嵌合性抗ROR1 抗体Fab 片段的制备及鉴定

目的:构建嵌合性抗ROR1抗体Fab片段原核表达载体,初步探讨该抗体的生物学特性。方法:利用小鼠免疫和细胞融合,选取阳性克隆细胞株,在此基础上,运用基因工程技术扩增得到抗体轻链和重链,经酶切后与原核表达质粒pETDUET-1连接,构建重组表达质粒,将该重组质粒转入E.coli BL21中表达、纯化,SDS-PAGE、Western blot及ELISA对该抗体进行鉴定和分析,流式细胞术及免疫荧光初步检测该抗体与卵巢肿瘤细胞的特异性结合能力。结果:筛选出分泌抗ROR1抗体的杂交瘤单克隆细胞株,在此基础上,成功扩增抗体轻链和重链并构建嵌合性抗ROR1抗体Fab段原核表达载体,经检测证实抗ROR1抗体Fab段可与ROR1抗原和卵巢肿瘤细胞特异性结合。结论:初步验证嵌合性抗ROR1抗体Fab片段可与卵巢肿瘤细胞结合,为进一步探究抗体肿瘤靶向治疗奠定了基础。     

泌尿结石钬激光碎石术后病人应用追踪延伸护理的效果观察

[目的]探讨追踪延伸护理对钬激光碎石术治疗泌尿结石病人的临床价值。[方法]将98例泌尿结石病人按照随机数字表法分为对照组和观察组,各49例。对照组病人给予常规护理干预,观察组病人术后在对照组基础上增加追踪延伸护理。比较两组病人生理和心理状况、健康知识掌握情况、生命质量评分、自我管理行为评分、并发症发生率和结石复发率。[结果]观察组病人生理状况评分、心理状况评分明显低于对照组,健康知识掌握评分、生命质量评分明显高于对照组,自我管理行为完成情况优于对照组,并发症发生率和结石复发率明显低于对照组,差异有统计学意义(P均0.05)。[结论]泌尿结石病人实施钬激光碎石术,术后给予追踪延伸护理服务,可以明显改善病人的生理和心理状况,使其能更好地掌握健康知识,改善生命质量和自我管理行为,减少并发症发生和结石复发。     

从热痰瘀虚论治痹病经验选粹

痹病是临床常见病,以肌肉、筋骨、关节疼痛、酸楚、麻木、重着、灼热、屈伸不利,甚或关节肿大变形为常见表现,严重者会影响患者的生活质量,更     

糖尿病足分型论治探讨

糖尿病足是由于糖尿病神经血管病变所引起的下肢病变总称,严重者或合并感染引起肢端坏疽者称为糖尿病肢端坏疽。有5％～10％的患者需行截肢手术,给患者、家庭、社会带来巨大的心理负担和经济负担。糖尿病足是跨学科的疑难病症,早期治疗,降低截肢率,降低致残率,造福患者,减轻社会负担,是医生和患者的共同心愿。我们对临床报道的40篇论文进行分析,结合我们临床观察的病例,认为糖尿病足的形成不仅有邪实的存在,而且有正虚的存在,正虚为本,邪实     

长方案超促排卵过程中LH变化趋势对IVF/ICSI-ET结局的影响

目的:探讨控制性超促排卵(COH)周期中LH变化趋势对体外受精/卵胞质内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)结局的影响。方法:回顾性分析228个IVF/ICSI长方案周期,1按h CG注射日与降调节后Gn启动前血清LH水平的变化趋势,分为降低趋势组和升高趋势组;2将升高趋势组及降低趋势组根据COH中期与降调节后LH水平变化趋势分为A组和B组(升高趋势中的降低组和升高组),C组和D组(降低趋势中的降低组和升高组);3按照LH降低幅度将A组和C组分为A1组(下降幅度50%)和A2组(下降幅度≥50%)、C1组(下降幅度50%)和C2组(下降幅度≥50%),比较各组IVF/ICS-ET结局的差异。结果:1降低趋势组与升高趋势组获卵数、胚胎数、总的受精率、卵裂率、可利用胚胎率、优质胚胎率比较,差异均无统计学意义(P0.05),而胚胎种植率(26.09%vs 35.22%,P0.05)、临床妊娠率(45.11%vs 58.67%,P0.05)显著较升高趋势组低,早期流产率较升高组略高(26.08%vs 15.91%),但差异无统计学意义(P0.05)。2A组与B组、C组与D组相比较IVF/ICSI结局均无统计学差异。3 A1组、A2组的受精率、临床妊娠率、胚胎种植率、可利用胚胎率组间比较,差异均无统计学意义,但优质胚胎率A1组较高(65.48%vs40.68%,P0.05);C1组、C2组IVF/ICSI结局相比无统计学差异。结论:IVF/ICSI-ET长方案,h CG注射日较Gn启动前血清LH升高,有助于提高胚胎种植率、临床妊娠率,且在COH中期LH下降幅度50%,能显著提高优质胚胎率。故在COH的过程中适时添加LH,选择合适的血清LH水平启动COH,有助于改善助孕结局。     

miR-483-5p 通过靶基因 ERK1调控人类颗粒细胞增殖凋亡平衡

目的：证明 miR-483-5p 及其靶基因 ERK1参与调控人类颗粒细胞增殖凋亡平衡。方法①体外培养人正常颗粒细胞,调控其 miR-483-5p 超表达,聚合酶链反应（PCR）及Western blot 法检测 ERK1的 mRNA 及蛋白表达情况;将包含野生型或突变型的 ERK1 mRNA 3′UTR 的 DNA 片段克隆在荧光素酶标记的质粒,共转染 miR-483-5p mimics、control-miR mimics 和野生型、突变型重组质粒,检测其颗粒细胞相对荧光素酶活性;②将 miR-483-5p mimics 及 ERK1 siRNAs单独及共同转染颗粒细胞,MTT 法及 TUNEL 法分别检测三种情况下卵巢颗粒细胞的增殖、凋亡情况。结果① miR-483-5p 超表达后,ERK1基因及蛋白表达均下降;与 control-Wt（野生型）转染组相比,miR-483-Wt 组的荧光素酶活性显著降低;miR-483-Mut（突变型）与 control-Mut 转染组间荧光素酶活性的比较差异无统计学意义;② miR-483-5p mimics与 ERK1 siRNAs 单独及共同转染颗粒细胞,三种转染条件下颗粒细胞增殖均显著受抑制、凋亡率显著升高,且三种作用效果差异无统计学意义。结论 miR-483-5p 通过直接与靶基因 ERK1结合,参与调控人类颗粒细胞增殖凋亡平衡。     

糖尿病足治法及用药分析

糖尿病足是由于糖尿病血管神经病变引起的下肢病变的总称,严重者或因合并感染引起肢端坏疽称为糖尿病肢端坏疽,是糖尿病发展的一个严重阶段。在美国,每年有6%的糖尿病患者因足部溃疡而住院治疗;在印度,住院糖尿病患者中10%为足部病变,其中70%以上需手术治疗;在英国,卧床糖尿病患者中50%以上是由于足部病变。在对6 000例糖尿病普查中发现,2%以上的患者有活动性足溃疡,2.5%为截肢者。大量资料表明,糖尿病足不但导致糖尿病患者生活质量下降,而且造成巨大的经济负担和社会负担,有5%～10%的患者需要行截肢手术;在非创伤性截肢中,糖尿病患者占50%…