CpG-ODN2006、LPS及白介素对SLE、RA患者EBV永生化B淋巴细胞抗体产生的初步研究

目的:不依赖抗原情况下,分别用TLRs的激动剂及细胞因子单独和联合应用,对不同人群永生化B细胞体外刺激及诱导抗体产生,观察在疾病状态下B细胞活化状态,为寻找自身免疫病更敏感的新指标奠定基础。方法:用EpsteinBarr病毒(EBV)攻击SLE、RA患者B细胞,使之成为永生化的B淋巴母细胞系,体外用CpG-ODN2006、LPS及细胞因子与细胞共培养,免疫散射比浊法测定刺激后不同时段的总IgG水平,进行重复测量设计的方差分析。结果:刺激后细胞上清抗体分泌量增高10倍左右;SLE和RA患者抗体分泌量高于正常人;刺激后18d抗体分泌效应差异最为明显;CpG-ODN2006&IL-4&IL-6三者联合的刺激最好;经诱导后的抗体,均未检测到疾病特异性的血清学指标。结论:在疾病状态下,体外给予刺激后,B细胞活化状态更高,但未诱导出疾病特异的自身抗体。     

MicroRNA-150对上皮性卵巢癌细胞增殖、凋亡和侵袭转移能力的影响

目的 研究microRNA-150(miR-150)在人上皮性卵巢癌细胞中的表达情况,及其对人上皮性卵巢癌细胞增殖、凋亡和侵袭转移能力的影响。方法 通过荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测各处理组细胞中的miR-150表达水平;利用MTT法、流式细胞技术、Transwell法探究miR-150的表达对上皮性卵巢癌细胞增殖、凋亡及侵袭转移能力的影响。结果 与正常卵巢上皮细胞(T29)相比,上皮性卵巢癌细胞(A2780和OVCAR3)中miR-150表达显著降低(P＜0.01);转染miR-150mimic后,A2780和OVCAR3细胞中miR-150水平明显升高(P＜0.01);MTT试验显示,转染培养三天后,miR-150 mimic组细胞OD值(A2780:1.12±0.03;OVCAR3:1.91±0.03)较Blank组(A2780:2.35±0.09;OVCAR3:2.63±0.07)及miR-150 NC组(A2780:2.18±0.07;OVCAR3:2.43±0.11)明显降低(P＜0.01);细胞凋亡检测显示:miR-150 mimic组凋亡率(A2780:16.10±0.58%;OVCAR3:15.16±1.30%)较Blank组(A2780:10.07±0.66%;OVCAR3:3.81±0.24%)及miR-150 NC组(A2780:10.36±1.08%;OVCAR3:4.89±0.07%)明显升高(P＜0.01);Transwell试验显示:miR-150 mimic组穿膜细胞数(A2780:38.67±2.03;OVCAR3:28.67±2.03)较Blank组(A2780:76.30±7.45;OVCAR3:55.67±3.18)及miR-150 NC组(A2780:74.33±5.78;OVCAR3:56.33±3.84)明显减少(P＜0.01)。结论 miR-150在上皮性卵巢癌细胞中表达降低,可能是上皮性卵巢癌增殖、侵袭转移的机制之一;上调miR-150的表达可以抑制上皮性卵巢癌细胞增殖、促进细胞凋亡,并且降低上皮性卵巢癌细胞侵袭转移能力。     

铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌感染分布特征及耐药性分析

目的 探讨铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的分布特征及对多种抗菌药物的耐药性变迁。方法 收集2012年1月至2014年12月该院分离的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌,采用琼脂扩散法做药物敏感试验,比较其对抗菌药物的耐药性变迁。结果共分离出病原菌3 710例,铜绿假单胞菌分离214株(5.8%),鲍曼不动杆菌分离347株(9.4%)。铜绿假单胞菌3年感染率分别为7.3%、6.6%、4.7%,呈逐年减少趋势,鲍曼不动杆菌感染率分别为7.6%、8.8%、10.3%,呈逐年增加趋势。标本来源主要以痰液、创面分泌物、尿液为主。铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌感染菌株以重症监护室(ICU)检出率最高,分别为27.6%和34.9%。铜绿假单胞菌对头孢他啶、阿米卡星、亚胺培南的耐药率均有逐年增高趋势;鲍曼不动杆菌对哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南耐药率逐年增高;多粘菌素B耐药率逐年下降。结论 铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对抗菌药物耐药率逐年增高,尤其对碳青霉烯类耐药情况日趋严重,因此需加强对铜绿假单胞菌及鲍曼不动杆菌的耐药性监测,指导临床合理应用抗菌药物。     

