人体液中喷布洛尔及其代谢物的GC/MS分析

用气相色谱一质谱联用(GC-MSD)系统分析方法检出了人尿中喷布洛尔的6个羟化代谢物,用Scp-Pak柱提取的方法检出了人血浆中的原型药物。并从分子结构上对此药物的代谢途径进行了研究。尿中提取和血中提取的回收率分别为90.83.%和85.88%,Gc-MSD的检测限为5pg。本方法适用于运动员兴奋剂的系统检查。     

核糖霉素产品中非活性杂质的研究

核糖霉素产品中非活性杂质的研究ＳＴＵＤＹＯＮＴＨＥＢＩＯＩＮＡＣＴＩＶＥＩＭＰＵＲＩＴＩＥＳＩＮＤＯＭＥＳＴＩＣ－ＭＡＤＥＲＩＢＯＳＴＡＭＹＣＩＮ王文翔，鲁敏，申利ＷａｎｇＷｅｎ－ｘｉａｎｇ；ＬｕＭｉｎａｎｄＳｈｅｎＬｉ（中国医学科学院医药生物技术研...     

人尿中美沙芬及其代谢产物的气—质联用分析

A GC-MS method for the analysis of dextromethorphan and its metabolites is described. The urine sample was hydrolyzed with HCl, extracted with diethyl ether and derivatized with MSTFA (N-methyl-N-trimethylsilyltrifluoroacetamide)-MBTFA (N-methyl-bistrifluoroacetamide). Dextromethorphan and its 3 metabolites were detected in urine samples within 2～60 h after administration of the drug. Their structures and the variation of their concentration in urine were determined. The detection limit of dextromethorphan is 10 ng.     

miR-497-5p靶向VEGFA抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞侵袭、迁移和上皮间质转化的实验研究

目的探讨miR-497-5p对子宫内膜癌Ishikawa细胞侵袭、迁移和上皮间质转化（EMT）的影响及其机制。方法将体外培养的Ishikawa细胞分为miR-NC组、miR-497-5p组、pLV-VEGFA组和miR-497-5p+VEGFA组,采用Real time PCR检测miR-497-5p和血管内皮生长因子A（VEGFA）mRNA的表达,双荧光素酶报告基因实验检测miR-497-5p和VEGFA的靶向关系,Western blot检测VEGFA蛋白和EMT相关蛋白神经型钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）和E-钙黏蛋白（E-cadherin）的表达,Transwell小室实验检测Ishikawa细胞的侵袭和迁移。结果转染miR-497-5p mimics可升高Ishikawa细胞中miR-497-5p表达,降低VEGFA mRNA表达（P<0.05）,VEGFA是miR-497-5p的靶基因。与miR-NC组比较,miR-497-5p组细胞中VEGFA、Vimentin和E-cadherin蛋白的表达水平、侵袭细胞数和迁移细胞数均明显降低,而N-cadherin蛋白表达升高（P<0.05）;与pLV-VEGFA组比较,miR-497-5p+VEGFA组细胞中VEGFA、Vimentin和E-cadherin蛋白的表达水平以及侵袭、迁移细胞数量均明显降低,而N-cadherin蛋白表达明显升高（P<0.05）。结论 miR-497-5p可靶向VEGFA抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞的侵袭、迁移和上皮间质转化。     

武汉地区已生育二孩家庭育龄女性三孩生育意愿及其影响因素调查

目的 调查武汉地区已生育“二孩”家庭的育龄女性“三孩”生育意愿及其影响因素,为实施“三孩”生育政策及配套支持措施提供理论参考。方法 采用多阶段分层抽样法抽取武汉地区已生育“二孩”家庭的育龄女性为研究对象,利用自行设计的调查问卷进行“三孩”生育意愿的横断面调查,收集个人基本情况、家庭情况、生育现状以及“三孩”生育意愿等,并利用logistic回归模型对影响育龄女性生育“三孩”意愿的因素进行分析。结果共1 756名已生育“二孩”家庭的育龄女性中有382名具有“三孩”生育意愿。愿意生育的主要原因为希望儿女双全（29.32%）、单纯喜欢孩子（20.42%）以及认为多子多福（17.02%）。而不愿意生育“三孩”主要考虑经济压力因素（43.01%）、精力因素（16.89%）、身体条件因素（13.39%）等。多因素logistic回归分析显示,年龄（OR=2.552）、农村户籍（OR=1.689）、再婚（OR=1.996）、待业（OR=1.619）、家庭人均月收入（OR=4.797）、现有子女为2女孩（OR=2.130）和周围妇女“三孩”意愿（OR=3.811）是影响“二孩”家庭育龄妇女“三孩”生育...     

