肺岩宁冲剂对肺癌细胞移植瘤组织基因差异表达的影响

 目的 应用基因芯片技术研究肺岩宁冲剂对裸鼠人肺癌细胞移植瘤组织的基因表达谱的影响,初步探讨肺岩宁冲剂抗肺癌的分子机制。 方法 将人肺癌细胞H460皮下移植瘤裸鼠24只随机分为三组：空白对照组：0.9%氯化钠溶液0.4ml灌胃×14天;化疗组：第1、3、5天DDP溶液1ml(含DDP0.1mg)腹腔注射,0.9%氯化钠溶液0.4ml灌胃×14天;肺岩宁冲剂组：肺岩宁冲剂药液0.4ml（含生药0.6g）灌胃×14天。治疗后第15天提取各组移植瘤组织的总RNA并与人全基因组芯片杂交,经激光共聚焦扫描仪扫描及Lux Scan3.0 软件分析后比较各组中的差异表达基因。 结果 与对照组比较,化疗组共筛查出差异表达基因2187条,其中上调基因997条,下调基因1190条,功能未知基因326条。肺岩宁冲剂组共筛查出差异表达基因2093条,其中上调基因968条,下调基因1025条以及未知功能基因145条。按照基因功能可分为细胞周期相关基因、代谢相关基因、细胞信号转导分子、转录调控因子等。 结论 为明确肺岩宁冲剂抗肺癌的分子机制提供重要参考。     

DNA甲基化在药物效应和新药研发中的研究进展

DNA甲基化对药物作用的影响日渐受到关注。许多编码药物代谢酶、药物转运体、核受体及药物靶点的基因受DNA甲基化调控。DNA甲基化在影响细胞色素P450酶(CYP450)的表达水平上起着重要的作用,而CYP450酶系催化多种药物代谢反应,能显著影响药物疗效。目前的研究也发现DNA甲基化水平在个体间的差异与药物疗效和不良反应在个体间的差异是紧密相关的。DNA甲基化状态会受药物作用影响,进而引起不同程度的药物不良反应。近年来,以DNA甲基化为靶向的药物研发呈增长态势,DNA甲基转移酶抑制剂对肿瘤等重大疾病治疗具决定性作用。临床试验结果显示,DNA甲基化药物治疗已在改善药物疗效、稳定药理作用及减少药物不良反应上初见成效。DNA甲基化可能成为早期预测药物效应的潜在生物标记,将成为实现临床个体化用药的有力工具。     

基于连接检测反应的基因芯片分型技术的建立

目的 建立基于连接检测反应的基因芯片分型技术。方法 将连接检测反应，通用芯片技术及片基异硫氰基化从头活化方法相结合。结果 应用测序技术验证，该方法分型准确性达到100%。另外也不会产生非模板依赖性信号，对未纯化模板的分型效果也较好。结论 连接检测反应能够在高温下进行，显著减少了探针非特异性连接；其通用性使得研究者可基于一张芯片自由选择所研究的位点，无需针对每一组探针进行操作条件的单独优化，并且保证了杂交的特异性；片基从头活化技术更使其摆脱了对商品化片基的依赖。这些特点都极大地提高了该技术的分型准确性，并且降低了费用，使其应用于高通量SNP分型成为可能。     

微流体芯片技术检测食源性致病菌的应用研究

[目的]通过应用微流体芯片(lab-on-chip)技术检测食源性致病菌,包括霍乱弧菌、沙门菌、副溶血性弧菌、志贺菌等细菌的灵敏度和精确度,从而建立突发公共卫生事件现场实验室的解决方案。[方法]分别采用Lab-on-chip平台食源性病原体微流检测芯片和荧光PCR方法对食源性病原菌样本进行检测,对比分析食源性微流芯片检测方法的特异性、敏感度、准确性和重复性。根据Lab-on-chip说明书以及荧光定量PCP试剂盒操作说明进行操作。[结果]Lab-on-chip方法的霍乱弧菌、沙门菌、志贺菌、副溶血性弧菌检出限为5×103~103DNA Copies/mL。特异性、准确性和重复性都获得了良好的结果。[结论]Lab-on-chip方法具有快速、便捷、高效、准确等优点,可以在突发公共卫生事件中作为良好的检测工具和方法。     

基于连接酶检测反应的基因芯片分型技术的建立

目的建立基于连接检测反应的基因芯片分型技术。方法将连接检测反应,通用芯片技术及片基异硫氰基化从头活化方法相结合。结果应用测序技术验证,该方法分型准确性达到100%。另外也不会产生非模板依赖性信号,对未纯化模板的分型效果也较好。结论连接检测反应能够在高温下进行,显著减少了探针非特异性连接;其通用性使得研究者可基于一张芯片自由选择所研究的位点,无需针对每一组探针进行操作条件的单独优化,并且保证了杂交的特异性;片基从头活化技术更使其摆脱了对商品化片基的依赖。这些特点都极大地提高了该技术的分型准确性,并且降低了费用,使其应用于高通量SNP分型成为可能。