宽叶缬草SRAP-PCR反应体系的优化及引物筛选

目的 建立宽叶缬草的相关序列扩增多态性（SRAP）-聚合酶链式反应（PCR）反应体系,为宽叶缬草良种选育提供理论和技术基础。方法 采用单因素试验考察Taq Mix用量,Mg²⁺浓度,模板DNA浓度,Taq DNA聚合酶浓度对宽叶缬草SRAP-PCR扩增结果的影响,以此为基础进行正交试验,优化宽叶缬草SRAP-PCR反应体系,并在最优反应体系条件下筛选可用于宽叶缬草遗传多样性研究的有效引物。结果 单因素实验结果表明Taq Mix用量为8~11 μL时扩增效果较佳;加入低浓度Mg²⁺可获得较佳扩增效果;中低浓度模板DNA用量可提高扩增效果;加入少量Taq DNA聚合酶可增加扩增结果丰富度。正交实验结果表明各因素对宽叶缬草SRAP-PCR扩增结果的影响程度大小依次为Taq Mix用量>Taq DNA聚合酶加入量>Mg²⁺加入量>模板DNA用量。适于宽叶缬草的最优反应体系为Taq Mix 11 μL,模板DNA 30 ng,Mg²⁺ 0.025 mmol·L^-1,Taq DNA 1.5 U,正向引物与反向引物各5 μmol·L^-1,用双蒸水补足体系至 20 μL。最优退火温度为36.8 ℃。应用最优体系从88对引物中筛选出17对适用于宽叶缬草SRAP-PCR的条带清晰、多态性较高的有效引物。结论 建立的宽叶缬草SRAP-PCR反应体系稳定性良好,可用于宽叶缬草遗传多样性研究。     

山羊瘤胃电活动的研究

山羊瘤胃电活动的波形，由慢波的快波组成。快波重叠于波之上；一般快波发生在慢波的升支上。实验观察到瘤胃的慢波有四种类型：①独立波；②二联波；③多联波；④负相波。     

乳腺X线摄影中微钙化对乳腺导管内原位癌的诊断价值

目的 探讨乳腺X线摄影中微钙化对乳腺导管内原位癌(DCIS)的诊断价值.方法 回顾性分析住院治疗的163例乳腺肿物患者的临床资料,研究其乳腺X线摄影和病理检查结果,分析乳腺X线摄影诊断良、恶性肿瘤与病理诊断结果的一致性和乳腺X线摄影发现微钙化与病理诊断DCIS的一致性.结果 乳腺X线摄影诊断良性肿瘤44例,恶性肿瘤119例.病理检查结果诊断为良性肿瘤37例,恶性肿瘤126例.乳腺X线摄影诊断良、恶性肿瘤与病理诊断结果的一致性为中等(Kappa=0.492,t=6.323,P﹤0.01),诊断乳腺癌的敏感度为84.92％(107/126),特异度为67.57％(25/37),阳性预测值为89.92％(107/119),阴性预测值为56.82％(25/44).乳腺X线摄影发现微钙化与病理诊断DCIS的一致性较差(Kappa=0.181,t=3.125,P﹤0.01).乳腺X线摄影发现微钙化对DCIS诊断的敏感度为77.78％(21/27),特异度为55.15％(75/136),阳性预测值为25.61％(21/82),阴性预测值为92.59％(75/81).结论 乳腺X线摄影能够作为临床筛查乳腺癌的有效手段,但是单纯寻找微钙化以诊断DCIS效能较低,不能作为诊断DCIS的标准.     

中药学专业方剂学麻黄汤案例教学设计

方剂学是联系中医药基础和临床不可或缺的桥梁学科,中药学专业学生中医基础理论等相关知识学习深度不足,因而学习难度较大。麻黄汤是方剂学教材的第一方,本文以麻黄汤为例,探讨其主治证及病机、用药要点,分析精选经典案例,探究中药学专业方剂学的课程教学设计,以提升教学效果,达到中药学专业学生医药兼通的教学目的。     

黔产石吊兰水、醇提取物中石吊兰素转移率的对比研究

目的:对黔产石吊兰水、醇提取物中石吊兰素转移率做对比研究,确定最佳提取方法,为石吊兰质量评价提供一定的参考。方法:采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(4.6mm×250mm,5μm),以甲醇-水(68:32)为流动相,检测波长为334nm,流速1mL·min-1,进样量10μL,分别测定。结果:水提物中石吊兰素转移率为67.451%,醇提物中石吊兰素转移率为227.783%。结论:提取方法准确、简便、快捷,可为石吊兰质量评价提供一定的参考。     

