重组鸡Igλ轻链真核细胞分泌表达及其单克隆抗体的制备与鉴定

目的: 构建重组载体pcDNA-λ并在COS7细胞分泌表达鸡Igλ轻链, 制备抗鸡Igλ轻链的单克隆抗体(mAb).方法: PCR扩增带有信号肽的鸡Igλ轻链基因, 限制性酶切消化后, 定向克隆于真核表达载体pcDNA3, 构建具有6×His标签、分泌表达的重组载体pcDNA-λ.重组载体转染COS7细胞后, SDS-PAGE分析真核表达载体pcDNA-λ在COS7细胞的分泌表达.用2×106个雏鸡B淋巴细胞免疫BALB/c小鼠, 取脾细胞与骨髓瘤细胞融合, 分别采用细胞免疫荧光和间接ELISA筛选阳性杂交瘤克隆.结果: 成功构建分泌表达鸡Igλ轻链的重组载体, SDS-PAGE分析表明在COS7细胞上清有目的蛋白的分泌表达.杂交瘤细胞经筛选与鉴定, 获得2株分泌抗鸡Igλ轻链mAb的杂交瘤细胞株, Western blot检测到该mAb对重组鸡Igλ轻链的反应性.结论: 构建了重组表达载体pcDNA-λ并在COS7细胞上清分泌表达了重组鸡Igλ轻链.并用淋巴细胞杂交瘤技术成功筛选出抗鸡Igλ轻链mAb.为深入研究鸡Igλ轻链的结构与功能奠定了基础.     

自拟乳验方治疗肝郁痰凝型乳腺增生症临床研究

目的:研究自拟乳验方联合他莫昔芬治疗肝郁痰凝型乳腺增生症(HMG)临床疗效。方法:将78例肝郁痰凝型HMG患者随机分为治疗组和对照组,每组各39例,对照组给予他莫昔芬治疗,治疗组在对照组基础上加用自拟乳验方治疗。1个月经周期为1疗程,治疗2疗程后观察中医证候积分(乳房疼痛、乳房肿块大小、乳房肿块质地)、雌二醇(E_2)、孕酮(P)、泌乳素(PRL)水平的变化及不良反应发生情况。结果:2组临床疗效对比,差异有显著性(P0.05);治疗后2组乳房疼痛积分、乳房肿块大小积分及乳房肿块质地积分均降低,但治疗组改善优于对照组(P0.05);治疗后2组患者血清E_2、PRL水平均降低,P水平均升高,但治疗组改善E_2、P、PRL分泌的疗效优于对照组(P0.05);治疗组较对照组的不良反应发生率低。结论:自拟乳验方联合他莫昔芬治疗具有明显改善乳房疼痛及乳房肿块的作用,并能有效调节患者血清性激素水平,不仅疗效确切,还可降低西药他莫昔芬的不良反应发生。     

干细胞移植后皮肤损伤Ⅳ级患儿深静脉导管的护理

目的为2例造血干细胞移植术后出现急性皮肤移植物抗宿主病(Graft-versus-hoat disease,GVHD)Ⅳ级患儿实施深静脉导管维护,维持导管功能完好。方法此期患儿全身皮肤大小水疱伴剥脱渗液,对静脉导管的固定与维护造成困难,从预防导管感染、脱落、堵管、血栓方面实施护理措施,做好针对性宣教和心理护理。结果 2例患儿均未出现导管并发症。结论深静脉导管护理的正确严格实施是保证导管功能完好的重要手段。     

儿科住院医师科研能力培养的研究

住院医师规范化培训作为医学生毕业后教育的重要组成部分,在医学人才培养中起着承上启下的重要作用。它的培养水平与医院的整体医疗、教学和科研水平密切相关［1‐2］。住院医师规范化培训的目的是培养牢固掌握基本理论知识、临床实践技能,并具备教学、科研能力及独立工作能力的高素质综合型医学人才［3‐4］。     

移动健康技术在慢性病管理中的应用

介绍了国内外移动健康研究现状,采用数据挖掘技术研发糖尿病健康管理移动APP,实现了糖尿病患病风险评估、体征指标监测、用药和饮食管理、相关健康知识推送,以及公众健康的实时管理。     

