局部应用IL-2联合化疗治疗口腔癌的临床疗效

目的　探讨局部应用ＩＬ－２ 联合化疗治疗口腔鳞癌的临床疗效。方法　对２４例口腔鳞癌患者,分别行单纯化疗、化疗联合瘤体局部应用ＩＬ－２,比较给药前后肿瘤的大小变化及病理表现。结果　局部应用ＩＬ－２ 联合化疗治疗口腔鳞癌１４ 例,其中ＣＲ２ 例,ＰＲ８ 例,ＭＲ４ 例,有效率为７１．４％ ,而单纯化疗的１０ 例患者,ＰＲ５ 例,ＭＲ３例,ＮＲ２ 例,有效率为５０％ 。病理切片显示：ＩＬ－２ 联合化疗组大片癌细胞崩解、坏死,间质及癌巢中大量淋巴细胞浸润、纤维组织增生;单纯化疗组仅见大片癌细胞崩解、坏死,而淋巴细胞浸润少见。结论　局部应用ＩＬ－２ 联合化疗治疗口腔鳞癌可取得较好临床疗效,肿瘤局部免疫力增强。其远期效果有待进一步观察。     

人角质化细胞生长因子2基因克隆、表达及其产物的纯化和鉴定

背景:人角质化细胞生长因子2具有广泛的生理功能,在胚胎发育、组织的修复、神经的再生、血管的生成和肿瘤发展中具有重要作用。目的:克隆人角质化细胞生长因子2基因,于大肠杆菌中表达,并检测其生物学活性,为进一步开发提供实验依据。设计:开放性实验。单位:中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所。材料:实验于2000-09/2002-05在中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室完成。pBV220温控表达载体为病毒基因工程国家重点实验室构建,EcoRⅠ、BamHⅠ、T4DNA连接酶(Promega公司);人角质化细胞生长因子2特异性聚合酶链反应引物(上海博亚生物技术有限公司合成);肝素-SepharoseCL-6B(Pharmacia公司);快速聚合酶链反应产物纯化试剂盒、总RNA提取Trizol试剂盒、反转录-聚合酶链反应试剂盒(GIBCO公司);质粒DNA快速提取试剂盒(博大公司);BL-21-codonpluscompentcells(Stratagene公司)。方法:用高表达菌株BL-21-codonpluscompententcells表达重组人角质化细胞生长因子2蛋白并初步纯化和检测其活性。通过反转录-聚合酶链反应从自然流产胎儿肺组织中钓取人角质化细胞生长因子2cDNA,将其克隆入pBV220载体质粒。在大肠杆菌BL-21-codonpluscompentcells中表达人角质化细胞生长因子2蛋白。采用亲和层析和离子交换层析分离纯化,以细胞增殖实验测定表达蛋白的生物活性。主要观察指标:人角质化细胞生长因子2cDNA的片段长度和序列,人角质化细胞生长因子2基因在大肠杆菌中的表达,纯化人角质化细胞生长因子2的活性。结果:人角质化细胞生长因子2cDNA片段大小约500bp,人角质化细胞生长因子2蛋白在BL-21中得到高效表达,于上清中可溶性表达,SDS-PAGE显示相对分子质量约20000;人角质化细胞生长因子2蛋白对NIH3T3细胞具有显著的促有丝分裂活性,1,5,10μg/L人角质化细胞生长因子2A值(490nm)高于空白对照组,差异有非常显著性意义(分别为0.174±0.022,0.220±0.029,0.306±0.050,0.066±0.004,P<0.001)。结论:成功克隆人角质化细胞生长因子2基因,并于大肠杆菌BL-21中得到高效表达;纯化的人角质化细胞生长因子2蛋白能刺激NIH3T3细胞的增殖,具有显著的促有丝分裂活性。     

造釉细胞癌的临床病理学研究

对于造釉细胞癌的临床生物学行为尚缺乏足够的认识。本文对２７例造釉细胞癌及随机抽取的３０例造釉细胞瘤病例进行对比分析,结果表明：２７例造釉细胞癌中,１９例发生于下颌骨,８例发生于上颌骨,与对照组相比（１４：１）差异显著;对２６例造釉细胞癌病人随访６－３４访年,术后５年生存率为１００％。提示上颌骨造釉细胞癌发生的机率比造釉细胞瘤大;造釉细胞癌后预后一般较好,手术后应即时修复颌面部组织缺损。     

局部应用IL—2联合治疗口腔癌的临床疗效

目的 探讨局部应用ＩＬ－２联合化疗治疗口腔鳞癌的临床疗效。方法 对２４例口腔鳞癌患者，分别行单纯化疗、化疗联合瘤体局部应用ＩＬ－２，比较给药前后肿瘤的大小变化级病理表现。结果 局部应用ＩＬ－２联合化疗治疗口腔鳞癌１４例，其中ＣＲ２例，ＰＲ８例，ＭＲ４例，有效率为７１．４％，而单纯化疗的１０例患者，ＰＲ５例，ＭＲ３例，ＮＲ２例，有效率为５０％．病理切片显示：ＩＬ－２联合化疗组大片癌细胞崩解、坏死，间     

