BDNF/TrKB介导的突触丢失对创伤性脑损伤小鼠远期认知障碍的影响及机制

目的 探究脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶受体(TrK)B介导的突触丢失对创伤性脑损伤(TBI)小鼠远期认知障碍的影响及机制。方法 采用改良的Allen重锤打击法制作TBI模型，将小鼠分为Sham组、TBI组、TBI＿OE＿NC组、TBI＿OE＿BDNF组、TBI＿Sh＿NC组、TBI＿Sh＿BDNF组，每组40只。Sham组、TBI组分别在造模后1、3、5、7 d检测神经元突触后致密物厚度和突触体密度、BDNF、TrkB mRNA及蛋白表达。将OE＿NC和OE＿BDNF组腺病毒载体3μl注入承受单侧大脑皮质重锤打击的小鼠海马体，免疫荧光法检测BDNF、突触素(Synaptophysin)在小鼠海马体中的表达，Western印迹检测TrkB、p-TrkB、突触蛋白(SYN)1、SYNA、突触后致密蛋白(PSD)95等蛋白表达水平，Morris水迷宫实验检测小鼠定位航行和空间探索能力。将TBI＿Sh＿NC和TBI＿Sh＿BDNF组腺病毒载体3μl注入正常小鼠海马体，免疫荧光法检测Synaptophysin在海马体中的表达，Morris水迷宫实验检测定位航行和空间探索能力。TUN...     

星形细胞瘤FLI-1蛋白表达及其与病人预后的关系

目的 探讨星形细胞瘤Friend白血病整合素1转录因子（FLI-1）表达水平及其与病人预后的关系。方法 选取2015年6月~2018年6月手术切除的术后病理检查确诊的星形细胞瘤标本112例和颅脑损伤内减压术获得非肿瘤脑组织59例（对照组）,采用免疫组织化学染色法检测FLI-1表达情况。术后随访3年,记录无进展生存、总生存情况,其中无进展生存为预后良好,肿瘤进展或病人死亡为预后不良。结果 112例星形细胞瘤中,预后良好62例,预后不良50例。星形细胞瘤FLI-1表达阳性率[66.96%（75/112）]明显高于对照组[16.95%（10/59）;P<0.05]。星形细胞瘤FLI-1表达与IDH1表达呈明显负相关（r=-0.682,P<0.001）,与p53表达呈正明显相关（r=0.711,P<0.001）。多因素logistic回归分析显示FLI-1表达阳性是星形细胞瘤预后不良的独立危险因素（OR=3.758 ;95% CI 1.439~9.814 ;P=0.009）。生存曲线分析显示,FLI-1表达阴性病人3年累积无进展生存率（75.68%）、3年累积总生存率（81.08%）均明显高于FLI-1表达阳性的病人（分别为45.33%、49.33%;P<0.05）。结论 星形细胞瘤FLI-1呈高表达,与病人的不良预后有关。     

外泌体来源的miR-181a促进胶质瘤的血管生成

目的：探讨外泌体来源的miR-181a对胶质瘤血管生成和肿瘤进展的影响。方法：选用2017年8月至2019年12月海南医学院第二附属医院手术切除的83例胶质瘤和13例瘤旁组织标本,以及胶质瘤细胞U87、A172、U251、LN229、U373和小神经胶质细胞HM,用qPCR法检测瘤组织和细胞中miR-181a的表达水平。构建过表达或敲减miR-181a的U373细胞,分离和鉴定外泌体;用小管形成实验、鸡胚绒毛尿囊膜血管实验观察外泌体来源的miR-181a对HUVEC小管和血管生成的影响。构建裸鼠U373细胞移植瘤模型,观察外泌体来源的miR-181a对血管生成及肿瘤生长的影响。结果：miR-181a在胶质瘤肿瘤组织和细胞中的表达水平明显高于瘤旁组织和 HM 细胞（均 P<0.01）。外泌体来源的 miR-181a 可以明显促进 HUVEC 小管的形成和鸡胚尿绒毛囊膜的血管生成（均P<0.01）。裸鼠胶质细胞瘤体内实验发现,回输大量外泌体来源miR-181a的小鼠移植瘤进展更快（P<0.05）、肿瘤组织中血管生成数量显著增加（P<0.01）。结论：miR-181a在促进胶质瘤血管生成中发挥重要作用,可能成为胶质瘤诊断及治疗的潜在靶点。     