海南省1964—2013年尘肺病发病情况分析

以1964—2013年海南省确诊的尘肺病为研究对象,分别对尘肺病时间分布、地区和行业分布、工种、接尘工龄和并发肺结核等进行分析。结果显示,1964—2013年海南省累计报告尘肺病例727例,出现两个发病高峰时期,分别在1985—1995年、2006—2012年期间;96.01%的尘肺病例种类为矽肺;尘肺发病主要集中在东方市(62.31%),其次为昌江县(12.10%);行业以采矿和选矿业为主(90.51%);尘肺病例平均接尘工龄(11.41±7.22)年,其中壹期、贰期和叁期尘肺病例平均接尘工龄分别为(12.49±9.98)年、(11.16±9.23)年和(8.30±5.12)年;尘肺病例以采矿工和凿岩工为主(占74.69%);尘肺期别越高,肺结核的并发率越高(χ2=14.61,P0.005);农民工是海南省近期尘肺病确诊报告的主要群体(占65.47%)。提示海南省尘肺病发病重点地区主要集中在海南西部,采矿和选矿业是尘肺病发病的重点行业。     

米诺环素对缺血性脑卒中血脑屏障重塑的影响及其机制

目的探索米诺环素（minocycline,MC）对大鼠局限性脑缺血再灌注后血脑屏障（blood-brain barrier,BBB）重塑及神经保护的作用机制及影像可视化。方法48只SD大鼠随机分为4组：早期给药组、晚期给药组、生理盐水组及假手术组,每组12只。其中早期给药组于手术后即刻尾静脉注入MC（3 mg/kg）;晚期给药组于拔线后恢复再灌注6 h后大鼠尾静脉注入MC（3 mg/kg）;生理盐水组于再灌注即刻注入相同体积的生理盐水;假手术组除了不插入线栓外,其余处理同生理盐水组。再灌注24 h后进行神经功能评分,并采用HE、免疫组化、Western blot、免疫荧光及磁共振成像等方法观察MC对脑缺血再灌注后BBB重塑的影响及影像学改变。结果缺血再灌注24 h后各组神经功能缺损评分差异有统计学意义（P<0.001）,其中生理盐水组神经功能缺损评分高于给药组;早期给药组神经功能缺损评分低于晚期给药组。磁共振图像显示各组最终梗死体积差异有统计学意义（P<0.001）。早期给药组及晚期给药组梗死体积显著小于生理盐水组,早期给药组小于晚期给药组,假手术组未显示梗死灶。给药组脑组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、CD11b的表达低于生理盐水组,且早期给药组低于晚期给药组;给药组脑组织中转化生长因子-β(TGF-β)、IL-10、YM1、RECA-1、PDGFR-β的表达高于生理盐水组,且早期给药组高于晚期给药组。给药组血清中IL-1β、IL-6和TNF-α含量低于生理盐水组,且早期给药组低于晚期给药组。Western blot结果显示给药组IL-1β、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、TNF-α的表达低于生理盐水组,且早期给药组低于晚期给药组;给药组claudin-5、occludin、ZO-1、IL-10、TGF-β和YM1的表达高于生理盐水组,且早期给药组高于晚期给药组。结论MC可有效减轻缺血再灌注损伤促发BBB重塑,立即给药对神经功能障碍的改善作用更明显。     

国医大师卢芳治疗自身免疫性疾病经验

介绍国医大师卢芳诊治自身免疫性疾病的治则、观点、临床经验,及中医药在自身免疫性疾病治疗中的研究.卢老治疗此类疾病,遵循辨病与辨证"双辨相结合"的总原则,认为这一类疾病的癥结为"热、毒、血瘀",并自拟验方抑免汤治疗.本文将从辨病到辨证,审症到诊断,立法到组方,方义到个药,宏观到微观,介绍并阐释中医药治疗自身免疫性疾病作用及部分机制.     

执行《中国药典》2010年版中药材与饮片标准所遇到的问题及建议

《中国药典》作为国家监督管理药品质量的法定技术标准,是药品生产、经营、管理和检验的法定依据。《中国药典》2010年版已实施三年多了,对保证药品质量,规范药品标准起到了重要作用。笔者在日常检验中,发现中药材和饮片有些质量标准的制定不尽合理,有些标准的制定尚未考虑人力、物力及操作可行性。就以下问题谈几点商榷意见和建议,供再版时参考。