冷冻切片常遇到的问题及解决对策

目的 提高制作冷冻切片质量，确保实验结果科学性。方法 通过对切片机工作室温度设置选择，防卷板的调整应用及切片常遇到的问题分析，阐述提高制作高质量冷冻切片的方法。结果 通过对冷冻切片机有关参数的设定，提高了切片质量。结论 冷冻切片常遇到的问题，通过及时调整切片机相应设置，可以便捷解决。     

基于思政育人目标的人体胚胎学“教-育-研”一体化教学改革的实践*

立德树人是教育的根本任务.习近平总书记在全国教育大会上提出:"要使各类课程与思想政治理论课同向同行,形成协同效应"[1].如何打破长期以来思想政治教育与专业教育相互隔绝的"孤岛效应",将立德树人贯彻到高校课堂教学全过程、全方位、全员之中,推动思政课程与课程思政协同前行、相得益彰,构筑育人大格局,是新时代中国高校面临的重要任务之一[2].     

胚胎干细胞关键因子Nanog在胶质瘤中的表达及意义

目的 探讨胚胎干细胞关键因子Nanog在人胶质瘤中的表达及意义。方法 通过免疫荧光双标技术,分析40例胶质瘤组织内胚胎干细胞关键因子Nanog与肿瘤干细胞相关基因Nestin、CD133及胚胎干细胞全能性相关基因Oct4 的共表达情况,并通过RT-PCR、Western blotting技术分析胶质瘤组织内Nanog与脑胶质瘤恶性程度之间的关系。结果 Nanog在胶质瘤组织中的表达随着胶质瘤病理级别增高而升高,而且超过50%的Nanog阳性细胞同时表达Nestin和CD133。95%以上的Nanog阳性细胞都同时表达胚胎干细胞全能性相关基因Oct4。结论 胶质瘤组织中Nanog多表达在肿瘤干细胞中,与胶质瘤的恶性程度呈正相关,在胶质瘤的发生、发展过程中起着重要作用,为研究胶质瘤的起源及胶质瘤的诊断和预后判断提供帮助。     

Wnt/β-catenin信号通路在成人睾丸支持细胞增殖中的作用及其机制

目的探讨Wnt/β-catenin信号通路在成人睾丸支持细胞增殖中的作用及其作用机制。方法取成人睾丸组织采用两步酶法消化,分离纯化支持细胞,后行传代培养,并经波形蛋白免疫荧光染色鉴定其纯度。将支持细胞分为3组:正常对照组(Con组)、添加Gsk-3β特异性抑制剂SB216763组(SB组)和添加氯化锂组(LiCl组)。通过BrdU标记和流式细胞仪检测细胞增殖和细胞周期;采用免疫荧光染色、实时荧光定量PCR和Western blot-ting检测细胞中β-catenin和c-myc的表达状况;采用RNA干扰技术,下调支持细胞中c-myc基因表达。结果BrdU标记和流式细胞仪检测结果显示,SB和LiCl组支持细胞增殖明显高于Con组;加入SB216763和LiCl可明显促进细胞β-catenin和c-myc入核,c-myc mRNA和蛋白水平明显高于Con组;转染c-myc siRNA后,可明显降低SB216763引起的支持细胞增殖。结论激活Wnt/β-catenin信号通路可促进成人睾丸支持细胞的增殖,其作用机制可能是通过上调c-myc基因表达来实现的。     

环磷酰胺致神经管畸形与细胞凋亡的关系

有研究证明环磷酰胺 (ＣＰ)有强烈地致神经管畸形(ＮＴＤ)和骨骼发育异常等作用 ;亦有学者对其ＮＴＤ的发生率和致畸原因作了初步探讨[1～ 3] 。但尚未见有关ＮＴＤ与细胞凋亡相关的研究报道。本研究利用光镜和透射电镜观察了ＣＰ致ＮＴＤ与神经上皮细胞凋亡的关系 ,从形态学方面阐明ＣＰ致ＮＴＤ的原因。1　材料与方法1 1　动物分组及处理　选用未孕ＳＤ大鼠 ,雌性 30只 ,雄性15只 (山东医科大学实验动物中心提供 ) ,体重 180～ 2 5 0 ｇ ,颗粒饲料喂养 ,普通饮水。雌、雄按 2∶1比例合笼过夜 ,次日晨作阴道涂片 ,查出精子者为受精第 0天。…     