显微切除下疝小脑扁桃体及颅后窝结构重建治疗成人ChiariⅠ型畸形的临床疗效

目的分析显微切除下疝小脑扁桃体及颅后窝结构重建治疗成人ChiariⅠ型畸形的临床疗效。方法采用随机数字表法将我院60例ChiariⅠ型畸形成年患者分为2组,其中对照组采用单纯颅后窝减压术(PFD),观察组在行颅后窝减压后采用显微切除下疝小脑扁桃体及颅后窝结构重建,比较2组临床疗效及康复情况。结果观察组神经症状好转情况明显优于对照组,观察组总有效率(90.00%)明显高于对照组(63.33%),差异有统计学意义(P0.05)。观察组ChiariⅠ型畸形患者经过手术治疗后并发症发生率(6.67%)明显低于对照组(36.67%),差异有统计学意义(P0.05)。结论应用显微切除下疝小脑扁桃体及颅后窝结构重建的方法治疗成人ChiariⅠ型畸形,患者神经症状明显好转,减少并发症的发生,具有较高的临床疗效,建议广泛应用。微切除下疝小脑扁桃体及颅后窝结构重建的方法治疗成人ChiariⅠ型畸形,患者神经症状明显好转,减少并发症的发生,具有较高的临床疗效,建议广泛应用。     

脑胶质瘤中miR-181b的表达及临床意义

背景与目的：miR-181b在多种肿瘤中表达异常,并参与调节多种抗肿瘤药物的敏感性。研究发现miR-181b在胶质瘤中具有起类似抑癌基因的作用．可作为胶质瘤的独立预后指标。本研究旨在进一步探讨恶性胶质瘤中miR-181b表达的临床意义及miR-181b对替莫唑胺化疗敏感性的影响。方法：收集不同病理级别胶质瘤标本,以荧光定量PCR法检测其中miR-181b的表达,分析其与胶质瘤病理分级及患者预后的关系：利用CCK-8细胞毒性实验检测患者恶性胶质瘤细胞对替莫唑胺的敏感性。并分析其与miR-181b表达的关系。结果：miR-181b在胶质瘤组织中的表达显著低于正常脑组织伊〈0．051．miR-181b的表达水平分别为：正常脑组织3．69±0．477,WH0I级2．56±0．354．WHOⅡ级0．81±0．222．WHOⅢ级0．42±0．130．WH0 Ⅳ级0．21±0．067。miR-181b表达低的患者中位生存期为370±37天．而miR-181b表达高的患者中位生存期为493±60天（P〈0．05）。在高级别胶质瘤中,miR-181b的表达与替莫唑胺的敏感性呈正相关（r=-0．576,P〈0．001）。结论：miR-181b在胶质瘤中的表达与胶质瘤的病理级别呈负相关．而与脑胶质瘤患者预后呈正相关．与高级别胶质瘤对替莫唑胺的敏感性呈正相关．     

脑膜瘤组织中MGMT甲基化状态及其对脑膜瘤细胞生长与转移的影响

目的:探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)在脑膜瘤组织中的甲基化状态及其对人脑膜瘤细胞系IOMM-Lee细胞生长和转移的作用。方法:收集本院34例脑膜瘤患者的标本,甲基化特异的PCR(MSP)法检测脑膜瘤组织和正常脑组织中MGMT甲基化水平,免疫组织化学染色检测脑膜瘤组织和正常脑组织中MGMT表达。将培养...     

