HPV16光敏生物素探针的制备及斑点杂交应用

近年来的研究表明,人乳头瘤病毒(HPV)很可能是子宫颈癌主要的病毒病因。目前,在HPV的分子生物学研究中,许多实验室都采用放射性同位素和生物素两种探针标记法。为了找到一种简单、快速、安全的标记探针方法,我们试用了光敏生物素来标记HPV16DNA作探针,并用斑点杂交法初步检测了部分宫颈癌组织中HPV的感染情况。 材料和方法 一、材料 1.试剂:6—氨基乙酸光敏生物素、蛋白酶K,内切酶BamHI,均为国产;DNA检测药盒(Bresa     

不同引物介导的聚合酶链反应检测人乳头瘤病毒DNA

应用３对人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）引物对１０７例各种宫颈标本进行了聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增。结果显示，共同引物（ＧＰ）扩增，有５８．８％（３０／５１）宫颈鳞癌，１００％（１４／１４）尖锐湿疣、１３．６％（３／２２）宫颈炎和１０％（２／２０）正常宫颈出现ＨＰＶ阳性。型特异性引物ＳＰ１６／ＳＰ１８扩增，有３７．２％（１９／５１）宫颈鳞癌２５．７％（５／１４）尖锐湿疣和５％（１／２０）正常宫颈出现ＨＰＶ１６型阳性，５．８％（３／５１）宫颈鳞癌为ＨＰＶ１８型阳性。进一步用ＳＰ１６ｂ引物扩增，没有１例ＨＰＶ１６ｂ亚型被发现。说明宜颈磷癌和尖锐湿疣与ＨＰＶ感染有关，结合应用共同引物和型特异性引物可作为ＨＰＶ检测与分型方法。     

急性冠状动脉综合征抗血小板治疗的新进展

<正>心血管病已经成为中国居民的首要死因。其中,半数为急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)所致。现已经阐明,动脉粥样硬化斑块破裂引起血小板激活、黏附和聚集,致使冠状动脉血栓形成,是ACS发病的关键机制。因此,抗血小板是ACS药物治疗的基石。近年来,随着大量临床试验的展开和新型抗血小板药物的临床应用,抗血小板治疗领域取得许多新的突破。1口服抗血小板药物     

肿瘤转移的生物学

一百年以前,英国外科医生 Stephen Paget 提出了“种子与土壤”假说,包括三个原则:肿瘤的转移具有异质性;肿瘤转移的过程有顺序性和选择性并且是随机的;临床上转移的发生取决于转移细胞与宿主各种因素的相互作用。本文从原发癌的发展过程入手,就细胞和分子生物学水平论述了转移瘤的发病机理,最后展示了肿瘤生物学治疗的前景。     

P—糖蛋白及其介导的MDR研究进展

本文介绍了Ｐ－糖蛋白介导的肿瘤多药耐药性（ＭＤＲ）产生机理、Ｐ－糖蛋白及其基因表达的检测和临床意义、ＭＤＲ逆转的临床和实验研究进展，指出开展ＭＤＲ研究，将有助于肿瘤化疗效的提高。     

p53~(mut)、p53~(wt)、p16基因转染对肺腺癌H1299细胞Samd4蛋白表达的影响

目的探讨外源性p53mut、p53wt和p16基因转染人肺癌细胞株H1299后对其Smad4蛋白表达的影响。方法运用PCR方法扩增p53mut、p53wt及p16基因,构建真核表达载体p IRES2-EGFP-p53mut、p IRES2-EGFP-p53wt及p IRES2-EGFP-p16,脂质体法单独或共转染H1299细胞。荧光显微镜下观察细胞中表达的带绿色荧光的增强型荧光蛋白(EGFP),使用RT-PCR验证质粒载体转染效果,使用Western blot检测转染后各组细胞Smad4蛋白表达水平的变化。结果转染72小时后在荧光显微镜下观察到被转染的H1299细胞发绿色荧光。经RT-PCR证实转染后的H1299细胞成功表达目的基因。Western blot法显示空载体组与空白对照组在Smad4蛋白表达上无明显差异(P0.05),p53mut组Smad4蛋白表达较空载体组下调(P0.05),而p53wt转染组或p53wt、p16联合转染组Smad4表达增强,且以后者的上调作用更为明显(P0.05)。结论 p53mut转染可抑制H1299细胞的Samd4蛋白表达,而单独转染p16或共转染p16、p53wt可使Smad4蛋白表达上调,且以后者的上调作用更为显著。p53mut的促癌作用及p53wt和p16的抑癌作用可能与TGF-β/Smad4相关信号通路有关。     

冠状动脉栓塞致急性心肌梗死一例

<正>1病例资料患者男,82岁,因"间断心悸、气促4年,加重1个月,突发腹痛3 h"经急诊收住入院。患者4年前起反复出现心悸、气促,每次持续数十分钟至数小时,间隔数日至数月发作,曾在某次发作后就诊于社区医院,心电图提示心房颤动,静脉予胺碘酮后成功转复。此后,患者仍间断有上述症状,发作时自服"胺碘酮",症状均可逐渐缓解。近1个月来,患者发     

宫颈鳞癌细胞中HPV和C-erbB-2基因扩增的检测

应用ＰＣＲ和差别ＰＣＲ方法，平行检测４０例宫颈鳞癌和６例宫颈炎细胞中的ＨＰＶ感染和Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因扩增。结果宫颈鳞癌中ＨＰＶ混合型别（ＨＰＶＳ）感染阳性率为６５．０％（２６／４０），其中，ＨＰＶ１６占３７．５％（１５／４０），ＨＰＶ１８仅占５．０％（２／４０）；而宫颈炎中仅１例ＨＰＶｓ感染，两者具有显著性差异（χ２＝５．０１，Ｐ＜０．０５），所有宫颈癌和宫颈炎中均不见Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因扩增。结果表明：ＨＰＶ感染与宫颈鳞癌的发生关系密切，但与Ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因扩增没有直接联系。     

宫颈癌细胞DNA含量和HPV16的对比研究

作者对３３例宫颈癌患者的活检组织进行了ＤＮＡ含量和ＨＰＶ１６检测。结果显示：宫颈癌细胞ＤＮＡ异倍体率为６６．７％，ＨＰＶ１６阳性率３３．３％。异倍体患者ＨＰＶ１６阳性率显著高于二倍体患者（Ｐ＜０．０５）；在异倍体病例中，不同倍体类型者ＨＰＶ１６阳性率明显不同，其顺序为多异倍体＞非整倍体＞四倍体＞近二倍体。ＨＰＶ１６阳性者的ＤＩ、ＳＰＦ、＞２Ｃ％均显著高于ＨＰＶ１６阴性者（Ｐ＜０．０１）。该结果提示，ＨＰＶ１６不仅与宫颈癌的发生关系密切，而且和癌细胞ＤＮＡ含量、增植特性、肿瘤恶性度也有一定关系。