miR-455-5p在上皮性卵巢癌中表达研究及其靶基因功能分析

目的 研究miR-455-5p在上皮性卵巢癌中的表达情况,分析其表达对上皮性卵巢癌发生发展的影响。方法 从GEO数据库中下载正常卵巢上皮组织与上皮性卵巢癌组织miRNA表达数据GSE83693,通过差异表达分析获得上皮性卵巢癌中miRNA差异表达数据,分析miR-455-5p在正常卵巢上皮与上皮性卵巢癌组织中的表达是否存在差异,应用qRT-PCR验证差异表达预测结果;应用生物信息学软件对miR-455-5p靶基因进行KEGG通路富集分析及GO基因功能注释,探究miR-455-5p表达失调在上皮性卵巢癌发生发展过程中的作用。结果 筛选出明显差异表达miRNA 101例,34例表达上调,67例表达下调;其中miR-455-5p呈明显下调(P＜0.01),差异倍数为-2.9019;qRT-PCR验证结果显示,上皮性卵巢癌细胞(SKOV-3,OVCAR-3,A2780)中miR-455-5p表达量明显低于正常卵巢上皮细胞(IOSE-80),差异均有统计学意义(P＜0.05);KEGG通路富集分析结果显示,miR-455-5p调控的靶基因主要参与的通路共5个,包括有TGF-β信号通路,Hippo信号通路,ECM-受体相互作用,癌症中的转录失调通路,慢性粒细胞白血病,这些通路均与肿瘤相关。GO功能注释分析结果显示上述通路中miR-455-5p调控的靶基因主要参与蛋白质磷酸化,促进细胞增殖、迁移,抑制细胞凋亡,促进上皮-间充质转化,转录调节及调控细胞周期等与肿瘤发生相关的功能。结论 miR-455-5p在上皮性卵巢癌中表达下调,miR-455-5p靶基因参与上皮性卵巢癌肿瘤相关通路与功能,与上皮性卵巢癌发生发展相关。     

中药藤梨根煎剂治疗晚期大肠癌62例临床疗效观察

目的:观察中药藤梨根煎剂联合m FOLFOX6方案进行治疗(奥沙利铂+亚叶酸钙+5-氟尿嘧啶)治疗晚期大肠癌的临床疗效。方法:选取2015年1月~2017年1月我院收治的62例晚期大肠癌患者作为研究对象,利用随机数字表法将其分为观察组与对照组。所有患者均给予m FOLFOX6方案化疗;观察组在m FOLFOX6方案的基础上同时给予藤梨根煎剂。治疗结束后评价2组近期疗效;治疗前后,分别检测2组患者免疫功能指标(CD_3~+、CD_4~+、CD_8~+、IgA及IgM),肿瘤标记物[癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原724(CA724)及血管内皮生长因子(VEGF)]。治疗期间,观察2组患者恶心呕吐、血小板降低、白细胞降低、发热、皮疹及神经毒性等毒副反应发生率。结果:观察组总有效率为77.4%,明显高于对照组的54.8%(P0.05)。治疗后,观察组CD_3~+、CD_4~+、CD_8~+、IgA及IgM水平均明显高于对照组,而CEA、CA125、CA724及VEGF含量则均明显低于对照组(P0.05)。治疗期间,2组毒副反应发生率均明显低于对照组(均P0.05)。结论:中药藤梨根煎剂联合m FOLFOX6方案治疗晚期大肠癌疗效较好,可有效提高患者免疫功能,降低毒副反应,值得进行深入研究。     

系统性红斑狼疮患者血清特异性的噬菌体7肽的筛选、鉴定及其意义

目的 筛选和鉴定与系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者血清特异性结合的噬菌体7肽,并分析其实际意义.方法 分别选取正常人及SLE患者血清各30例,先后用正常人混合血清及SLE患者混合血清作为筛选配基,对噬菌体随机7肽库进行亲和筛选、扩增,获得SLE血清特异性结合的噬菌体克隆,并用患者混合血清进行Dot-ELISA实验鉴定获得的噬菌体克隆,进而分别用SLE患者及正常人血清各12例进一步鉴定阳性噬菌体的混合克隆,确定阳性噬菌体克隆与个体血清之间的结合情况;并对最终鉴定的噬菌体克隆进行测序与比对分析.结果 筛选到与SLE患者混合血清特异性结合的阳性克隆12个;阳性噬菌体混合克隆与SLE患者个体血清反应阳性率明显高于其与正常人血清的反应率;序列分析显示阳性噬菌体克隆的抗原表位与大肠杆菌、沙门菌、人类免疫缺陷病毒(HIV)有一定的同源性,但与人类抗原表位无关.结论 噬菌体随机7肽库筛选出的SLE特异性多肽可能用于制备SLE诊断试剂,同时SLE患者血清中存在与病原体抗原表位结合的抗体成分,提示SLE可能与病原体感染有关.     