大鼠胚胎小脑组织移植的研究 Ⅰ.大鼠胚胎小脑组织移植的形态学观察

取孕17～20天的Wistar大鼠胚胎小脑组织植入同种大鼠小脑内。移植后10天,移植块与宿主脑组织融为一体,两者之间无隔膜,也无疤痕组织;移植物明显变大,充满预制脑腔,其外颗粒层细胞分裂相多,普肯野细胞结构特征出现,分子层、普肯野细胞层及内颗粒层依次排列,小脑皮质形成。移植后20天,普肯野细胞明显排成一层,尼氏体出现。移植后30天,外颗粒层消失,小脑皮质成熟。实验证明,同种胚胎脑组织移植,移植块可成活并按其固有模式生长成熟。     

A method for mouse oocyte enucleation assisted with zona pellucida dilating

<正>Objective: To study the reliability of a new enucleation method, zona pellucida Dilating (ZPD) assisted enucleation method, for mouse oocyte enucleation. Methods: In ZPD enucleation method, the zona pellucida was dilating with the help of outside pression in enucleation needle after breakthrough by needle tip and the nucleus was aspirated by the needle entering the perivitelline space for enucleation. This method was employed and was compared with three other methods in this experiment. The efficiency of enucleation of mouse oocyte was examed. Result:ZPD assisted enucleation method is better than three others at the survival rate after enucleation and the simplicity of micromanipulation. The rate of forming pronucleus of reconstructed embryo from enucleated oocyte by ZPD methods is as high as 62. 8% and the reconstructed embryo at 4-cell stage was obtained. Conclusion: ZPD assisted method is a highly efficient and simple enucleation method with the advantage of saving manipulating time and it does less damage to the oocyte.     

盐酸异丙嗪对小鼠胚泡植入的影响

目的 :研究盐酸异丙嗪对小鼠胚植入的影响。方法 :取孕 3～ 7d小鼠 ,每天上午 10时腹腔注射盐酸异丙嗪溶液 ;另取孕 4d小鼠 ,于上午 10时子宫角注入盐酸异丙嗪溶液 ,对照组同时用同法注射生理盐水 0 .2ml。于孕 8d检查胚胎植入数 ,同时 ,取子宫观察内膜的组织学及免疫组织化学变化。结果 :腹腔 2mg药物注射组抗植入率达 10 0 % ,腹腔 1mg药物组的抗植入率为 75 % ,子宫角药物注入组抗植入率达 75 % ,均明显少于对照组。组织学及免疫组化结果表明 ,盐酸异丙嗪可引起蜕膜细胞退化、解体 ,使蜕膜细胞不能正常形成纤维粘连蛋白 (FN)和层粘连蛋白 (LN)。结论 :盐酸异丙嗪对小鼠有明显的抗植入作用     

热休克蛋白70在高温致神经管畸形发生中的表达

目的：探讨热休克蛋白70（HSP70）与高温致神经管畸形发生的关系。方法：用免疫组织化学和图像分析技术对HSP70在各期高温致畸组和相应正常对照组鼠胚神经管中的表达进行定性、定位和定量研究。结果：HSP70在各期对照组鼠胚神经上皮细胞中稳定表达，各组间无明显差异，高温处理后0.5h，高温组和对照组鼠胚神经上皮细胞的平均光密度（OD）值差异无统计学意义。高温处理后1h和2h，HSP70表达较对照组明显增强，OD值差异十分显著，2h后逐渐降低，24h降至对照组水平。结论：HSP70在高温致神经管畸形中有明显的应激性表达，这种应激性表达可以保护胚胎存活而不能避免畸形的发生。     

凝集素DBA和WGA的受体在生殖周期小鼠子宫内膜中的亲合细胞化学

目的：探讨凝集素DBA和WGA的受体在胚泡着床过程中的生物学作用。方法：取生殖周期不同阶段的小鼠子宫内膜组织，采用亲合细胞化学和图像分析方法，检测WGA和DBA的受体在子宫内膜中的分布和变化情况。结果：以上2种凝集素受体均存在于生殖周期不同阶段的小鼠子宫内膜，但2者的存在部位和数量有差异。WGA受体广泛存在于子宫内膜腔上皮和腺上皮的游离缘，以及孕期胚胎组织和蜕膜细胞表面及ECM，DBA受体仅见于子宫内膜或胚胎组织血管的内皮及其基膜。并且2种受体在孕早期，尤其是围植入期的水平均显著高于间情期和哺乳期的水平。结论：凝集素WGA和DBA的受体与小鼠胚泡植入过程相关。