同型半胱氨酸对人主动脉平滑肌细胞 HCY-2表达及细胞增殖的影响

目的体外研究同型半胱氨酸（HCY）及叶酸对人主动脉平滑肌细胞（hASMCs）中同型半胱氨酸诱导基因（HCY-2）蛋白表达的影响，以及HCY对hASMCs增殖的影响。方法以免疫组织化学ABC法对体外培养的hASMCs中的HCY-2表达进行形态学观察，并利用图像分析系统对结果进行定量分析；以细胞计数法观察不同浓度HCY对体外培养的hASMCs增殖的影响。结果HCY-2主要表达在hASMCs的胞浆中，其表达强度与培养液中HCY浓度呈正性剂量依赖关系；叶酸促使HCY-2表达增强；不同浓度HCY可影响hASMCs的增殖，细胞增殖数目随HCY浓度增长而增加，当HCY到达1．25mmol／L时，细胞数目达到最大值，随着HCY浓度的继续增加，细胞增殖呈下降趋势。结论HCY促使HCY-2表达增强；并影响hASMCs的增殖。叶酸对HCY有拮抗作用。     

小鼠胚胎与子宫内膜中整合素α5的表达

目的：观察整合素α5在小鼠早期胚胎和子宫内膜中的表达分布状况，探讨整合素在胚胎着床中的可能作用。方法：用免疫组织化学ABC法染色，对发育不同时期的小鼠胚卵和妊娠2d-6d、8d、13d以及非妊娠期的子宫内膜中整合素内的表达分布进行形态学观察与半定量分析。结果：整合素α5的阳性反应物质在小鼠早期胚卵胞浆内；非妊娠期子宫内膜和妊娠期的脱膜上皮与基质细胞内均有整合素α5表达，植入前表达相对较弱，植入后随妊娠的进展逐渐增强。结论：提示整合素α5在小鼠胚卵着床中起重要作用：推测它不参与胚卵对母体子宫内膜的识别和粘附，而是参与了粘附后的侵入及胚胎发育过程。     

平滑肌细胞的体外培养

血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell,VSMC）的体外培养是研究高血压、动脉粥样硬化和血管成型术后再狭窄、缺血再灌注损伤等心血管疾病的关键性起始步骤,此法有助于揭示各种心肺疾患的病理机制及药物作用机理。用培养的VSMC进行研究已成为心血管系统疾病的主要研究手段。目前国内外常用的VSMC培养方法为酶消化法和贴块法,而我们发现这两种方法各有利弊,现做如下讨论。     

肥大细胞数量及脱颗粒变化在小鼠妊娠早期子宫中的观察

为了观察小鼠妊娠早期子宫中肥大细胞的变化 ,我们采用改良的甲苯胺蓝染色法对肥大细胞进行特殊染色 :1 .昆明小鼠 ,体重 2 5～ 30 g,雌雄 1 :1合笼 ,次日晨检见阴栓者定位妊娠第 1 d( D1 ) ,分别取未妊娠、D3、D4、D7、D8小鼠子宫 ,1 0 %甲醛 PBS( p H7.3)固定 2 4hs,石蜡切片。 2 .甲苯胺蓝染 30 sec,双蒸水洗去浮色 ,30 %酒精 PBS分色 1 min,蒸馏水终止反应。 3.光镜下对妊娠不同天数的小鼠子宫中的肥大细胞进行计数 ,同时比较肥大细胞脱颗粒的百分率。结果显示 :肥大细胞多散布于小鼠子宫的浆膜、浆膜下层以及系膜内 ,肌层中很少见…     

HCY、HCY-2及叶酸对人胚心肌细胞超微结构影响

人胚心肌细胞增殖、分化与发育的异常是多种先天性心脏畸形发生的主要原因。目前认为，妊娠过程中，HHM与先天性畸形的发生密切相关。为探讨HCY、HCY-2的表达蛋白和叶酸在人胚心脏发育中的作用，我们取体外培养的第三代人胚心肌细胞，分为空白对照组、0．5、1．0、1．5μmol／mlHCY、HCY-2Ab(1μl／ml原液)、     

水通道蛋白1在生后小鼠精囊腺与前列腺发育过程中的表达与分布

目的 探讨水通道蛋白1(AQP1)在雄性小鼠出生后不同发育阶段精囊腺和前列腺的表达与分布.方法 应用RT-PCR、免疫印迹和免疫组织化学染色方法,检测出生后15d、35d、70d 小鼠精囊腺、前列腺AQP1 mRNA、蛋白表达水平及细胞定位.结果 RT-PCR与免疫印迹结果均显示,出生后70d小鼠精囊腺、前列腺AQP1 mRNA及蛋白表达量较出生后15d显著增强(P<0.05);免疫组织化学染色显示,AQP1蛋白仅表达于出生后15d、35d小鼠精囊腺平滑肌细胞、前列腺腺泡上皮细胞基膜及间质细胞,而此时期精囊腺上皮细胞AQP1蛋白表达呈阴性;出生后70d,AQP1蛋白强烈表达于精囊腺和前列腺上皮细胞.结论 AQP1 mRNA及蛋白在雄性小鼠精囊腺、前列腺的表达与分布随年龄增长而改变,此变化可能与雄性附属性腺发育相关.     

