女性卵巢功能与心血管疾病

卵巢作为女性重要的性腺器官,具有生殖与内分泌功能,卵巢所分泌的激素对女性的正常发育、机体健康起着至关重要的作用。卵巢激素可以改变心血管系统的生理及病理状态,从而在心血管疾病(CVD)的发生、发展中起着重要作用。心血管疾病是威胁女性健康和生命的主要疾病,是导致绝经后女性死亡的主要原因〔1〕。女性从青春期月经初潮开始,卵巢开始排卵和分泌性激素,绝经前女性CVD发病率显著低于男性,而随着卵巢功能减退,雌激素分泌下降,     

AMH蛋白在性成熟小鼠卵泡发育不同阶段及自然衰老过程卵巢组织中的表达变化

目的:通过检测抗苗勒氏管激素(AMH)蛋白在成年小鼠卵泡发育不同阶段和自然衰老过程卵巢中的表达变化,为卵泡的生长发育调控及卵巢衰老发生发展的机制研究奠定理论基础。方法:选用12,24,36,48周龄自然衰老C57BL/6小鼠为模型。收集12周龄C57BL/6小鼠不同发育阶段的卵巢和24,36,48周龄自然衰老C57BL/6小鼠卵巢。采用免疫组织化学方法和蛋白印迹技术检测各组卵巢中AMH蛋白的表达。结果:免疫组织化学显示,AMH蛋白在始基卵泡、初级卵泡,次级卵泡、窦状卵泡的颗粒细胞中均有表达,但在黄体和闭锁卵泡的颗粒细胞中未见表达。始基卵泡颗粒细胞中AMH蛋白表达明显低于初级卵泡、次级卵泡和窦状卵泡(P<0.05);窦状卵泡颗粒细胞中AMH蛋白表达明显低于初级卵泡和次级卵泡(P<0.05);初级卵泡和次级卵泡的AMH蛋白表达未见明显差异(P>0.05)。不同鼠龄的小鼠同级别卵泡颗粒细胞AMH的染色程度未见明显差异;但是24周龄以后间质中开始出现AMH蛋白表达,并且AMH的表达随鼠龄增加而上升;48周龄小鼠卵巢间质中AMH蛋白表达明显高于24周龄和36周龄(P<0.05);24周龄与36周龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。蛋白印迹技术结果显示,AMH蛋白在小鼠卵巢组织中的表达随鼠龄增加而降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:AMH蛋白主要表达于卵泡发育早期阶段的颗粒细胞,并且其在间质中随鼠龄增加表达增强,但是在整个卵巢组织中其表达量随鼠龄增加而降低。提示AMH可能在卵泡发育以及卵巢衰老中起重要的调控作用。     

颗粒细胞凋亡在卵泡闭锁中的研究进展

青春与美丽是女性永恒的追求,然而因年龄渐长,卵巢衰老却不可避免.卵巢衰老导致心血管疾病、骨折、老年痴呆等发病率增加,严重影响女性的生存质量.卵泡数目的减少、周围微环境的改变及其对外界刺激的反应力降低是卵巢衰老的主要原因,而卵泡数目的减少与卵泡闭锁密切相关.女性一生中能够发育成熟并最终释放的卵泡仅400 ～ 500个.因此,有超过99.9%的卵泡发生闭锁并最终消失.颗粒细胞凋亡是启动卵泡闭锁的重要机制.卵泡闭锁受到多种因素调控,如下丘脑-垂体-性腺轴、卵巢微环境、各种调节因子等.本文就与颗粒细胞凋亡相关的因素在卵泡闭锁中的研究进展进行综述.     

小鼠窦前卵泡与卵泡膜间质细胞的3种共培养方法比较

目的:探索小鼠窦前卵泡与卵泡膜间质细胞体外共培养的最佳模型。方法:分别从14~16日龄和21~25日龄C57BL/6小鼠中分离得到窦前卵泡和卵泡膜间质细胞,采用海藻酸钠凝胶法、Transwell间接、直接接触法体外共培养6天,比较各组卵泡形态、生长发育、激素分泌、存活率、卵母细胞成熟阶段。结果:海藻酸钠凝胶中培养的卵泡能够维持其三维结构,观察更清晰,而Transwell中培养的卵泡更有利于颗粒细胞的增殖,第5天时卵泡直径超过三维培养,雌二醇分泌水平与卵泡的生长模式相一致。第5天时海藻酸钠凝胶法(77.3%)和Transwell直接接触法(76.5%)的卵泡存活率要明显高于Transwell间接接触法(57.4%),P<0.05。3种方法的卵母细胞减数分裂恢复能力间无明显差异。结论:短期(5天内)的体外共培养可以选择Transwell直接接触法,而更长时间的共培养则推荐海藻酸钠凝胶法。     

临床医学生专业素养的调查及和谐医患关系的培养模式

随着社会的发展,时代的改变,经济的提升,医学体制的不断改革,医患关系的持续紧张,患者对医生的专业技能、职业素养的要求不断提高,从而使得学校重视起对医学生的专业素养的教育。为了解在不断改革的医学体制下的专业素养现状,采用分层抽样的调查方法对某高等医学院校的250名在校临床医学生进行问卷调查,为提高临床医学生的专业素养,推进医疗事业的改革和发展,构建更加和谐的医患关系,培育更加优秀的临床医学人才的培养模式提供可行性建议。     

