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目的:探讨大鼠肺成纤维细胞体外培养及急性炎症模型建立的方法.方法:采用胰酶消化法、差速贴壁法,分离、纯化肺成纤维细胞,然后采用H-DMEM培养液进行细胞培养.采用免疫荧光法对所分离的细胞进行鉴定.采用脂多糖(LPS)干预建立成纤维细胞体外急性炎症模型,实验分组:空白组、0.1 μg/mL LPS组、1μg/mL LPS组、10 μg/mL LPS组,并利用细胞增殖/毒性检测试剂(MTT)在干预后3、6、9 h分别测定吸光度(OD)值.结果:成纤维细胞体外培养24 h后,镜下可见组织块周边有长梭型细胞爬出,72 h后生长迅速,4d接近融合.经免疫荧光测定,肺成纤维细胞波形蛋白(vimentin)阳性,CD31阴性.在干预后各时间段中,1 μg/mL LPS组测得的OD值高于其他各组,在1μg/mL LPS组中,干预后6h测得的OD值高于其他各时间段,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:该法可以体外培养出大鼠肺成纤维细胞,用浓度为1 μg/mL的LPS干预体外培养的成纤维细胞6h能建立较为合理的急性炎症模型. 相似文献
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目的 探讨先天性巨结肠及其同源病定义、病理诊断方法及标准.方法 记录2015年10月在武汉同济医院小儿外科召开的先天性巨结肠(Hirschsprung's disease,HD)及其同源病临床与病理国际高峰论坛峰会病理分会中的热点问题及展开的深入讨论,并进行归纳总结.结果 直肠黏膜活检AchE染色被一致认可为术前诊断的金标准.巨结肠切除术中活检是必需的,但染色方法的选择未有统一.作为传统方法,单纯HE染色的精确性受到了质疑,普遍认为需要同时进行其他染色,而具体染色方法因各自习惯而异.目前缺乏大样本的正常新生儿和儿童肠道发育各项数据,因此对于神经节细胞减少症,神经元发育不良的诊断标准尚有争论.肠神经元发育不良(intestinal neuro-nal dysplasia,IND)是不是一种疾病实体,是原发性还是继发性疾病未有定论.病理发现的各类非神经节病变目前还不清楚应该如何定义和归类,因此更要求病理专家应对其作出详尽描述.结论 国内外对巨结肠及其同源病在定义、病理诊断方法及标准上有一定共识,但部分争论热点由于缺乏理论和实践数据支撑而未有统一结论,而这些热点必将成为将来研究的新方向. 相似文献
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改良Shiraki手术治疗隐匿性阴茎 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 探讨改良Shiraki手术方法在隐匿性阴茎手术中的意义.方法 自2005年5月至2009年12月间对53例隐匿性阴茎患儿采用改良Shiraki手术进行治疗,其主要手术步骤是:①分别在包皮内板的3点、9点处及外板的6点、12点处纵向切开;②内板与外板分离,在阴茎白膜外层行阴茎皮肤脱套至阴茎根部,同时切除阴茎体外层纤维索带,充分松解阴茎使其完全伸展;③包皮系带横切纵缝成形使包皮内板腹侧延长;④剔除内板皮下水肿的筋膜组织,修剪过宽包皮内板皮瓣,外板尽量保留,然后内外板皮瓣嵌插缝合;⑤置Folay导尿管,用网眼纱布均匀包扎阴茎.结果 术后随访18至24个月,阴茎显露明显改善,较术前延长2~4 cm,阴茎皮肤无坏死.阴茎外形均满意,3例术后阴茎皮肤水肿,3个月后消退,此3例为初期病例;随访1年以上者阴茎肿胀基本消失.结论 采用改良Shiraki手术方法进行包皮延长成形术矫正隐匿性阴茎可获得满意的效果,与Shiraki术式相比其有如下优点:①手术操作简化,易掌握并缩短了手术时间;②皮瓣血供好,切口愈合佳,减少了皮瓣坏死的机会;另外对皮瓣淋巴回流阻断明显减轻,术后阴茎皮肤肿胀情况不明显;③不进行阴茎体固定仍可获得满意的效果,并且避免了阴茎背侧血管神经及尿道的损伤. 相似文献
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目的: 探讨脂氧素A4对人支气管上皮细胞(HBECs)环氧合酶2(COX-2)表达的影响。方法: 应用不同浓度(0.1、1、10 mg/L)的内毒素(LPS)刺激HBECs 9 h,或者用1 mg/L LPS分别刺激HBECs不同时点(3 h、6 h、9 h)后,测定HBECs的COX-2 mRNA表达和细胞上清液前列腺素E2(PGE2)水平。应用不同浓度 (0、100、400 μmol/L) 的脂氧素A4作用于经过LPS(1 mg/L)刺激培养9 h的HBECs,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液PGE2的水平, 同时分别应用RT-PCR和Western blotting分别检测HBECs COX-2 mRNA及蛋白的表达。结果: LPS刺激培养条件下HBECs的COX-2 mRNA表达及其上清液PGE2水平增加,并呈时间、剂量依赖性。脂氧素A4能抑制LPS刺激培养HBECs COX-2蛋白和mRNA的表达及上清液PGE2的水平,并呈剂量依赖性。结论: 脂氧素A4能抑制LPS诱导的HBECs COX-2表达及上清液PGE2的水平。 相似文献
