二仙汤及其拆方对老年大鼠下丘脑作用的形态学研究

本实验观察了二仙汤(仙茅、淫羊藿、巴戟天、当归、知母、黄柏)及其温肾益精养血药(前四味药)和滋阴泻相火药(后二味药)两十拆方对20月龄雄性、雌性老年大鼠下丘脑弓状核、视上核和室旁核作用的形态学作用．结果表明。雄性老年大鼠弓状核细胞数增加。视上核细胞数减少．两核内神经分泌颗粒增加，雌性老年大鼠弓状核、视上核、室旁核细胞数与神经分泌颗粒减少。表明老年雄性大鼠下丘脑对血浆性激素含量下降作出代偿，并出现失代偿倾向，而老年雌性大鼠下丘脑已出现了失代偿。二仙汤及其拆方有不同程度地改善雌、雄老年大鼠下丘脑的代偿功能．其中以温肾药作用最为显．并能不同程度地延缓下丘脑的衰老。     

166例慢性胃炎患者舌象特征的计算机识别研究

目的：将已建立的舌色计算机识别方法应用于临床，为检验和修正该方法提供依据。方法：对166例慢性胃炎患者舌色与苔色、舌质老嫩、点刺瘀点等舌象特征进行了观察分析。结果：计算机程序识别有较好的识别效果，识别总体符合率分别为舌色86.75％，苔色92.16％，舌象的老嫩74．10％，点刺、瘀点77．10％。结论：应用计算机进行临床舌诊具有识别客观和标准恒定的优势，具有良好的应用前景。     

二仙汤及其拆方对老龄大鼠下丘脑GnRH基因转录与表达的调节作用

二仙汤（仙茅、淫羊囊、巴戴天、当归、知母、黄柏）及其温（前4味药）和寒（后2味药）两个拆方对24月龄雌、雄SD大鼠下丘脑GuRH mRNA含量和垂体GnRH含量的调节作用。结果表明：24月龄雌、雄老年大鼠下丘脑GuRH基因转录与表达水平下降。表明该龄大鼠下丘脑GnRH神经元的活动能力减退，加重了生殖系统的衰老。二仙汤及其拆方有提高雌、雄老年大鼠下丘脑GuRH基因的转录水平，提高腺垂体GuRH的单位含量，提示二仙汤治疗更年期综合症取效的部分机制与该方延缓下丘脑衰老，提高其GuRH转录与表达水平有关。     

小鼠四诊采集项目标准的建议

辨证论治机理实验研究主要采用的是小鼠.通过我们长期的研究和观察,初步建立了小鼠四诊采集项目标准.该标准主要有四部分内容:(1)类似于问诊采集的内容,包括一般情况、始病和治疗经过、饮食情况、脏腑病位;(2)闻诊采集的内容;(3)望诊采集的内容,包括自然望诊、胖瘦、小鼠旷场自主活动计数、爪和尾显微拍照后计算机图像处理等内容,涉及类似望形体状况、望形体虚实、望形体神、望形体寒热、望运动步态、望精力、望毛色虚实、望呼吸状况、望眼神、望耳、望鼻、望唇、望腹、望二阴、望大便、望小便、望爪、望尾、望睡眠、爪和尾显微观察等;(4)切诊采集的内容,包括体温、肿块检测、脉的至数与节律、肤之温凉、肌力等.同时,还对是否可以实现小鼠的四诊以及如何开展四诊进行了理论分析.     

DEN诱发大鼠肝癌过程中肝组织基因表达谱的演变

目的:揭示肝癌诱发过程中肝组织基因表达谱的演变,为中医药防治原发性肝癌提供参考.方法:采用DEN诱发大鼠肝癌,分别于诱癌的第4周、8周、16周、20周(肝癌形成)切取肝(合肝癌)组织,常规提取RNA,Affymetrix Rat 230A GeneChip及技术检测大鼠肝组织基因表达的差异和演变.结果:在芯片的15710个基因中,正常组有9225个基因表达,诱癌4周表达增至9396个,8周增至9872个,16周增至10496个,20周有10420个.在肝癌诱发过程中,存在大量基因表达的消长以及高表达基因数的增加,其中部分已知基因的结果.结论:DEN诱发大鼠肝癌过程中基因组变化是十分复杂的,而且文献追踪表明,国内外对在这些基因的功能及其与肝癌发生、发展的关系大多不明确.因此,如何逐一找到那些起着关键作用的基因,进一步阐释其在肝癌的发生、发展和转归中的作用,及其与中医证候演变和相应治法的关系,是今后中医基础理论实验研究的重要方向.     