薏苡根中多糖含量提取及抗氧化活性研究

目的研究薏苡根中多糖含量适宜的提取工艺,并对其进行抗氧化活性评估。方法薏苡根用95%乙醇醇沉,并依次用无水乙醇、丙酮、乙醚充分洗涤提取后,考察料液比、浸提时间、浸提温度对提取物含量的影响,在单因素实验的基础上做L_9(3~4)正交实验化提取工艺参数。通过测定薏苡根中多糖的还原能力,对清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、羟基、超氧阴离子自由基的能力来评价其抗氧化活性。结果薏苡根中多糖适宜的提取工艺参数:浸提温度90℃、浸提时间2. 50 h、料液比1∶40。在此条件下薏苡根多糖含量5. 80%。薏苡根多糖具有较好的还原能力,DPPH、羟基、超氧阴离子自由基IC50分别为2. 51,2. 60,7. 96 mg·mL^-1。结论在条件为料液比1∶40、浸提时间2. 50 h、浸提温度90℃下,从薏苡根中提取多糖的含量最高,且其多糖具有一定的抗氧化活性。     

Neuropilin-1 mRNA在新生小鼠及促性腺激素预处理不同时间点小鼠卵巢中的表达

目的:探讨Neuropilin-1(NRP-1)mRNA在新生小鼠及促性腺激素预处理不同时间点小鼠卵巢中的表达。方法:选用C57BL/6j小鼠新生及促性腺激素预处理不同时间点卵巢,通过实时定量聚合酶链反应检测NRP-1mRNA表达。结果:NRP-1mRNA在新生第3天小鼠卵巢中的表达是第5天的1.7倍(P<0.05),是第14天的1.5倍(P<0.05);相对于对照生理盐水注射组(对照组),在孕马血清处理后4、8、12、24h,NRP-1mRNA表达显著降低(P<0.05),至24h最低,而48h显著增高为对照组的1.5倍(P<0.05);给予人绒毛膜促性腺激素后与0h相比NRP-1mRNA表达于第4小时下降至最低(P<0.05),后于第12小时升至最高(P<0.05)。结论:NRP-1在始基卵泡募集和卵泡发育、成熟及排卵过程中发挥重要作用。     

氧化损伤产物8-OHdG、4-HNE、NTY在成年小鼠卵巢组织中的增龄变化

目的:探讨DNA、脂质和蛋白质氧化损伤产物在成年小鼠卵巢组织中的增龄变化.方法:选用12、24、48、75周龄自然衰老C57BL/6小鼠为模型.采用免疫组织化学方法和蛋白印迹技术检测各年龄组小鼠卵巢中8羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHdG)、4羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)、硝基酪氨酸(nitrotyrosine,NTY)的表达变化情况.结果:8-OHdG、4-HNE、NTY在卵巢间质细胞随增龄表达增加(P＜0.05).12周龄组3种物质的表达均明显低于其他各组,差异有显著统计学意义(P＜ 0.01);24周龄含量低于48、75周龄组,差异有显著统计学意义(P＜ 0.05);48周龄组与75周龄组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).而各年龄组卵泡膜细胞、颗粒细胞及卵母细胞中未见明显变化.结论:氧化损伤在卵巢间质细胞中随增龄表现明显,间质细胞氧化损伤可能是导致卵巢衰老的原因之一.     

不同分离方法对人卵巢颗粒细胞体外培养的影响

目的 比较人卵巢颗粒细胞不同分离方法.方法 取体外受精-胚胎移植(ⅣF-ET)采卵时的卵泡液,用裂解法、密度梯度离心法、酶解法分离纯化并原代培养人卵巢颗粒细胞.比较不同的分离方法获得的卵巢颗粒细胞数量、形态及其对早期培养的影响.结果 裂解法得到的颗粒细胞数较密度梯度离心法、酶解法多(P＜0.005,P＜0.001);比较3种分离方法获得的卵巢颗粒细胞的活性和孕激素分泌量差异无统计学意义;接种24h后,酶解法得到的卵巢颗粒细胞存活量最多(P＜0.05),裂解法得到的存活细胞最少(P＜0.05);裂解法获得的卵巢颗粒细胞继续培养48、72及96h均较培养24h有明显细胞增殖(P＜0.05),且与其他组存活的细胞量差异无统计学意义.结论 裂解法得到的颗粒细胞数量多,细胞生长较好,操作简单,是较理想的分离人卵巢颗粒细胞的方法.     

转化生长因子βⅡ受体在小鼠卵泡早期发育中的表达

目的:通过检测转化生长因子βⅡ受体(TβRⅡ)在小鼠卵泡早期发育过程中的表达变化,为卵巢细胞间调控网络的研究提供理论基础.方法:取0、1、2、5、7天和11天雌性健康小鼠的卵巢组织.采用免疫组织化学法和实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测卵巢组织中TβRⅡ蛋白及mRNA表达水平.结果:TβRⅡ蛋白在各组小鼠卵巢的卵母细胞胞浆中均有表达,原始生殖细胞囊中表达最强,始基卵泡中表达下降,初级、次级卵泡中表达增强.初级卵泡的颗粒细胞开始表达TβRⅡ,并随着卵泡发育表达逐渐增强.卵巢组织中TβRⅡmRNA表达水平随卵巢的生长发育先降低后增高,0、1天和11天小鼠卵巢组织中的TβRⅡmRNA表达水平约是2、5天和7天小鼠卵巢组织的2倍,差异显著(P＜0.05).结论:TβRⅡ在卵泡发育初始阶段的表达具有时间和空间的特异性,提示TGF-β信号通路在早期卵泡发育过程中可能起着重要的调节作用.