新生儿唇裂修复术10例临床研究

目的 探讨新生儿唇裂修复术对上唇形态和功能的影响。方法 对１０例出生６天以内的唇裂患儿,在全麻下进行手术修复。结果 １０例患儿术后７天创口一期愈合,即可恢复吸吮母乳的功能。１年后随访瘢痕不明显。结论 新生儿唇裂修复术,有利于上唇形态和功能的早期恢复。     

跨膜区缺失的流感病毒M2蛋白表达纯化及其抗原性检测

目的 表达并纯化缺失跨膜区的流感病毒M2蛋白，并检测其抗原性。方法 利用RT．PCR方法从流感病毒A／PR／8／34（H1N1）的cDNA中扩增全长M2基因，利用两套引物扩增出缺失跨膜区26—43位氨基酸的sM2基因，并克隆到pET30a载体中表达融合蛋白，用镍柱纯化后的融合蛋白免疫小鼠获得抗血清，免疫荧光检测其抗原性。结果 sM2融合蛋白在大肠埃希菌中可高效表达，纯化后可获得高纯度的重组蛋白。免疫小鼠获得的血清进行免疫荧光检测，显示表达的融合蛋白有免疫原性。结论 跨膜区缺失的流感病毒M2融合蛋白与完整M2蛋白有相同的抗原性。     

新型重组人IFN-λ2的高效表达、纯化与抗病毒活性研究

目的在大肠埃希菌中高效表达重组人干扰素λ2(rhIFNλ2),并对其抗病毒活性进行初步研究。方法根据大肠埃希菌的偏爱密码子人工设计合成人干扰素λ2(hIFNλ2)的高表达基因,将其克隆到原核表达载体pBV220,在大肠埃希菌中进行表达,表达产物经变性、复性、阳离子交换层析及分子筛层析纯化,测定其抗病毒活性、种属特异性及抗HBV活性。结果在大肠埃希菌表达的目的蛋白占细胞总蛋白量的15%左右,纯化后的纯度达到90%以上,在WISH细胞上抗VSV活性约为1.5×106IU/mg。与rhIFNα2b比较,表达产物在非灵长类细胞上的抗病毒活性较在灵长类细胞上弱,目的蛋白在HepG2.2.15细胞上表现有与rhIFNα2b相似的抗HBV活性。结论hIFNλ2可以在大肠埃希菌内实现高效表达,表达产物具有抗病毒活性,有与rhIFNα2b相似的抗HBV活性,本型IFN有较严格的种属特异性。     

人角质化细胞生长因子2基因克隆、表达及其产物的纯化和鉴定

背景：人角质化细胞生长因子2具有广慢的生理功能，在胚胎发育、组织的修复、神经的再生、血管的生成和肿瘤发展中具有重要作用。目的：克隆人角质化细胞生长因子2基因，于大肠杆菌中表达，并检测其生物学活性，为进一步开发提供实验依据。设计：开放性实验。单位：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所。材料：实验于2000—09／2002—05在中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室完成。pBV220温控表达载体为病毒基因工程国家重点实验室构建．EcoRⅠ、BamHⅠ、T4 DNA连接酶（Promega公司）；人角质化细胞生长因子2特异性聚合酶链反应引物（上海博亚生物技术有限公司合成）；肝素-Sepharose CL-6B（Pharmacia公司）；快速聚合酶链反应产物纯化试剂盒、总RNA提取Trizol试剂盒、反转录-聚合酶链反应试剂盒（GIBCO公司）；质粒DNA快速提取试剂盒（博大公司）；BL-21-codon plus compent cells（Stratagene公司）。方法：用高表达菌株BL-21-codon plus compentent cells表达重组人角质化细胞生长因子2蛋白并初步纯化和检测其活性。通过反转录-聚合酶链反应从自然流产胎儿肺组织中钓取人角质化细胞生长因子2cDNA，将其克隆人pBV220载体质粒。在大肠杆菌BL-21-codon plus compent cells中表达人角质化细胞生长因子2蛋白。采用亲和层析和离子交换层析分离纯化．以细胞增殖实验测定表达蛋白的生物活性。主要观察指标：人角质化细胞生长因子2cDNA的片段长度和序列，人角质化细胞生长因子2基因在大肠杆菌中的表达，纯化人角质化细胞生长因子2的活性。结果：人角质化细胞生长因子2cDNA片段大小约500bp．人角质化细胞生长因子2蛋白在BL-21中得到高效表达，于上清中可溶性表达，SDS-PAGE显示相对分子质量约20000；人角质化细胞生长因子2蛋白对NIH3T3细胞具有显著的促有丝分裂活性，1，5，10μg／L人角质化细胞生长因子2A值（490nm）高于空白对照组，差异有非常显著性意义（分别为0.174&;#177;0．022，0．220&;#177;0、029，0．306&;#177;0．050,0．066&;#177;0．004，P〈0．001）。结论：成功克隆人角质化细胞生长因子2基因，并于大肠杆菌BL-21中得到高效表达；纯化的人角质化细胞生长因子2蛋白能刺激NIH3T3细胞的增殖，具有显著的促有丝分裂活性。