部分受精失败38周期,全部受精失败21周期)的不孕患者资料进行回顾性分析,统计其受精率、卵裂率、胚胎质量、妊娠率及种植率,与同期常规ICSI周期的数据进行比较。结果与同期299ICSI周期相比,早期r-ICSI组受精率、2PN率、胚胎率、优质胚胎率、临床妊娠率和胚胎种植率均无明显差异,3PN率r-ICSI组明显升高。结论对常规IVF失败(低下)患者进行早期-rICSI受精可以得到正常受精、胚胎发育及妊娠,为患者提供了更多的妊娠机会,可以考虑作为IVF实验室的常规操作。