茯苓酸抑制TRIM29表达通过Wnt信号通路调控宫颈癌细胞存活和凋亡

【目的】观察茯苓酸对宫颈癌细胞Caski存活、凋亡的影响及潜在作用机制。【方法】采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察茯苓酸处理或转染的Caski细胞生存能力,流式细胞术观察茯苓酸处理或转染的Caski细胞凋亡情况,实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测茯苓酸处理或转染的Caski细胞三基序蛋白29(TRIM29)mRNA的表达,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测茯苓酸处理或转染的Caski细胞TRIM29、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Caspase-9)、细胞周期调节蛋白Cyclin D1及Wnt通路蛋白β-连环蛋白(β-catenin)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、c-Myc的表达。【结果】茯苓酸能够降低Caski细胞存活率,促进细胞凋亡,升高Caspase-9、β-catenin表达量,降低Cyclin D1、GSK-3β、c-Myc表达量,抑制TRIM29的mRNA和蛋白表达。沉默TRIM29可降低Caski细胞存活率,促进细胞凋亡,促进Caspase-9表达,抑制Cyclin D1表达。过表达TRIM29可通过上调Wnt通路活性部分逆转茯苓酸对宫颈癌Caski细胞存活和凋亡的作用。【结论】茯苓酸通过抑制TRIM29表达下调Wnt通路活性从而抑制宫颈癌Caski细胞存活,促进细胞凋亡。     

circ-LRP6调控miR-515-5p/IL-6通路影响卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探讨环状RNA低密度脂蛋白受体相关蛋白6（circ-LRP6）对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法 选取44例卵巢癌患者的癌组织及癌旁组织,培养正常人卵巢上皮细胞HUM-CELL-0088及卵巢癌细胞系SKOV3、OVCAR3、A2780,采用实时荧光定量PCR检测卵巢癌组织和细胞中circ-LRP6、微小RNA-515-5p（miR-515-5p）的表达水平;双荧光素酶报告实验检测miR-515-5p与circ-LRP6之间的靶向关系;将circ-LRP6干扰表达载体、miR-515-5p过表达载体、miR-515-5p抑制表达载体与circ-LRP6干扰表达载体转染至卵巢癌细胞SKOV3中,蛋白质印迹法（Western blotting）检测细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、基质金属蛋白酶（MMP）2、MMP9、白细胞介素6受体（IL-6R）蛋白的表达;CCK-8法检测SKOV3细胞活性;Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭。结果 与癌旁组织及HUM-CELL-0088细胞相比,卵巢癌组织和SKOV3、OVCAR3、A2780细胞系中circ-LRP6表达水平显著升高,miR-515-5p表达水平显著降低（P<0.05）。双荧光素酶报告实验证实circ-LRP6可靶向负调控miR-515-5p的表达。低表达circ-LRP6或过表达miR-515-5p均可抑制Cyclin D1、MMP2、MMP9、IL-6R的表达,降低细胞活性,抑制细胞迁移和侵袭（P<0.05）。同时,抑制circ-LRP6和miR-515-5p表达可上调SKOV3细胞中Cyclin D1、MMP2、MMP9、IL-6R的表达,增强细胞活性,促进细胞迁移和侵袭（P<0.05）。结论 抑制circ-LRP6表达可能通过上调miR-515-5p抑制IL-6,从而抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭。     