降钙素原和超敏C反应蛋白预测败血症血液培养阳性的临床价值

目的探讨和比较降钙素原(PCT)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)预测败血症患者血液培养阳性的临床价值。方法132例败血症患者纳入该研究,在应用抗菌药物治疗前进行血液培养实验,并检测白细胞计数、中性粒细胞绝对值、PCT、hs-CRP,评价PCT和hs-CRP预测血液培养阳性的应用价值。结果血液培养阳性与血液培养阴性者PCT的中位浓度分别为7.92ng/mL和0.95ng/mL,差异有统计学意义(P0.01)。PCT预测血液培养阳性的准确率明显高于hs-CRP,曲线下面积(AUC)分别为0.810(P=0.001)和0.690(P=0.247)。PCT与hs-CRP联合应用预测血液培养阳性与单独应用PCT预测血液培养阳性的检测结果相似,AUC为0.885(P=0.001)。PCT的中位截点为0.91ng/mL时,预测血液培养阳性的灵敏度为90%;PCT的截点为1.14ng/mL时,这一灵敏度仍保持不变。这两个截点水平可以减少51%和56%的不必要的血液培养送检申请。结论与hsCRP相比较,PCT水平可更好地预测败血症患者血液培养阳性率。     

pEGFP-N1-PGC-1α重组质粒的构建及体外表达

目的 构建PGC-1α真核表达载体pEGFP-N1-PGC-1α重组质粒,鉴定及体外表达.方法 通过RT-PCR方法从组织中克隆PGC-1α基因片段,酶切后将其定向插入真核表达载体pEGFP-N1中,构建pEGFP-N1-PGC-1α重组质粒.结果 双酶切法、测序法鉴定表明目的基因正确插入质粒.结论 成功构建了pEGFP-N1-PGC-1α真核表达载体,转染huh-7细胞后,可瞬时、有效表达,为进一步研究PGC-1α调节HBV、HPV生物合成奠定了基础.     

论临床科与检验科室沟通的重要性

现代医学检验的发展使得其在医疗过程中占有重要地位,其是现代临床诊断中的重要手段。加强临床科与检验科室的沟通有助于诊疗活动的开展、有助于提高临床诊疗水平、有助于临床检验与临床治疗的相互合作,促进诊疗活动的开展。本文就临床科与检验科室沟通的重要性进行了简要论述。     

哈尔滨地区产ESBLs鲍曼不动杆菌流行病学和耐药基因研究

目的对哈尔滨地区临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)鲍曼不动杆菌流行情况及其耐药基因进行研究,以指导临床抗感染治疗,预防和控制该地区耐药菌株的产生及传播。方法收集哈尔滨地区临床分离的鲍曼不动杆菌共190株。采用K-B纸片扩散法测定190株鲍曼不动杆菌对14种抗菌药物的耐药情况,同时,筛选出产ESBLs的鲍曼不动杆菌菌株。采用聚合酶链反应(PCR)扩增主要的ESBLs编码基因,包括PER-1、SHV-1、TEM-1、VEB、CTX-M、OXA-23基因型。通过Gen Bank进行基因型的序列比对分析。应用脉冲场凝胶电泳分析产ESBLs的鲍曼不动杆菌菌株同源性。结果 190株鲍曼不动杆菌中,对米诺环素、替加环素、头孢哌酮/舒巴坦敏感率最高,分别为95.3%、93.2%、56.8%。耐药率高于70.0%的抗菌药物为头孢他啶和派拉西林,其余药物耐药率均高于50.0%。190株鲍曼不动杆菌中筛选出产ESBLs菌株共58株,检出率为30.5%。PCR分析结果显示,PER-1基因型26株,TEM-1基因型23株,SHV-1基因型1株,OXA-23基因型24株,其中37.0%同时携带PER、TEM、OXA-23 3种基因型。其余基因型检测结果为阴性。脉冲场凝胶电泳(PFGE)结果显示,58株产ESBLs鲍曼不动杆菌通过PFGE分型分为A、B、C、D、E型。来自哈尔滨市第一医院的39株产ESBLs鲍曼不动杆菌菌株分为A、B、C型,以A型为主,为35株,其中A1亚型有27株,A2亚型有5株,A3亚型有3株;B型有3株;C型有1株。哈尔滨医科大学附属第四医院的19株产ESBLs鲍曼不动杆菌中,5株与哈尔滨市第一医院A1条带一致;12株为D型,其中D1亚型9株,D2亚型3株;2株为E型。结论哈尔滨地区鲍曼不动杆菌耐药情况严重。鲍曼不动杆菌菌株产ESBLs酶是耐β-内酰胺类抗菌药物的主要原因。哈尔滨地区鲍曼不动杆菌流行株存在医院之间交叉感染现象。