32种中草药提取物体外抗骨肉瘤作用的筛选

目的对32种巾草药进行初步抗骨肉瘤的体外筛选实验，为中药标准化和治疗骨肉瘤提供依据。方法应用MTT法测定各中药提取物对U2OS细胞株增殖活性的影响，检测其抑制骨肉瘤细胞的剂量效应关系：应用形态学观察、FCM及AnnexinV法测定筛选m的中药水提取物对U2OS细胞的凋亡作用。结果32种中草药提取物中蟾酥、牛胆粉等对骨肉瘤U2OS细胞株具有增殖抑制作用，深入研究表明蟾酥、牛胆粉水提取物对U2OS细胞具有促进凋亡作用，其中以蟾酥促进凋广作朋最为明瞳：结论通过对32种中草药进行筛选，发现蟾酥、牛胆粉等对骨肉瘤细胞株U20S的增殖有抑制作用，为进一步开展抗骨肉瘤中草约有效成分的筛选及体内动物研究提供实验依据。     

51例复发性骨巨细胞瘤的治疗

目的：探讨复发性骨巨细胞瘤（GCT）的治疗。方法：回顾51例四肢复发性GCT的临床资料．分析治疗效果。外科治疗依据病理和影像学分期，进行扩大的肿瘤刮除、辅助囊壁处理或肿瘤切除功能重建。结果：平均随访36个月，再复发8例，总复发率为15．7％，局部囊内刮除后再复发率为22．7％（5／22），肿瘤边缘切除后再复发率11．5％（3／26），手术并发症发生率为9．8％、结论：GCT复发后肿瘤局限且无明显软组织肿块，再次刮除空腔充填；有明显软组织肿块形成的Campanacci Ⅲ级和部分肿瘤较大的Ⅱ级患者，行瘤段切除后功能重建，选择性治疗可获得满意的疗效。     

膝关节周围骨肉瘤保肢手术疗效及预后分析

目的探讨膝关节周围骨肉瘤保肢手术的临床疗效及患者预后生存状况。方法回顾性分析1998年至2008年间保肢手术治疗的120例膝关节周围骨肉瘤患者临床资料,其中男75例,女45例;年龄5~48岁,平均18.9岁。股骨下端骨肉瘤78例,胫骨上端骨肉瘤42例,规范化疗85例,不规范化疗35例。应用统计学方法处理记录患者的资料,分析手术疗效及患者预后生存情况。结果所有患者均获得随访,随访时间6~144个月,平均56.8个月。120例患者5年总生存率61.8%,12例患者再次截肢,规范化疗患者5年总生存率71.6%,不规范化疗患者5年总生存率40%,两者差异有统计学意义(P0.01)。骨与软组织肿瘤协会(musculoskeletal tumor society,MSTS)肢体功能评分平均25.47分,股骨下端和胫骨上端骨肉瘤保肢术后膝关节活动度两者差异无统计学意义,但膝关节伸直缺失胫骨上端较股骨下端肿瘤术后发生率高,差异有统计学意义(P=0.03)。结论保肢手术联合新辅助化疗是目前治疗膝关节周围骨肉瘤比较理想的选择,可以较好的保留部分关节功能和肢体外观,但并发症发生率较高,肿瘤局部复发和假体感染是导致再次截肢的主要原因。     

碱性成纤维细胞因子和骨形态发生蛋白对股骨头坏死修复过程的研究

股骨头坏死修复后之重建血循环，主要依靠再血管化促进新骨形成和替代。研究表明多种生长因子在骨与软骨损伤的修复中有重要的调节作用，如碱性成纤维细胞因子（bFGF）。另外，骨形态发生蛋白（BMP）因具有异位诱骨活性而已在修复骨缺损的研究中得到广泛应用。近年来由于生长因子的基因重组产品问世，因而出现了多种生长因子复合应用的趋势。我们试图用重组人碱性成纤维细胞因子（rhbFGF）或与BMP复合使用（BMP／bFGF）治疗股骨头缺血坏死模型，观察bFGF对股骨头坏死修复的影响及其与BMP协同关系。     

Ezrin蛋白mRNA的一、二级结构分析和反义技术作用靶点设计

目的 分析肿瘤远处转移相关蛋白Ezrin Mrna的一、二级结构,寻找其各种反义技术作用的靶点.方法 利用RNAdraw和RNAstructure两种计算机程序对Ezrin Mrna进行分析计算,得到其一、二级结构信息,选择两种程序计算出的共同的连续4个以上碱基未配对的单链成环区作为反义技术的靶区域,设计反义寡核苷酸(AsODNs)、核酶(Ribozyme)、脱氧核酶(DNAzyme or Deoxyribozyme)和小干扰RNA(SiRNA)等4种常用反义技术的作用靶点,再通过计算机程序OligoWalk利用最低自由能原则进行筛选,最后得到各反义技术的作用靶点.结果 各反义技术的靶点数目分别为:AsODNs17个,Ribozyme5个,DNAzymel5个,SiRNA10个;其中AsODNs靶点中较为理想的为G1749-A1771和C1777-G1794,Ribozyme为A2359-G2360,DNAzyme为A1789-U1790、A1756-G1757及A1784-G1785,SiRNA为G802-G808、G1749-A1771及A2354-G2360,并且A2354-G2360是所有4种反义技术共同的作用区域,可以作为一个通用靶点.结论 正确的靶点设计为应用反义技术抑制Ezrin表达从而控制恶性肿瘤的远处转移提供了有效的指导作用.     