miRNA-409-3p表达水平对宫颈癌细胞增殖及顺铂化疗敏感性的影响

目的 探讨微小RNA-409-3p(miRNA-409-3p)表达水平对宫颈癌细胞增殖及顺铂化疗敏感性的影响。方法 将HeLa细胞分为正常对照组、NC对照组和miRNA-409-3p mimic组,RT-PCR法检测不同宫颈组织及转染miRNA-409-3p mimic后各组细胞中miRNA-409-3p mRNA的表达,CCK-8法检测细胞增殖率,Western blot法检测Fip200、LC3、Caspase-3蛋白的表达。结果 宫颈癌组织中miRNA-409-3p mRNA的相对表达水平显著低于正常宫颈组织和癌旁组织(P＜0.05);通过转染miRNA-409-3p mimic后,miRNA-409-3p mimic组miRNA-409-3p mRNA的相对表达水平较正常对照组显著上调(P＜0.05),NC对照组miRNA-409-3p mRNA的相对表达水平较正常对照组无统计学差异(P＞0.05)。miRNA-409-3p mimic组HeLa细胞增殖率较正常对照组和NC对照组显著降低(P＜0.05)。给予顺铂干预后,miRNA-409-3p mimic组细胞增殖显著被抑制(P＜0.05);同时,miRNA-409-3p mimic组细胞中Fip200蛋白表达水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著低于正常对照组和NC对照组(P＜0.05)。结论 miRNA-409-3p在宫颈癌组织中低表达,可能与宫颈癌的发生发展有关,上调miRNA-409-3p水平可以抑制HeLa细胞增殖,增加HeLa细胞对顺铂的敏感性。     

miR-150在胎盘表达与复发性流产的关系研究

目的探讨miR-150通过靶向血管内皮生长因子(VEGF)表达调控胎盘血管生成参与复发性流产的关系。方法选择华中科技大学同济医学院附属梨园医院妇产科单胎晚期妊娠分娩的产妇40例为对照组(年龄23~29岁,平均年龄26.72岁),同期选择于该院妇产科3次或更多次自然流产的妇女40例为病例组(年龄23~29岁,平均年龄26.18岁)。测定两组胎盘组织miR-150 mRNA表达水平及VEGF表达水平。设立HTR-8/SVNEO细胞组、miR-150mimics组、miR-150 inhibitor组,测定3组细胞活力、凋亡水平、血管形成水平、miR-150 mRNA表达水平及VEGF表达水平。建立正常小鼠组、miR-150 mimics小鼠组、miR-150 inhibitor小鼠组模型,测定3组小鼠平均流产数、胎鼠质量、胎盘质量、胎盘毛细血管数目、miR-150 mRNA及VEGF表达水平。结果病例组胎盘组织miR-150 mRNA表达水平高于对照组胎盘组织,VEGF表达水平低于对照组胎盘组织(P <0.05)。miR-150 mimics组光密度(OD)值、细胞存活率、相对总血管长度、相对总血管数目、VEGF表达水平低于HTR-8/SVNEO细胞组(P <0.05);miR-150 inhibitor组OD值、细胞存活率、相对总血管长度、相对总血管数目、VEGF表达水平高于HTR-8/SVNEO细胞组和miR-150 mimics组(P <0.05)。miR-150 mimics组细胞凋亡率、miR-150 mRNA表达水平高于HTR-8/SVNEO细胞组(P <0.05),miR-150 inhibitor组细胞凋亡率、miR-150 mRNA表达水平低于HTR-8/SVNEO细胞组和miR-150 mimics组(P <0.05)。miR-150 mimics小鼠组平均流产数、miR-150 mRNA水平高于正常小鼠组(P <0.05),胎鼠质量、胎盘质量低于正常小鼠组(P <0.05)。miR-150inhibitor小鼠组平均流产数、miR-150 mRNA水平低于正常小鼠组和miR-150 mimics小鼠组(P <0.05),胎鼠质量、胎盘质量高于正常小鼠组和miR-150 mimics小鼠组(P <0.05)。miR-150 mimics小鼠组平均胎盘毛细血管数目水平、VEGF表达水平低于正常小鼠组(P <0.05),miR-150 inhibitor小鼠组平均胎盘毛细血管数目、VEGF表达水平高于正常小鼠组和miR-150 mimics小鼠组(P <0.05)。结论复发性流产患者胎盘组织中miR-150表达水平升高,VEGF表达水平降低;miR-150靶向抑制胎盘中VEGF表达水平进而抑制胎盘中血管的生成可能是复发性流产的发病机制之一。     

剖宫产术后子宫瘢痕处妊娠2例分析

目的剖宫产后瘢痕处妊娠是一种少见而危险的异位妊娠，此种特殊的妊娠应引起重视，以免误诊。方法我院2004．5～2009．6收治子宫下段剖宫瘢痕妊娠者2例分析。结果一例刮宫后急诊子宫切除术；一例经米非司酮，甲氨碟呤治疗成功保全子宫。结论：因子宫瘢痕处妊娠临床少见，常被误诊，我们临床医生应加强警惕，明确诊断，作到早准备，防治并发症。