外周血中表面活性蛋白D mRNA的表达与非小细胞肺癌关系的探讨

非小细胞肺癌(NSCLC)约占肺癌的75％，血行播散是其复发转移的主要方式，不仅严重影响患者预后，而且是选择治疗方案的关键因素。Ⅱ型肺泡上皮细胞被认为是肺癌的祖细胞，能够合成分泌SP-D．正常外周血单核细胞中不表达SP-D mRNA。Christoph Betz等学者首次提出SP-D mRNA可     

竞争性RT-PCR定量检测AFP mRMA在肝癌组织中的表达

通过检测外周血AFP mRNA可确定原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)表达高低与肝癌复发、转移及预后密切相关[1～3].本文建立了一种具有内参照的定量检测AFP mRNA的竞争性RT-PCR方法,并初步对肝癌组织及癌旁组织中AFP mRNA的表达进行定量分析,现报道如下.     

516例性病患者病原体检测结果分析

我们应用聚合酶链反应 (ＰＣＲ)技术对５１６例性病患者进行淋球菌 (ＮＧ)、沙眼衣原体 (ＣＴ)和解脲支原体 (ＵＵ)三种病原体的检测 ,并分析其感染情况 ,现将结果报道如下。１资料与方法１ １１９９８年５月～２０００年２月期间我院性病门诊患者５１６例 ,男性尿道炎患者３５４例 ,女性宫颈炎、尿道炎、阴道炎患者１６２例 ;有２３对为夫妻 ;有５４例进行了一次至多次复查 ,从２周到１年不等。１ ２标本采集及处理 :用无菌特制拭子 ,男性进入尿道２～３ｃｍ ,女性进入宫颈口２ｃｍ并做停留后取出 ,置于１ ５ｍｌ灭菌离心管中 ,加入１ｍｌ…     

三种特殊群体血清中SARS抗体检测分析

目的 了解新生儿、1～10岁儿童以及与SARS患者密切接触的医护人员血清中出现SARS病毒抗体的情况,并加以分析。方法 应用间接ELISA法,对15例新生儿、30例1～10岁儿童以及我院50例在SARS病房工作15天以上的医护人员的血清进行了SARS相关冠状病毒抗体IgM、IgG水平的检测。结果 15例新生儿以及50例医护人员中未检测到SARS抗体IgM、IgG,30例1～10岁儿童中,检测出3例SARS抗体IgG阳性,阳性率为10％,无一例SARS抗体IgM阳性。结论 我院一线医护人员中可能无SARS病者隐性感染者,儿童中SARS抗体IgG阳性率较高,这可能是此次SARS爆发中儿童感染率较低的原因之一。     

X连锁隐性遗传寻常型鱼鳞病一家系报告

先证者,男,12岁.患儿出生后9～10月发病,四肢伸侧、腹部和颈部皮肤干燥,覆盖鱼鳞状鳞屑,经多年治疗无改善,夏季减轻,冬季加重,严重时皮肤发生皲裂,无隐睾病史;其父母非近亲结婚.     

应用组织微阵列技术检测肝癌中血管内皮生长因子及P16和P53的表达及意义

目的　利用组织芯片技术检测肝癌中血管内皮生长因子及P16 ,P5 3的表达 ,初步探讨血管内皮生长因子及P16 ,P5 3的表达在肝细胞癌发生机制以及预后评估方面的作用。方法　采用免疫组化技术结合临床病理资料检测 6 1例肝癌和 5 0例癌旁组织的VEGF及P16 ,P5 3的表达情况。结果　VEGF ,P16和P5 3的表达与肿瘤的恶性程度密切相关。在癌旁组织中 ,P16蛋白全表达 ,而P5 3蛋白全不表达。随着肿瘤恶性程度的提高 ,P16表达降低而P5 3表达水平增高 ,VEGF亦随着癌变进程表达逐渐增高 ,差异非常显著 (P <0 0 0 1)。在不同侵袭转移倾向组中三者的表达也存在着显著性差异 (P <0 0 5 )。三者的相关性分析提示VEGF和P16之间存在负相关 (r=- 0 72 3,P <0 0 5 ) ;VEGF和P5 3之间存在正相关 (r=0 36 4 ,P >0 0 5 ) ,P16和P5 3之间存在负相关 (r=- 0 2 78,P >0 0 5 ) ,但相关不显著。结论　应用组织芯片高效检测临床组织样本具有快速、方便、经济、准确的优点。VEGF及P16 ,P5 3的异常表达可能与肝癌的发生发展、侵袭转移有密切关系。     