不同预处理方式的大块异体骨移植血清骨钙素的变化及意义

目的：观察血清骨钙素（osteocalcin）水平与不同预处理方式的大块异体骨移植愈合的影响及相关性。 方法： 建立犬的骨移植动物模型，15只犬左右前肢随机分成辐照组和无辐照组、加有骨形态发生蛋白(BMP)组和无BMP组、冷冻干燥骨组和低温冷冻骨组。采用双侧尺骨中段切除2 cm骨干和骨膜,再移植2 cm长异体尺骨。术前、术后2周、4周、6周、8周、10周取血检测血清骨钙素。 结果： 在不同处理的异体骨移植中，血清骨钙素水平不同（P<0.05），各个移植时段含量也不同（P<0.05）。 骨形态发生蛋白(BMP)对骨钙素的变化有影响。 结论： ①血清骨钙素是反映异体骨移植中骨代谢的一个特异的、灵敏而简便的生化指标,并对骨移植后骨痂形成程度，具有一定的临床意义。②BMP可使血清骨钙素含量增加，促进成骨。     

槲皮素对人骨肉瘤细胞U-2OS/MTX300增殖和凋亡的影响及其机制研究

目的:研究槲皮素(quercetin,Qu)对骨肉瘤细胞系U-2OS/MTX300增殖和凋亡的作用及其机制。方法:MTT法观察细胞增殖活性;Annexin V/PI染色检测凋亡;线粒体膜电位及细胞色素C的Western blot检测线粒体凋亡途径;持续活化Akt瞬时转染、Western blot检测Akt通路相关蛋白表达水平变化。结果:槲皮素可明显抑制耐甲氨蝶呤骨肉瘤细胞U-2OS/MTX300生长,并呈时间和剂量依赖性;Annexin V/PI可明显检测到细胞凋亡;进一步发现其作用机制是通过下调线粒体膜电位,促进细胞色素C向胞浆释放及抑制Akt磷酸化来实现。结论:槲皮素可显著抑制耐甲氨蝶呤骨肉瘤细胞系U-2OS/MTX300细胞增殖并诱导其凋亡,其机制与线粒体凋亡途径及抑制Akt活性有关。     

单中心四肢骨肉瘤311例预后分析

 目的 探讨单中心四肢骨肉瘤的治疗、预后及生存状况。方法 回顾性分析1998年至2008年间单中心收治的311例四肢骨肉瘤患者的病历资料,记录患者的基本资料、化疗、手术、并发症、肿瘤转移及预后情况,应用Kaplan-Meier、Cox regression 等统计学方法分析各变量与预后生存的关系。结果 311例四肢骨肉瘤患者,男206例,女105例;年龄5～56岁,平均18.6岁;上肢29例,下肢282例。282例获得广泛或根治性手术,保肢手术149例,截肢手术133例。术后64例患者发生各种并发症,其中17例出现2次以上的术后并发症,25例发生肿瘤局部复发。105例获得规范化疗,206例未获得规范化疗,5年生存率分别为57.4%和36.3%。肺转移患者(76例)和无肺转移患者5年生存率分别为16.8%和50.7%。Enneking 分期ⅡB期和Ⅲ期患者5年生存率分别为44.6%和33.1%。选择保肢手术和截肢手术患者的5年生存率分别为56.6%和31.8%,由于截肢患者中有较大的比例施行了不规范化疗以及其他混杂因素导致5年生存率明显降低。Cox回归分析显示化疗不规范和发生肺转移患者预后较差。结论 新辅助化疗联合肿瘤广泛或根治性手术切除可以挽救约60%青少年四肢骨肉瘤患者的生命,肺转移和不规范化疗严重影响患者的预后。     

带血管蒂腓肠肌内侧头肌瓣转移重建髌腱的长期随访

目的 总结胫骨近端侵袭性骨肿瘤广泛切除假体置换手术,应用带血管蒂腓肠肌内侧头肌瓣转移重建髌腱的长期随访结果.方法 胫骨近端肉瘤广泛切除后,应用带血管蒂腓肠肌瓣转移重建髌腱附着,长期随访及评估伸膝动力和并发症.结果 临床治疗69例,对45例生存患者平均随访68.6(24～128)个月,局部复发率8.7%(6/69),伸膝肌力平均4.2级(3.6～5.0),膝关节屈曲平均95°(75°～135°),伸膝平均-2°(0°～12°),5例膝关节不能完全伸直;患肢MSTS功能评分为77%(23.1/30),外观正常.结论 在胫骨近端侵袭性骨肿瘤保肢术中,应用带血管蒂腓肠肌瓣转移重建髌腱,能够恢复伸膝力量,改善软组织覆盖和患肢功能.