商品天冬等级与其活性物质含量的相关性分析

目的:测定不同等级天冬药材中醇溶性浸出物和活性物质总皂苷、总多糖的含量,分析天冬商品等级与醇溶性浸出物、活性物质含量之间的相关性,考察商品天冬等级划分方法的合理性。方法:根据2015年版《中国药典》测定不同商品等级天冬药材醇溶性浸出物含量;采用紫外-可见分光光度法测定37份不同等级天冬中总皂苷含量,检测波长408 nm;采用苯酚-硫酸法测定总多糖含量,检测波长490 nm;运用相关分析和线性回归分析天冬药材醇溶性浸出物、总皂苷及总多糖含量与商品等级间的相关性。结果:不同等级天冬药材醇溶性浸出物和总皂苷含量有显著性差异(P0.05),一等品与三等品比较天冬总多糖含量具显著性差异(P0.05),其余各等级间总多糖含量差异无显著性。在相关性分析中,天冬商品等级与醇溶性浸出物、总皂苷含量呈极显著正相关关系(P0.01),与总多糖含量呈显著正相关关系(P0.05)。结论:商品天冬以药材中部直径为主要标准的分级方法能体现天冬醇溶性浸出物和内在活性物质总皂苷含量,传统等级划分方法仍具有合理性;天冬药材建议以测定总皂苷含量为主,醇溶性浸出物和总多糖含量作为辅助质量评价指标。     

黔产宽叶缬草叶绿体trnL-F,matK基因遗传关系的分析

目的:探讨贵州省宽叶缬草在叶绿体基因trn L-F,mat K上的遗传关系。方法:利用trn L-F,mat K序列对宽叶缬草进行序列分析,运用Bioedit,MEGA 5.0软件计算贵州省宽叶缬草居群遗传距离,并进行聚类分析建立系统发育树。结果:不同居群宽叶缬草trn L-F序列长度为947~985 bp,鸟嘌呤和胞嘧啶质量分数为35.92%~36.55%,其中差异位点8个,变异位点5个,居群间的遗传距离为0.000 0~0.005 4,最小进化法(minimum-evolution,ME),最大似然法(maximum likelihood,ML),邻接法(neighbor-joining,NJ),非加权配对算数平均法(unweighted pair group method with arithmetic mean,UPGMA)4种聚类构树结果显示15(江口县官和乡泗渡村寨上组),18(江口县凯德镇育苗基地)号样品明显与大部分的宽叶缬草样品区分出来;不同居群宽叶缬草mat K序列长度为1 080~1 088 bp,鸟嘌呤和胞嘧啶质量分数为35.19%~36.64%,差异位点2个,变异位点1个,简约信息位点1个,居群间的遗传距离为0.000 0~0.000 9,ML,NJ,ME,UPGMA 4种聚类构树结果显示2(剑河县太拥乡太平村),5(剑河县岑松镇稿旁村),6(剑河县关么乡苗岭村),20(江口县闵孝镇渔凉溪村)号样品聚为一类,其余19份样品聚为一类。结论:贵州省宽叶缬草居群内trn L-F,mat K序列具有高度保守性。     

半枝莲活性物质含量测定及RAPD遗传多样性分析

目的:探究不同产地半枝莲活性物质总黄酮与野黄芩苷的含量差异以及遗传多样性。方法:采用紫外分光光度法测定总黄酮含量;采用HPLC测定野黄芩苷含量;采用RAPD对不同产地半枝莲进行遗传多样性分析;分析半枝莲总黄酮和野黄芩苷含量与RAPD遗传多样性的相关性。结果:不同产地半枝莲总黄酮平均含量为3.95%;野黄芩苷平均含量为0.24%;RAPD分析中,19个不同产地半枝莲遗传多态率为97.92%;聚类分析结果显示,在相似性系数为0.54～0.57时,分为两大类群;不同产地半枝莲遗传多样性与总黄酮含量无明显相关性,与野黄芩苷含量呈负相关关系。结论:不同产地半枝莲总黄酮及野黄芩苷含量差异较大,遗传多样性丰富,野黄芩苷含量与RAPD遗传多样性存在一定的相关性。     

二岩虎果无糖颗粒HPLC指纹图谱的建立

目的建立二岩虎果无糖颗粒(石吊兰、岩白菜、虎杖、石仙桃)HPLC指纹图谱。方法该药物70%甲醇提取液的分析采用Waters X-Select C₁₈反相色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相甲醇-水,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长304 nm。通过聚类分析、主成分分析、偏最小二乘法判别分析进行化学模式识别。结果10批样品指纹图谱中有15个共有峰,指认出其中4个(岩白菜素、虎杖苷、石吊兰素、大黄素),相似度均大于0.900。所有样品分为3类,石吊兰素、未知化合物1、岩白菜素、未知化合物2、虎杖苷、大黄素是各批样品产生差异的重要成分。结论HPLC指纹图谱结合化学模式识别可为二岩虎果无糖颗粒质量控制标准的制定提供参考。