Src激酶抑制剂PP2在乳腺癌MCF-7细胞转移中的作用和机制

  目的  探讨Src激酶抑制剂PP2在乳腺癌MCF-7细胞转移中的作用和机制。  方法  乳腺癌MCF-7细胞经PP2作用48 h后, 检测肿瘤细胞体外粘附、侵袭能力的改变, 细胞周期的改变, Western blot及Real-time PCR试验检测肿瘤细胞转移相关基因表达的变化, 报告基因试验检测AP-1和NF-κB启动子活性的变化。  结果  PP2可抑制MCF-7细胞中Src激酶活性, 2.5μM和5μMPP2作用后, 肿瘤细胞粘附能力下降63.4%和34.7%;侵袭能力下降44.3%和20.2%;细胞周期显著阻滞在G₀/G₁期; CD44、MMP-2/9以及p-β-catenin表达显著下降, E-cadherin表达显著升高; AP-1启动子活性下降64.5%和37.9%, NF-κB启动子活性下降55.7%和31.8%。  结论  Src激酶与乳腺癌MCF-7细胞肿瘤转移能力密切相关, 阻断Src激酶活性可抑制肿瘤细胞转移能力。      

乳腺癌患者髓系来源抑制性细胞的鉴定与免疫作用研究

目的:探讨乳腺癌患者体内一群髓系来源抑制性细胞(MDSCs)的表型特点及它对淋巴细胞的抑制作用.方法:收集20例乳腺癌患者外周血及肿瘤组织,10例体检正常健康者外周血,通过流式和免疫组织化学染色技术检测MDSCs的表型特点及比例.采用免疫磁珠技术分选乳腺癌患者肿瘤中的MDSCs,通过瑞氏染色观察细胞形态,分别利用MTT法、流式细胞术和ELISA法检测其对自体淋巴细胞增殖、凋亡和细胞因子分泌的影响.结果:流式细胞仪检测结果显示乳腺癌患者肿瘤组织及外周血中有一群具有髓系前体细胞形态的MDSCs,表面标志为CD45+ CD13+CD33+CD14-CD15-.实验结果显示肿瘤组织来源的MDSCs显著抑制自体淋巴细胞增殖,促进其调亡,并显著抑制其分泌IFN-γ,促进TGF-β、IL-10释放.结论:乳腺癌患者肿瘤组织中存在一群具有独特表型特点的MDSCs,不仅抑制自体淋巴细胞增殖和因子分泌,同时促进细胞凋亡.     

影像学评估腹壁下动脉穿支皮瓣血运的研究进展

应用不同影像学方法评估游离皮瓣的穿支血管走行及血供特性在乳房再造术中的重要作用腹壁下动脉穿支(leep inferior epigastric perforator, DIFP)皮瓣属穿支皮瓣, 穿支血管细小, 解剖变异大, 术前影像评估穿支血管的位置, 管径大小及其走行, 对提高手术成功率和安全性具有重要意义评估血管的方法包括手持多普勒、色彩双超声、数字减影血管造影、CT血管造影、核磁血管造影、多层螺旋CT以及吲哚菁绿激光辅助的血管造影等, 本文初步介绍不同检查方法评估DIEP皮瓣血管走行及血供特性的优缺点, 辅助乳腺癌乳房再造术中血管分布的评估。      

吲哚胺2,3双加氧酶表达对人胃癌细胞免疫逃逸的影响

目的 探讨转染人吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)基因的胃癌细胞系的IDO表达与免疫逃逸的关系.方法 根据IDO基因编码序列,构建真核表达载体pIRES_2-EGFP-IDO,电转染胃癌BGC-823细胞,用G418筛选稳定表达IDO细胞株.用RT-PCR和Western blot检测其IDO mRNA和IDO蛋白表达,测定培养上清中色氨酸和犬尿氨酸的水平.分离胃癌患者外周血T细胞,与转染细胞及加入1甲基色氨酸(1-MT)的细胞共孵育,检测对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和T细胞增殖的影响.结果 pIRES_2-EGFP-IDO真核载体经酶切验证并测序后证实连接成功.稳定表达IDO的BGC-823细胞IDO mRNA明显高于未转染组和对照组,并有IDO蛋白表达.转染组和未转染组色氨酸水平分别为(3.23±0.53)mg/L、(6.03±0.51)mg/L(t=13.32,P=0.000),犬尿氨酸浓度分别为(4.84±0.11)mg/L、(1.83±0.10)mg/L(t=42.916,P=0.000).转染IDO组、1-MT逆转组、转染空质粒组、BGC-823组之间对T淋巴细胞增殖抑制相比差异均有统计学意义(F=114.817,P=0.000),转染IDO组和1-MT逆转组抑制率明显高于转染空质粒组及BGC-823组,同时逆转组抑制率低于转染IDO组(P<0.05).4组CTL杀伤活性之间相比差异均有统计学意义(F=397.449,P=0.000).转染IDO组和1-MT逆转组杀伤活性明显低于转染空质粒组及BGC-823组,同时逆转组CTL杀伤活性也明显高于转染IDO组(P<0.05).结论 IDO转染胃癌细胞后显示IDO抑制了T细胞的增殖和CTL活性,参与胃癌的免疫逃逸作用.     