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目的 探讨脂氧素对大鼠原代肺成纤维细胞环氧合酶-2及前列腺素E2表达的影响.方法 分离、纯化、鉴定得到大鼠肺成纤维细胞,用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)干预建立成纤维细胞体外急性炎症模型,并利用细胞增殖/毒性检测试剂MTT摸索出成纤维细胞急性炎症模型的最适LPS质量浓度和药物干预时间.分别应用不同浓度(0、100、200、400 nmol/mL)的脂氧素作用于经过LPS诱导的体外培养原代肺成纤维细胞.采用酶联免疫法(ELISA)检测细胞上清液前列腺素E2(PGE2)水平,同时应用Western blot检测原代肺成纤维细胞环氧合酶(COX-2)蛋白的表达.结果 用1 μg/mL LPS干预体外培养的原代肺成纤维细胞6h能建立较为合理的急性炎症模型.脂氧素能抑制LPS诱导的原代肺成纤维细胞环氧合酶(COX-2)蛋白的表达.对照组、LPS组、LPS组与LPS+脂氧素组测PGE2质量浓度分别为55.84 pg/mL、411.73 pg/mL、307.07 pg/mL,LPS组与LPS+脂氧素组间比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 脂氧素能抑制LPS诱导的原代肺成纤维细胞环氧合酶-2及前列腺素E2的表达,并呈剂量依赖性. 相似文献
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目的 探讨亚甲蓝对感染性休克患者术中氧代谢的影响.方法 行急诊手术的感染性休克患者40例,ASA分级Ⅱ或Ⅲ级,年龄38~64岁,体重48~75 kg,随机分为2组(n=20):去甲肾上腺素组(NE组)和亚甲蓝组(MB组).人室后NE组静脉输注去甲肾上腺素0.5~2.0μg·kg-1·min-1至术毕,MB组静脉输注亚甲蓝0.5~1.0 mg·kg-1·h-1至术毕.静脉注射咪达唑仑-依托咪酯-舒芬太尼-维库溴铵麻醉诱导,经口气管插管行机械通气,术中吸入七氟醚,间断静脉注射维库溴铵和舒芬太尼维持麻醉.于麻醉诱导前(T0)、手术开始前(T1)、手术开始后30 min(T2)、60 min(T3)、90 min(T4)及术毕时(T5)记录HR、SvO2、MAP、CVP、每搏量,计算外周血管阻力指数(SVRI)、CI.于上述时点采集桡动脉和颈内静脉血样行血气分析,并测定动脉血乳酸(Lac)浓度,计算氧供指数(DO2I)、氧耗指数(VO2I)和氧摄取率(ERO2).结果 与NE组比较,MB组MAP、HR、CVP、SVRI、DO2I、VO2I和ERO2升高,CI和Lac降低(P<0.05).与T0时比较,T2~5时MB组MAP、HR、CVP、SVRI、VO2I、DO2I和ERO2升高,CI和Lac降低,NE组CI和Lac降低,SVRI、VO2I和ERO2升高(P<0.05),DO2I差异无统计学意义(P>0.05).结论术中应用0.5~1.0 mg·kg-1·h-1亚甲蓝不仅可改善感染性休克患者术中血液动力学,还可改善机体氧代谢. 相似文献
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Aurora-A激酶是丝/苏氨酸激酶蛋白激酶,被认为是一个新的致癌因子,参与调控细胞有丝分裂中中心体的成熟与分离,纺锤体的组装、稳定,染色体的浓集、中板聚合和稳定等多种事件[1].阐明Aurora-A激酶表达在肾癌组织中的意义,可能有助于寻找治疗肾肿瘤的新方法.现就近年来研究Aurora-A激酶与肾癌的关系作一综述. 相似文献
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Aurora-A激酶是丝/苏氨酸激酶蛋白激酶,被认为是一个新的致癌因子,参与调控细胞有丝分裂中中心体的成熟与分离,纺锤体的组装、稳定,染色体的浓集、中板聚合和稳定等多种事件[1].阐明Aurora-A激酶表达在肾癌组织中的意义,可能有助于寻找治疗肾肿瘤的新方法.现就近年来研究Aurora-A激酶与肾癌的关系作一综述. 相似文献