掌叶半夏超临界CO_2乙醇萃取物的抗惊厥作用(英文)

目的研究掌叶半夏超临界CO2乙醇萃取物(SEE-CO2 PP)对青霉素诱发惊厥的对抗作用。方法采用大鼠皮质局部定位注射青霉素诱发惊厥模型,研究SEE-CO2 PP对惊厥发作的潜伏期以及惊厥行为变化的影响,并用RM6240C型多道生理信号采集处理仪记录皮质和海马痫性放电的潜伏期、频率和痫波最高发放波幅,同时应用高效液相色谱法测定海马谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、甘氨酸(Gly)和γ-氨基丁酸(GABA)递质的含量。结果 SEE-CO2 PP 15和30 g·kg-1(ig)可延长青霉素诱发惊厥的潜伏期,并减弱发作强度。SEE-CO2PP能够延长痫性放电的潜伏期,减少痫性放电的频率,减小皮质和海马发放痫波的最高波幅,同时,SEE-CO2PP可以增加海马GABA的水平,对Gly,Asp和Glu水平无明显影响。结论 SEE-CO2PP可对抗青霉素诱发的惊厥行为和痫样放电,具有抗惊厥作用。     

新型卟啉类光敏剂对食管癌细胞杀伤作用的体外实验研究

目的:探讨一种新型卟啉类光敏剂DTP对人食管癌细胞EC109的光动力学治疗(PDT)作用及机制.方法:采用MTT法检测DTP-PDT对食管癌细胞EC109的杀伤作用;酶标仪检测EC109细胞内DTP吸收量;激光共聚焦显微镜观察DTP在肿瘤细胞内定位;流式细胞术检测DTP-PDT后细胞死亡方式.结果:单纯药物孵育对EC109细胞生长无任何影响,但DTP-PDT显示出对食管癌细胞EC109较强的杀伤作用;EC109细胞内DTP吸收呈显著的剂量依赖性;DTP分布于EC109细胞溶酶体内;DTP-PDT后细胞死亡方式主要为凋亡.结论:新型光敏剂DTP光动力学治疗能够有效杀伤人食管癌EC109细胞,主要方式为通过损伤溶酶体间接启动细胞凋亡.     

沉默食管鳞癌细胞PLCE 1基因表达后cyclin D1和caspase-3的变化

目的：通过siRNA沉默PLCE1基因表达,研究PLCE1对食管鳞癌细胞增殖周期和凋亡相关调控蛋白的影响,对其致癌机制进行探讨。方法：PLCE1特异性siRNA转染食管癌细胞,荧光显微镜观察转染效率;半定量RT-PCR法检测转染后PLCE1沉默效果;Western blot检测沉默后cyclin D1和caspase-3的表达水平。结果：siRNA转染后PLCE1表达明显减少（P＝0．000）;cyclin D1水平降低（P＝0．03）、caspase-3表达升高（P＝0．027）。结论：PLCE1基因可能作为癌基因参与了食管癌的发生和发展,其机制可能和PLCE1与某些调控细胞周期和凋亡的蛋白表达有关。     

新型卟啉类光敏剂光动力治疗肝癌的体外实验研究

目的 探讨一种新型卟啉类光敏药物对人肝癌HepG2细胞的光动力学治疗（PDT）作用及其机制.方法 实验分为4组：阴性对照组,PDT组,药物组及药物＋PDT组.采用Bleaching法研究光敏药物的光稳定性;MTT法检测药物对HepG2细胞的PDT杀伤作用;荧光分光光度计检测光敏药物的细胞吸收量;激光共聚焦显微镜检测药物在癌细胞内定位;Hoechst 333342染色检测PDT后HepG2细胞死亡方式.结果 药物对光照比较稳定;单纯光照及单纯光敏药物自身均对HepG2细胞生长无任何影响（P＞0.05）,但药物孵育后行激光照射对HepG2细胞有强烈的PDT杀伤作用（P＜0.05）,IC50值为1.21 μmol/;细胞的药物吸收量呈显著的浓度依赖性,浓度至12.5 μmol/L时吸收量达到饱和;光敏药物分布于HepG2细胞溶酶体内;PDT后HepG2细胞死亡方式主要为凋亡.结论 新型光敏药物能够杀伤人肝癌HepG2细胞,其方式主要通过损伤溶酶体启动继发性的细胞凋亡实现的.     

