人类α型叶酸受体基因的克隆及其真核表达载体的构建

目的 探讨如何以人类α型叶酸受体(FOLR-1)基因为基础构建核酸疫苗。方法 应用RT-PCR技术，从人类卵巢癌细胞系-SKOV3细胞中扩增FOLR-1基因，插入克隆载体pGEM-T Easy，经DNA自动测序仪测序证实后，以亚克隆法构建于真核表达载体pcDNA3．1( )，并使用限制性内切酶酶切鉴定。结果 从卵巢癌细胞系SKOV3中成功扩增出FOLR-1基因，并克隆人pcDNA3．1( )载体。结论 成功构建FOLR-1的重组克隆及真核表达载体，为今后利用FOLR-1进行卵巢上皮性肿瘤的免疫及导向治疗研究打下了基础。     

用蛋白质芯片技术筛选非小细胞肺癌患者血清中标志蛋白

目的 探讨用蛋白质芯片技术检测血清非小细胞肺癌（NSCLC）标志蛋白筛查肺癌患者的可行性。方法 用蛋白质芯片表面增强激光解吸电离飞行时间质谱仪（SELDI-TOF-MS）技术检测123例肺癌患者和40名正常人血清蛋白质质谱。用数字表法随机抽取94份标本（53例NSCLC，21例小细胞肺癌和20名正常人）作为训练组进行系统训练，将筛选出来的相对分子质量为11493、6429、8245、5336及2536的5个蛋白峰作为一个标志物组合模式，建立分类树模型（即系统训练过程）；用69份未知血清标本（49例NSCLC，20名正常人）作为盲筛组验证该模型。结果 系统显示，在训练组该模式检测NCLC的敏感性和特异性分别为95．9％（71／74）、90．0％（18／20），盲筛组分别为83．7％（41／49）及80．0％（16／20）。结论 蛋白质芯片SELDI-TOF-MS技术能较准确的区分NSCLC患者与健康对照者，该技术为NSCLC的筛查提供了新的有效工具。     

碘-125内照射粒子支架治疗中晚期食管癌的疗效研究

目的:探讨捆绑碘-125内照射粒子的食管支架在治疗中晚期食管癌中的临床应用和疗效。方法:35例食管癌患者分为两组,A组放置普通自膨支架,B组放置捆绑碘-125粒子的支架进行治疗,术后随访并发症、治疗效果及生存期。结果:35例患者支架置入过程顺利,位置合适,术后吞咽困难症状明显改善,连续随访未出现穿孔、出血、移位等并发症,生活质量良好,普通支架组平均生存期为120d,碘-125粒子支架组平均生存期为370d,明显高于普通支架组(P<0.001),2组术后血象和体重改变无显著性差异(P>0.05)。结论:捆绑碘-125内照射粒子的食管支架置入可明显改善中晚期食管癌患者的吞咽困难症状,同时对肿瘤行组织间放疗治疗,提高患者生存质量,延长生存期,疗效明显优于普通支架,且安全可靠。     

血清肿瘤标志物对SCLC和NSCLC的Fisher判别分析

目的:探讨血清肿瘤标志物对SCLC和NSCLC的鉴别诊断价值.方法:采用电化学发光免疫法检测25例患者血清中CEA、CYFRA21-1、NSE、CA125、CA199及SCCAg的水平;对NSCLC组和SCLc组间统计检验有差异(P＜0.05)的血清肿瘤标志物用Fisher判别方法建立判别函数鉴别诊断模型;用该模型回代相应变量对SCLC和NSCLC进行预测分组,检验该判别函数模型的鉴别诊断效果.结果:6种血清肿瘤标志物在NSCLC组和SCLC组间有统计学差异(P＜0.05)的变量分别是:CYFRA21-1、NSE和SCCAG;建立的判别函数鉴别诊断模型,在NSCLC组判别正确率89.87%,SCLC组判别正确率87.37%,两组合计判别正确率88.93%.结论:应用Fisher判别法对血清肿瘤标志物建立的判别函数鉴别诊断模型可简便、快速、有效地对NSCLC和SCLC进行鉴别诊断,值得临床借鉴.     