MicroRNA-181b提高U87细胞对VM-26的敏感性研究

背景与目的：MicroRNA（miRNA）参与肿瘤发生发展的诸多过程,并参与调节多种抗肿瘤药物的敏感性。本研究探讨恶性胶质瘤中miR-181b对VM-26（teniposide）化疗敏感性的影响。方法：以荧光定量PCR法检测miR-181b在高级别胶质瘤中的表达．并利用CCK-8细胞毒性实验检测高级别胶质瘤患者细胞对VM-26的化疗敏感性：并通过慢病毒感染构建稳定高表达miR-181b的U87／181b细胞及其对照组U87／nc．在荧光显微镜下观察其转染率及荧光定量PCR法检测其中miR-181b的表达：进而利用CCK-8细胞毒性实验检测U87／181b和U87／nc细胞对VM-26的敏感性．利用流式细胞仪检测VM-26作用72小时后U87／181b和U87／nc的凋亡情况。结果：在高级别胶质瘤中,miR-181b的表达与VM-26的敏感性呈正相关（r=-0．691。P〈0．01）．也就是miR一18lb高表达肿瘤对VM-26的敏感性高。qPCR检测miR-181b在U87／18lb（0．699±0．023）的表达显著高于U87／nc（0．019±0．001）（P〈0．05）。CCK-8检测结果显示U87／181b[IC50：（1．25±0．12）μg／mL]对VM-26的敏感性显著高于U87／nc[IC50：（6．24±0．88）μg／mL]P〈0．05）。经VM-26处理后U87／181b凋亡率（69．41±0．77）明显高于U87／nc（37．93_＋2．90）（P〈0．05）。结论：在高级别胶质瘤高表达miR-18lb的肿瘤对VM-26的敏感性高：在胶质瘤细胞U87中增加miR-18lb表达可以提高对VM-26的敏感性．     

颅脑创伤患者早期感染监测指标分析

目的分析全身炎症反应综合征(ASS)评分、C反应蛋白(CRP)监测、与周围血白细胞检测在颅脑创伤(TBI)患者早期感染的临床应用。方法收集2017年1月至2018年1月TBI患者80例,根据入院诊断,将80例患者划分为感染组(40例)和非感染组(40例)。感染组、非感染组患者均给予ASS评分、CRP监测、白细胞计数监测。结果感染组ASS评分(32.44±15.98)分,非感染组ASS评分(15.45±13.62)分,差异有显著性(t=8.123,P<0.05);非感染组患者CRP监测值较正常无明显改变;感染组患者CRP监测分别在1 d、3 d、5 d、7 d监测值高于非感染组,差异有显著性(P<0.05);感染组患者1 d、3 d、5 d、7 d白细胞计数明显升高(P<0.05)。结论 ASS评分、CRP监测、白细胞计数对TBI患者早期感染有临床诊断价值。     

表达LAG-3抗体的溶瘤腺病毒对成胶质细胞瘤的抗瘤性

目的:探讨共表达淋巴细胞活化基因3(lymphocyte activation gene 3,LAG-3)抗体(LAG-3 antibody,aLAG)的溶瘤腺病毒对成胶质细胞瘤的抗肿瘤活性。方法:在溶瘤腺病毒Ad3的骨架中插入aLAG序列,获得重组溶瘤腺病毒Ad3-aLAG。应用WB法检测感染成胶质细胞瘤GL261细胞中aLAG的表达水平,MTT法检测重组溶瘤腺病毒对GL261细胞的杀伤能力,通过小鼠皮下移植瘤模型评估重组溶瘤腺病毒对成胶质细胞瘤的体内肿瘤生长的抑制效果,免疫组化染色法检测肿瘤浸润T细胞,并通过流式细胞术检测肿瘤浸润T细胞分泌细胞因子TNF-α及IFN-γ的水平。结果:成功构建的重组溶瘤腺病毒可以有效表达aLAG(P<0.01),并且可以在体外杀伤GL261细胞(P<0.01)。小鼠皮下移植瘤模型实验结果显示,重组溶瘤腺病毒Ad3-aLAG较Ad3溶瘤腺病毒而言肿瘤抑制能力更强(P<0.01),并且可以有效增强移植瘤组织中CD3+T细胞的浸润(P<0.01)、增强浸润T细胞分泌IFN-γ的能力(P<0.01)。结论:Ad3-aLAG重组溶瘤腺病毒在体内外均显著抑制成胶质细胞瘤细胞的生长,同时增强体内的抗肿瘤免疫反应,有望为成胶质细胞瘤治疗提供一种新的方案。