丙型肝炎病毒基因分型芯片的研制和临床应用

目的　研制丙型肝炎病毒 (HCV)基因分型的寡核苷酸探针芯片 ,并用此方法对 76例HCVRNA阳性的肝炎患者进行检测。方法　根据HCV 5′ 非编码区和核心抗原区序列设计聚合酶链反应 (PCR)引物和寡核苷酸探针 ,探针经一定修饰后固定到尼龙膜上 ,即成为HCV基因芯片。采用PCR参入法标记地高辛分子 ,其中 6份标本PCR产物同时进行测序分析。结果　此芯片可分析HCV 11个基因型的 15种亚型。 76例HCV肝炎患者芯片杂交结果均阳性 ,而 2 0名健康对照血清均阴性。 76例患者阳性标本的分型结果 :1b型 6 4例 ,2a型 11例 ,3a型 1例 ,未见混合型感染。 6份标本的序列分析表明 ,芯片杂交和测序的分型结果完全一致。结论　此芯片可初步用于检测血清HCVRNA ,并对HCV基因 (亚 )型进行准确分析     

p16基因对大鼠肝癌生长抑制作用的研究

1 .材料与方法 :大鼠肝癌细胞系CBRH 7919来自中科院上海细胞生物研究所。Wistar大鼠 30只 ,体重 (15 0± 2 0 )g ,雌雄不限 ,购自天津市医学实验动物中心。pcDNA3 0 /p16真核表达质粒转染CBRH 7919细胞后MTT法检测细胞增殖 ;流式细胞仪检测细胞周期 ;双层软琼脂培养观察细胞克隆形成能力 ;大鼠原位肝癌基因治疗观察其体内成瘤能力。结果用统计软件SPSS行t检验。2 .结果 :(1)重组质粒转染CBRH 7919细胞P16蛋白免疫组化显示有P16蛋白表达。 (2 )流式细胞仪分析pcDNA3 0 /p16质粒转染 7919细胞细胞周期结果 (表 1)。 (3)双层软琼…     

p16真核表达载体的构建及其对肝癌细胞的作用

研究p16基因对肝癌细胞的作用;构建pcDNA3.0/p16真核表达质粒转导到大鼠肝癌细胞CBRH-7919中,对其p16基因的表达、细胞的生长抑制及机制进行分析;转染细胞p16蛋白免疫组化阳性,MTY法结果显示,50×103/cm2细胞经培养24h～96h后,每组细胞数均有不同程度的增加,但经pcDNA3.0/p16转染的CBRH-7919细胞数比对照明显减少。与空白对照比,细胞在24h,48h,72h和96h的生长抑制率分别为29％,29％,40％和52％,流式细胞仪检测细胞周期显示经pcDNA3.0/p16转染的CBRH-7919细胞有显著的细胞凋亡现象和G0/G1期阻滞。pcD-NA3.0/p16真核表达质粒转导到大鼠肝癌细胞CBRH-7919中能够抑制细胞的增殖活性,p16基因可能通过诱导肿瘤细胞凋亡及G1期阻滞在肿瘤的基因治疗方面发挥作用。     

肝硬化患者外周血内毒素水平及其临床意义

体循环内毒素血症在各种严重肝病，尤其是肝硬化时发生率很高，影响病情发展预后。本文应用鲎试剂改良基质显色法，定量检测了５０例肝硬化患者、３０例乙型肝炎病毒者及２０例同期无肝脏疾病、肝功能正常的胃肠疾病患者的外周血内毒素水平。结果显示，肝硬化患者同人毒素水平显著主增高。