不同冷冻方法对人卵巢组织血管内皮生长因子表达及血管生成的影响

背景:人卵巢组织冷冻已成为一种保存生育能力的手段,卵巢组织移植后必须经过血管重建过程才能恢复血供,冷冻保存和复苏技术是影响移植后卵巢组织血管重建的关键.目的:比较新型玻璃化冷冻和慢速冷冻后人卵巢组织血管内皮生长因子表达情况及微血管密度,探讨不同冷冻方法对人卵巢组织血管重建的影响.方法:8份卵巢组织标本取自子宫内膜癌患者手术切除的正常卵巢组织,将每份卵巢皮质切成1.5 mm×1.5 mm×1.0 mm大小的组织块共12块后,随机数字表法分为3组:对照组(新鲜组)、新型玻璃化冷冻组和慢速冷冻组.将新型玻璃化冷冻组卵巢组织块依次在含体积分数7.5%乙二醇+体积分数7.5%二甲基亚砜+体积分数20%胎牛血清的TCM-199培养液和含体积分数15%乙二醇+体积分数15%二甲基亚砜+0.5 mol/L蔗糖的TCM-199培养液中平衡脱水,然后直接浸入液氮并装入冷冻管保存,解冻时按浓度梯度1.0,0.5,0.25 mol/L蔗糖和含体积分数20%牛血清的TCM-199培养液依次洗脱冷冻保护剂.将慢速冷冻组人卵巢组织块放入盛有1 mL冷冻液(含1.5 mol/L二甲基亚砜+体积分数20%牛血清+0.1mol/L蔗糖的TCM-199培养液)的1.8 mL冷冻管内平衡,然后放入程序冷冻仪中按设定程序进行冷冻.解冻时按浓度梯度1.0 mol/L二甲基亚砜+0.1 mol/L蔗糖、0.5 mol/L二甲基亚砜+0.1 mol/L蔗糖、0.25 mol/L二甲基亚砜+0.1 mol/L蔗糖和0.1 mol/L蔗糖依次洗脱冷冻保护剂.冻融组及对照组均进行体外培养.免疫组织化学观察培养0,2,4,6 d各组人卵巢组织血管内皮生长因子和CD34表达情况,并进行微血管计数.结果与结论:3组人卵巢组织培养前后间质细胞中均见血管内皮生长因子成斑片状弱表达,培养2 d血管内皮生长因子表达均增加并达到峰值,培养4 d均开始减弱,6 d时进一步减弱;与慢速冷冻组相比,新型玻璃化冷冻组血管内皮生长因子表达更接近对照组.3组人卵巢组织培养2 d微血管密度均增加并达到峰值,对照组和新型玻璃化冷冻组明显高于慢速冷冻组(P<0.05):慢速冷冻组培养4 d时微血管密度较培养2 d时显著下降(P<0.05);3组培养6 d时微血管密度较培养2 d时显著下降(P<0.05).与慢速冷冻法相比,新型玻璃化冷冻法能更好地保存人卵巢组织间质细胞和细胞外基质,对卵巢组织血管内皮生长因子表达及微血管生成的影响更少.     

子宫肌瘤患病年龄分布与追踪研究

目的:探讨子宫肌瘤年龄分布,病情发展与年龄、患病时间的关系.方法:对我院1999至2004年妇科病普查发现的子宫肌瘤患者人群进行分析,并对此期间患者2年1次连续追踪.结果:6年普查38826例,患子宫肌瘤2555例,40～54岁围绝经期患者占77.18%(1972/2555例).分手术和期待疗法对患者治疗,40～54岁手术治疗率最高占21.15%(417/1972例).6年追踪患者1151例,患病5年手术治疗率最高,占25.20%(32/127例).80.63%～84.45%患者采用期待疗法.结论:围绝经期是子宫肌瘤高发期,也是手术治疗最多年龄段.患病5年手术率最高;大部分患者可采用期待疗法避免手术治疗.     

促性腺激素释放激素激动剂降调节中发生妊娠的原因及处理

在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)过程中,长方案促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)联合促性腺激素(Gn)是最常用的方法,但在GnRH-a降调节过程中可能发生意外妊娠。多数研究报道的意外妊娠发生率与输卵管因素、精液异常或不明原因不育自然妊娠率百分之一相近。一、GnRH-a与降调节促性