新型光敏剂治疗敏感及耐药胃癌的实验研究

目的 探讨一种新型光敏剂DTP对敏感胃癌细胞(SGC7901)及长春新碱耐药胃癌细胞(SGC7901/VCR)的光动力学治疗作用.方法 采用荧光显微镜间接确认SGC7901及SGC7901/VCR细胞膜上P-糖蛋白(P-gp)的表达情况,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测DTP对SGC7901及SGC7901/VCR细胞的光动力学杀伤作用,荧光分光光度计测定两种细胞内的DTP吸收量,激光共聚焦显微镜观察DTP在两种细胞内的分布位置.结果 SGC7901细胞膜上几乎无P-gp分布,而SGC7901/VCR细胞膜上存在P-gp高表达.新型光敏剂DTP对SGC7901及SGC7901/VCR细胞均具有较强的光动力学杀伤作用,其中对SGC7901/VCR细胞的作用相对较弱(P＜0.05),且P-gp抑制剂维拉帕米或环孢素A的存在均不能增强DTP光动力学治疗对SGC7901/VCR细胞的杀伤作用(均P＞0.05).SGC7901细胞内的DTP吸收量高于SGC7901/VCR细胞(P＜0.05),且P-gp抑制剂维拉帕米和环孢素A均不能增加SGC7901/VCR细胞内的DTP吸收量(均P＞0.05).DTP分布于SG-C7901细胞的溶酶体以及SGC7901/VCR细胞的溶酶体和线粒体内.结论 新型光敏剂DTP并非多药转运蛋白P-gp的底物,其对SGC7901/VCR细胞较弱的光动力学杀伤作用与其细胞膜上过表达的P-gp无关,可能与DTP在两种细胞内的分布位置不同有关.     

半夏生物总碱和钩藤生物总碱抗小鼠、大鼠惊厥的协同作用（英文）

目的研究半夏生物总碱（PTA）和钩藤生物总碱（UTA）抗惊厥的协同作用,并探讨其相互作用机制。方法采用小鼠最大电休克惊厥试验和急性毒性试验检测PTA和UTA单用和三种比例（1：1,1：4,4：1）配伍的抗惊厥作用及毒性效应,并采用bliss’s法分别计算它们的ED50和LD50。用等效线法评价其协同作用并计算各组配伍的受益指数（BI）。制备大鼠运动皮层定位注射青霉素惊厥模型,同时采用高效液相色谱法（HPLC）测定海马区癫痫相关递质Glu、Asp、Gly、GABA的含量。结果半夏、钩藤生物总碱4：1配伍的抗惊厥作用呈现协同,而毒性呈现相互拮抗,是PTA和UTA合用的最佳比例。而两药1：4和1：1比例配伍尽管在最大电休克惊厥试验中抗惊厥作用呈现协同,但是在毒性试验中毒性效应却呈现相加。PTA和UTA单用和4：1合用,均可明显减少海马Glu的水平,增加GABA的水平,且4：1合用组的GABA水平要比两单药组高。但对Asp、Gly无明显影响。结论PTA和UTA以4：1合用时抗癫痫效应协同、毒性拮抗。两药合用的抗惊厥作用机制可能与其同时降低Glu能神经的兴奋性,并协同提高GABA能神经功能有关。     