气虚证大鼠肾上腺下调的基因筛选

目的 筛选气虚证大鼠肾上腺下调的基因.方法 采用16周龄Wistar大鼠、自发性高血压大鼠(SHR大鼠)、自发性糖尿病大鼠(GK大鼠),运用标准化大鼠诊法,及 Gene Chip Rat Exon1.0 ST Array等技术,检测正常Wistar大鼠、正常气虚Wistar大鼠、SHR气虚和气盛大鼠、GK气虚和气盛大鼠等肾上腺基因表达谱,进而以倍数法筛选3个气虚证肾上腺一致性下调的基因.结果 ①3个气虚证同时下调的高表达基因有22个,主要包括参与代谢、运输类的Cyp11b3、Hsd3b6、Psmb4、Atpif1、Clic4、Gnai3、Ndufc2、Txnl1;参与信号转导、转录调控类的Jak2、Rhoa、Commd3、Tsc22d1、Polr2g、Capza2.②3个气虚证同时下调中等表达基因有10个,包括参与代谢、运输类的Glyat、Hpd、Slc22a2、Slc7a13;参与转录调控及信号转导类的Pcna、Cbx3、Umod、Serpine1、Emd、MGC108823等.③部分生物学功能不明确的基因,包括Calm2、Papd4、Myd116、Spg21、Emcn、Dhx40、LOC681219、RGD1359616等.结论 气虚证Wistar、SHR与GK大鼠肾上腺组织下调表达的基因主要涉及代谢、运输、调控转录、信号转导等生物学过程的紊乱.     

正常气虚证小鼠甲状腺氧化磷酸化通路相关基因转录特征

目的:观察正常气虚证昆明小鼠甲状腺氧化磷酸化通路相关基因转录特征。方法:采用小鼠计量化辨证论治方法及Affymetrix GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术,筛选正常气虚证昆明种小鼠检测其甲状腺基因差异表达的特征。结果:依据KEGG数据库小鼠氧化磷酸化通路与甲状腺芯片数据匹配后得到的85个基因,整体呈上调趋势,其中Ndufb3、Cox6b1、Atp5g3上调较为显著。结论:正常气虚证小鼠甲状腺氧化磷酸化通路相对表达量整体呈上调趋势,提示该通路总体处于比较活跃的代偿状态而非抑制。     

2060例原发性肝癌中医证候分布规律的临床流行病学调查研究

采用统一辨证标准和资料处理方法的大样本临床流行病学调研方案，临床调查原发性肝癌2060例。结果表明，原发性肝癌病机复杂，其常见证候分布依次为肝血瘀阻、脾气虚、肝郁气滞、脾虚湿阻、肝胃不和、脾胃湿热、肝阴虚、肾阴虚等；肝癌各期的征候分布互有异同。研究结果提示，肝血痰阻、脾虚气滞是肝癌的根本病机；肝癌的特点是肝脾同病，治疗应肝脾同治。     

预知子、白花蛇舌草抑制肝癌细胞恶性增殖的研究

目的:在中医药常用治法方药中筛选最具抑制肝癌细胞恶性增殖的药物。方法:采用MTT法和细胞形态学检查,观察中药行气活血方、清热解毒方及其各组成药物乙醇提取物及联合细胞毒抗生素G418对肝癌细胞恶性增殖的抑制作用。结果:清热解毒方及各单味药物对肝癌细胞恶性增殖均具有不同程度的抑制作用,存在量效关系;其中5mg/ml白花蛇舌草对肝癌细胞的增殖抑制作用最强(P<0.05)。行气活血方及各单味药物对肝癌细胞恶性增殖也多具不同程度的抑制作用,存在量效关系;其中5mg/mL预知子的作用尤为突出,强于阳性对照G418 0.6 mg/mL(P<0.01)。2.5mg/mL预知子联合0.3 mg/mL G418用药,其对肝癌细胞恶性增殖的抑制作用接近0.6 mg/mL G418,提示有减量增效作用。无论是单独用药还是联合G418,预知子对肝癌细胞恶性增殖的抑制作用均显著于白花蛇舌草(P<0.01)。结论:预知子、白花蛇舌草是抑癌扶正行气活血方中抑制肝癌细胞恶性增殖的主要药物,其中预知子的作用最显著。预知子联合细胞毒抗生素,具有减少细胞毒抗生素用量且增效的作用。     

同病异证H22肝癌小鼠肿瘤组织细胞凋亡通路基因差异表达的特征

目的:观察昆明种H22肝癌小鼠邪毒壅盛证与气虚证肿瘤组织细胞凋亡通路基因表达特征,探讨中医同病异证发生的物质基础。方法:采用小鼠计量化辨证方法,筛选出瘤早期邪毒壅盛证与气虚证同病异证H22肝癌小鼠,采用Affymetrix GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array检测肿瘤组织细胞凋亡通路相关基因表达的特征。结果:依据KEGG数据库细胞凋亡通路,筛选出芯片数据中匹配的33个基因,发现(1)TNF-α和IL-1依赖的细胞凋亡信号通路总体上不利于邪毒壅盛证小鼠肿瘤细胞的凋亡;(2)IL-3依赖的细胞凋亡信号通路总体上反似有利于邪毒壅盛证小鼠肿瘤细胞凋亡;而(3)线粒体介导的细胞凋亡信号通路,邪毒壅盛证小鼠一致表达下调,提示不利于其细胞凋亡。结论:邪毒壅盛肝癌小鼠肿瘤细胞恶性增殖程度高,可能与线粒体介导的细胞凋亡信号通路系列相关基因表达轻度抑制有关。