术中放疗加术后放疗治疗晚期肺癌

目的:观察术中放疗加常规术后胸腔外照射的方法对晚期肺癌局部复发及远处转移的效果。方法:对42例III~IV期肺癌患者,手术切除肿瘤后,选用12MeV电子线,剂量为20Gy~30Gy,时间约4~7分钟,立即在直线加速器下对瘤床进行照射,术后一月再进行体外照射,剂量为20Gy~40Gy,并对所有患者进行随访。结果:本组无手术死亡,术中照射未引起常见的放疗后并发症,存活2年以上的病人中,无手术区肿瘤的增大,20例患者术后1~2年出现肿瘤远处转移,2年生存率为65%,中位生存时间为26.8个月。结论:术中放疗对III~IV期肺癌的局部复发有良好的控制作用,但不能有效控制肿瘤的远处转移。     

平消胶囊治疗胸部恶性肿瘤的临床观察

对 76例胸部恶性肿瘤患者随机分组 ,采用化疗加口服平消胶囊和单纯化疗两种治疗方法。通过对两组患者的主要症状、血红蛋白、白细胞、IgG、IgM的临床对比观察和研究。结果显示 :平消胶囊可以减轻胸部恶性肿瘤化疗后的毒副作用 ,增强肿瘤患者的免疫功能 ,为抗肿瘤治疗中很有价值的辅助药物。     

人α型地酸受体基因融合表达载体的构建和表达

目的 采用反转录聚合酶链反应（RT－PCR）法获得人α型叶酸受体（folate receptor alpha,FOLR-1,FR-1)基因序列，构建融合表达载体pGEXFR-1并进行表达。方法 将RT－PCR法扩增的FOLR－1基因，克隆入融合表达载体pGEX-4T-2中，使其受控于Ptac启动子，转化大肠杆菌DH5α。经异丙基－β－D－硫代半乳糖苷（IPTG）诱导，用SDS－PAGE检测表达产物。结果 SDS－PAGE显示，FOLR－1表达产物的相对分子质量（Mr）约为55000，与预期的结果相符。Western-blot证实，D相应Mr处，有GST－FR1融合蛋白的显示条带。结论 成功地构建了FOLR－1基因的融合表达载体并获得表达，为进一步探讨卵巢癌的免疫治疗提供了实验依据。     

尿纤溶酶原激活物及血管内皮生长因子在食管癌中的表达及对肿瘤血管形成的影响

目的探讨尿纤溶酶原激活物（uPA）、血管内皮生长因子（VEGF）在食管癌中的表达及对肿瘤血管生成的影响。方法采用免疫组织化学sP法检测正常食管黏膜上皮组织（18例）及食管癌组织（68例）中uPA、VEGF的表达,检测CD。用以标记肿瘤微血管密度（MVD）,根据MVD均值分为高、低MVD组,分析食管癌uPA、VEGF的表达和临床病理特征的关系及对肿瘤血管形成的影响。结果uPA蛋白在正常食管黏膜上皮组织、食管癌组织中的阳性率分别为27．8％（5／18）和70．6％（48／68）,差异有统计学意义（X^2=11．63,P〈0．05）;VEGF蛋白在正常食管黏膜上皮组织、食管癌组织中的阳性率分别为22．2％（4／18）和63．2％（43／68）,差异有统计学意义（X^2=9．78,P〈0．05）。食管癌组织中uPA与VEGF表达有一致性（X^2=9．72,P〈0．05）。MVD平均为42．38±11．62,高MVD组uPA、VEGF蛋白表达显著高于低MVD组（X^2值分别为6．13和10．12,均P〈0．05）。uPA、VEGF蛋白表达与年龄、性别、病理类型无关（均P〉0．05）,均与临床病理分期、分化程度和淋巴结转移相关（P〈0．05）。结论食管癌组织中uPA、VEGF蛋白高表达,可能促进肿瘤血管形成,提示预后不良。     

uPA、PAI-1在食管癌发生、发展不同阶段的表达及意义

目的：探讨尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）、纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）在食管癌发生、发展中的作用及意义。方法：采用免疫组织化学SP法检测正常食管黏膜上皮组织（18例）、食管黏膜上皮不典型增生组织（23例）及食管癌组织（68例）中uPA、PAI-1蛋白的表达,并分析其和食管癌临床病理特征的关系。结果：uPA蛋白在正常食管黏膜上皮组织、食管黏膜上皮不典型增生组织及食管癌组织中的阳性率分别为27.8%、39.1%、70.6%,三者间有显著性差异（P〈0.05）;PAI-1蛋白在正常食管黏膜上皮组织、食管黏膜上皮不典型增生组织及食管癌组织中的阳性率分别为22.2%、34.8%、64.7%,三者间有显著性差异（P〈0.05）。uPA、PAI-1蛋白表达与年龄、性别、病理类型无关（P〉0.05）,在临床病理Ⅰ-Ⅱ期和Ⅲ-Ⅳ期间有升高的趋势,但差异无统计学意义（P〉0.05）,与分化程度和淋巴结有无转移有关（P〈0.05）。结论：uPA、PAI-1蛋白在食管癌发生、发展不同阶段的表达呈进行性上升的趋势,可能与食管癌的发生、发展相关,过度表达提示预后不良。