卡马西平对青霉素点燃癫痫大鼠脑内GABA_B受体蛋白表达的影响

目的研究两种剂量卡马西平(CBZ)对青霉素慢性点燃大鼠的抗癫痫作用及对癫痫大鼠脑内GABAB受体蛋白表达的影响,从蛋白水平探讨CBZ抗癫痫作用的新机制。方法采用腹腔注射青霉素(PNC,3×106U·kg-1·d-1×13d)慢性点燃大鼠癫痫模型,两种剂量CBZ(50和100mg/kg体质量)灌胃给药,以痫性发作潜伏期和Racine癫痫行为分级标准为判定指标,观察CBZ的抗癫痫作用。用免疫组织化学SABC法测定大鼠脑内GABAB受体蛋白表达,分析CBZ对GABAB受体蛋白表达的影响。结果两种剂量CBZ灌胃给药后,均可使青霉素慢性点燃大鼠痫性发作的潜伏期延长,与模型对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),同时使癫痫大鼠的发作程度均较模型对照组减轻。青霉素慢性点燃大鼠脑内GABAB受体蛋白表达量较正常组降低,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。CBZ1组、CBZ2组脑内GABAB受体蛋白表达量分别与正常对照组和模型对照组比较,均显示增高,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论两种剂量CBZ可延长青霉素慢性点燃大鼠痫性发作的潜伏期,减轻发作程度,具有明显的抗癫痫作用。青霉素慢性点燃大鼠癫痫发作与降低脑内GABAB受体蛋白表达有关,而CBZ抗癫痫作用机制与增加大鼠脑内GABAB受体蛋白表达有关。     

RNA干扰PLCE1基因表达对食管鳞癌细胞周期和凋亡的影响

目的：通过siRNA干扰PLCE1基因表达,检测PLCE1对食管鳞癌细胞增殖周期和凋亡的影响,以探讨PLCE1的致癌机制。方法：采用免疫组织化学方法检测食管鳞癌组织和癌旁正常组织中PLCE1蛋白的表达水平;PLCE1特异性siRNA转染食管鳞癌细胞,荧光显微镜观察转染效率;半定量RT-PCR法检测转染后PLCE1沉默效果;流式细胞术检测干扰后细胞周期变化及凋亡情况。结果：PLCE1在食管鳞癌组织的表达高于正常组织（P=0.000）;siRNA转染后PLCE1表达明显减少（P=0.000）;与对照组相比,PLCE1干扰后可致G0/G1期细胞阻滞（P=0.001）,细胞凋亡增多（P=0.000）。结论：PLCE1在食管鳞癌组织中有较高表达;沉默PLCE1后可抑制癌细胞的增殖,促进其凋亡。     

卡马西平对青霉素点燃惊厥大鼠脑内GABA_A受体mRNA表达的作用

目的研究两种剂量卡马西平对青霉素慢性点燃大鼠的抗惊厥作用及对脑内GABAA受体mRNA表达的影响,从基因水平探讨卡马西平抗惊厥的作用机制。方法采用腹腔注射(ip)青霉素(3×106U.kg-1.d-1)慢性点燃大鼠惊厥模型,两种剂量卡马西平(50,100mg.kg-1×13d)ig给药,以痫性发作潜伏期和Racine惊厥行为分级标准为判定药效指标,观察卡马西平的抗惊厥作用。运用RT-PCR技术测定大鼠脑内GABAA受体mRNA表达量,分析卡马西平抗惊厥作用的新机制。结果两种剂量卡马西平ig给药后,均可使青霉素慢性点燃大鼠痫性发作的潜伏期延长,与模型对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),同时使惊厥大鼠的发作程度均较模型对照组减轻。青霉素慢性点燃大鼠脑内GABAA受体mRNA表达减少,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);两种剂量卡马西平预防性干预组的GABAA受体mRNA表达量分别与模型对照组相比,差异均无显著性。结论两种剂量卡马西平对青霉素慢性点燃的惊厥发作均有明显的对抗作用,但抗惊厥机制与GABAA受体的基因表达无关。