小鼠胚胎与子宫内膜中整合素α_5的表达

目的:观察整合素α5在小鼠早期胚胎和子宫内膜中的表达分布状况,探讨整合素在胚胎着床中的可能作用。方法:用免疫组织化学ABC法染色,对发育不同时期的小鼠胚卵和妊娠2 d～6 d、8 d、13 d以及非妊娠期的子宫内膜中整合素α5的表达分布进行形态学观察与半定量分析。结果:整合素α5的阳性反应物质在小鼠早期胚卵胞浆内;非妊娠期子宫内膜和妊娠期的脱膜上皮与基质细胞内均有整合素α5表达,植入前表达相对较弱,植入后随妊娠的进展逐渐增强。结论:提示整合素α5在小鼠胚卵着床中起重要作用:推测它不参与胚卵对母体子宫内膜的识别和粘附,而是参与了粘附后的侵入及胚胎发育过程。     

生殖细胞核因子在雌鼠卵巢的表达特点

目的研究生殖细胞核因子(GCNF)在不同年龄、不同生理周期的雌鼠卵巢中的表达特点.方法用免疫组化技术,检测胚胎卵巢、生后5d、10d、3w、6w、8w、3月雌鼠及在不同动情周期雌鼠卵巢中GCNF的表达变化,并通过图像分析系统进行统计学分析,比较不同组卵巢中GCNF表达的差异有无显著性.结果1.不同年龄组:GCNF在新生5d卵巢的生长卵泡中即出现明显表达,随着年龄的增长,表达逐渐增强,在5w时达到最强,然后表达持续在高水平,直到3月.2.不同动情周期:随着动情前期、动情期、动情后期及动情间期的变化,GCNF表达逐渐增强.结论在不同年龄、不同生理周期的卵母细胞中,GCNF表达的差异有显著性,提示其与卵母细胞的生长、雌鼠的生殖力有着密切的关系,同时提示其表达与不同激素之间有一定的相互影响.     

同型半胱氨酸诱导基因在正常和畸形人胚心脏中的表达

目的 研究同型半胱氨酸诱导基因(HCY-2)在发育不同时期的正常人胚和畸形人胚心脏中的表达，揭示HCY-2表达蛋白在人胚心肌细胞发育和分化中的作用。方法 取正常和先天性畸形人胚心脏，采用免疫组织化学及图像分析技术对心脏内HCY-2表达变化进行定量测定分析。结果 HCY-2在人胚心脏发育整个时期均表达，其表达部位主要在心肌纤维内；先天性畸形人胚心脏中的HCY-2表达增强。结论 HCY-2表达蛋白通过影响心肌细胞的增殖而影响人胚心脏发育过程，其表达异常与先天性畸形的发生密切相关。     

二甲苯对妊娠小鼠及胚胎发育的毒性作用

目的探讨二甲苯对妊娠小鼠及胚胎发育的影响.方法对妊娠初期的雌性小鼠采用静式吸入染毒法进行二甲苯染毒,观察胎鼠体重变化;原子吸收分光光度测定法（atomic absorption spectroscopy,AAS）检测妊娠母鼠血清Fe^2＋、Mg^2＋含量;单细胞凝胶电泳法（single cell gel electrophoresis,SCGE）检测妊娠母鼠外周血有核细胞DNA损伤程度.结果染毒各组妊娠母鼠血清Fe^2＋、Mg^2＋含量下降（P＜0.01,P＜0.05）,并具有统计学意义;染毒组妊娠母鼠外周血有核细胞发生DNA断裂并形成彗尾图像;染毒各组胎鼠体重较正常组相比均显著下降,且存在显著性差异（P＜0.05）;部分胎鼠表现为胚胎被吸收、脑膜脑膨出、椎骨发育不全等.结论二甲苯可造成妊娠母鼠血清Fe^2＋、Mg^2＋含量下降、外周血有核细胞DNA损伤并致使流产发生;二甲苯引起胎鼠体重下降,并影响生长发育.