TBO-1型双波长乳腺肿瘤检测仪临床应用研究

目的：探讨TB（）11型检测仪对乳腺肿瘤的诊断价值。方法：选择病例200例，乳腺癌92例，乳腺良性肿瘤108例。检测肿瘤的血流及血氧含量，并常规行乳腺超声及乳腺钼靶X线摄片检查。结果：应用TB（）11型双波长乳腺肿瘤检测仪检测到乳腺癌患者中符合高血低氧者83例，诊断符合率为90．2％；乳腺良性肿瘤中符合非高血低氧者86例，诊断符合率为79．6％。乳腺钼靶X线摄片对乳腺癌及良性肿瘤的诊断符合率分别为93．5％和88．0％，乳腺超声检查的诊断符合率分别90．6％和93．3％。3种检查手段的诊断结果差异无统计学意义，P〉0．05。结论：TB（）11型检测仪可作为乳腺癌诊断的辅助方法之一。     

RAR-β2 基因在乳腺肿瘤组织中的表达及意义*

目的:检测视黄酸受体β 2（RAR-β 2）基因在不同乳腺肿瘤组织中的表达,探讨RAR-β 2 基因与乳腺肿瘤的关系,分析其在乳腺癌发生、发展中的作用。方法:免疫组织化学法检测乳腺浸润性癌、导管上皮重度不典型增生、腺纤维瘤各40例及20例正常乳腺组织中RAR-β 2 的表达情况。RT-PCR 法检测乳腺浸润性癌、导管上皮重度不典型增生、腺纤维瘤及正常乳腺组织各20例RAR-β 2 的表达水平。结果:免疫组化结果显示,RAR-β 2 阳性表达主要位于细胞核,RAR-β 2 蛋白在乳腺浸润癌组织中阳性表达率（30.0%）明显低于正常乳腺组织（95.0%）,χ2=26.30,P<0.05。RAR-β 2 蛋白在乳腺重度不典型增生组织中阳性表达率（17.5%）低于乳腺癌组织,但差异无统计学意义（P>0.05）。 在乳腺浸润性癌组织中,RAR-β 2 表达与患者年龄、肿瘤大小、临床分期、腋下淋巴结转移状况、组织学分级、病理学类型以及ER、PR表达状况无相关性（P 均>0.05）。 随访结果显示,28例RAR-β 2 阴性乳腺癌患者中3 例发生内脏转移,而12例RAR-β 2 阳性患者仅1 例发生骨转移。RT-PCR 结果显示,RAR-β 2 在乳腺癌、导管上皮重度不典型增生、腺纤维瘤及正常乳腺组织中阳性表达率分别为25.0%（5/20）、35.0%（7/20）、85.0%（17/20）和100%（20/20）,乳腺癌组织RAR-β 2 mRNA 明显低于正常乳腺组织（χ2=30.43,P<0.001）。 结论:RAR-β 2 可能在乳腺癌的发生过程中发挥抑制作用,并且可能在乳腺癌发生的早期发挥作用。      

保留乳头乳晕的乳腺癌改良根治术后Ⅰ期假体植入乳房重建20例

目的探讨保留乳头乳晕复合体的乳腺癌改良根治术后I期假体植入乳房重建治疗早期乳腺癌的可行性及疗效。方法选出符合要求的20例早期乳腺癌患者,行保留乳头乳晕复合体的乳腺癌改良根治术及I期硅胶假体植入乳房重建术。结果 20例患者中Tis 2例I,期7例I,I期11例。全部患者均顺利完成手术。再造乳房外观良好,客观评价效果优良和尚好者18例(90%),主观评价效果优良和尚好者达100%。其中1例术后发生乳头部分坏死,2例术后皮下积液,均于1月内痊愈。术后随访3～42个月,无严重并发症,所有病例均无局部复发及远处转移。结论对于有重建要求的大多数早期乳腺癌患者,保留乳头乳晕复合体的乳腺癌改良根治术后I期假体植入乳房重建并发症低,美学效果满意,是一种安全、可靠的治疗方法。     

从表观遗传学角度探讨RAR-β2 基因在乳腺癌发生中的作用*

目的:探讨视黄酸受体β 2（RAR-β 2）基因在乳腺癌、乳腺癌前病变组织中的表达改变,分析其表达情况与基因启动子甲基化状态的关系。方法:采用半定量RT-PCR 和甲基化特异PCR（MSP）方法检测120 例乳腺肿瘤组织中RAR-β 2 基因mRNA 表达情况及其启动子甲基化状态。去甲基化药物5- 氮-2'- 脱氧胞苷（5-aza-2'-deoxycytidine,5-aza-dC）处理乳腺癌细胞系MCF-7和T-47D,分别检测RAR-β 2 mRNA 表达改变和甲基化状况。结果:在mRNA 水平上,RAR-β 2 基因在乳腺癌及癌前病变组织中阳性表达率较正常乳腺及腺纤维瘤组织显著降低（P<0.05）。 MSP 结果显示,20例正常乳腺组织均未发现RAR-β 2 基因启动子的甲基化;60例乳腺癌组织中,27例（45%）检测到RAR-β 2 基因启动子的甲基化;40例乳腺癌前病变组织中,14例（35%）检测到RAR-β 2 基因启动子的甲基化;20例腺纤维瘤组织中,2 例检测到RAR-β 2 基因启动子的甲基化。乳腺癌及癌前病变组织中RAR-β 2 基因甲基化发生率均明显高于正常组织（P<0.05）,乳腺癌组织甲基化发生率与癌前病变组织无显著性差异（χ2=0.99,P>0.05）。 RAR-β 2 基因表达和甲基化水平之间存在负相关（P<0.05）。 5-aza-dC 处理后,MCF-7 及T-47D 细胞系均出现RAR-β 2 基因再表达,MSP 法检测证实基因发生了去甲基化。结论:DNA甲基化是乳腺癌中 RAR-β 2 基因表达调控的一种重要机制,RAR-β 2启动子甲基化引起的基因表达下调可能与乳腺癌的发生相关。