曲妥珠单抗对HER-2高表达胃癌细胞珠抑制作用观察

目的:观察曲妥珠单抗对HER-2高表达人胃癌NCI-N87细胞株的抑制作用.方法:免疫组化法检测HER-2蛋白在NCI-N87细胞中的表达.荧光免疫杂交法(FISH)检测HER-2基因在NCI-N87细胞中的扩增情况.根据是否应用曲妥珠单抗分为对照组与药物组,其中药物组浓度分别为0.1、1、10和100 μg/mL,作用72 h后以CCK8法测定曲妥珠单抗对NCI-N87细胞的生长抑制作用.结果:免疫组化法检测显示,HER-2蛋白在NCI-N87细胞中的表达以细胞膜分布为主,呈棕褐色颗粒状,HER-2蛋白为可疑阳性表达(++).荧光免疫杂交法检测显示,NCI-N87细胞HER-2/CEP17＞2,存在HER-2基因扩增.CCK8实验显示,曲妥珠单抗浓度为0.1、1、10和100 μg/mL时细胞存活率分别为(84.17±1.70)％、(81.21±3.94)％、(83.65±2.48)％和(80.59±4.25)％,四组间比较差异无统计学意义,P＞0.05;与对照组(100％)相比,差异有统计学意义,P=0.000.结论:曲妥珠单抗对HER-2高表达人胃癌NCI-N87细胞具有一定的生长抑制作用;曲妥珠单抗浓度在0.1～100 μg/mL对NCI-N87细胞的抑制作用相似.     

碱基错配长PCR引物法检测CCNH基因rs3093816位点的多态性

目的：细胞周期蛋白H(CCNH)基因rs3093816位点的多态性与许多癌症的发生风险升高有关，但由于此位点缺少合适的限制性内切酶位点，使聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)的使用受到限制。因此，本研究拟建立碱基错配长PCR引物法用于检测CCNH基因rs3093816位点。方法：通过创造性酶切位点PCR-RFLP方法在CCNH扩增产物中引入新的酶切位点，然后利用CviQ I酶区分PCR产物。本研究同时设计了碱基错配长PCR引物和碱基错配相对短PCR引物，比较分析碱基错配长PCR引物是否更简便经济。结果：与短引物法相比，长引物占扩增总片段的比例越大，酶切产物越容易区分，凝胶电泳需要的时间越短。结论：成功建立了错配长PCR引物法检测CCNH基因rs3093816位点。     

131I和高能X线对HER-2高表达乳腺癌细胞BT474杀伤效应的比较

目的比较放射性131I与高能X线对人类表皮生长因子受体-2(HER-2)高表达乳腺癌细胞BT474的杀伤效应,为临床放射免疫治疗(RIT)提供依据。方法采用免疫组化法检测BT474细胞HER-2基因表达。取对数生长期BT474细胞,分别行放射性核素131I培养和高能X线外照射,并按射线吸收剂量分为0、2、4、6、8 Gy 5个亚组,以克隆形成实验分析细胞存活率,根据多靶单击模型绘制细胞存活曲线,计算反映放射敏感性的指标准域剂量(Dq)、平均致死剂量(D0)、2 Gy照射的存活分数(SF2)。结果免疫组化染色显示BT474细胞呈HER-2蛋白高表达。131I和高能X线外照射后BT474细胞的D0分别为1.725、1.786,Dq分别为0.415、-0.762;SF2分别为22.650%、37.922%,差异无统计学意义(P>0.05,t=3.643)。结论放射性核素131I低剂量持续辐射与高能X线外照射对乳腺癌BT474细胞可产生相当的杀伤效应,前者因对正常组织损伤小而更适于RIT。     

IODOGEN法制备131I-Herceptin操作者辐射安全性研究

目的 评价IODOGEN法标记¹³¹I-Herceptin整个制备过程(从预实验到实验结束)操作者辐射防护的安全性。方法 应用IODOGEN法标记¹³¹I-Herceptin,在¹³¹I-Herceptin制备过程中,操作者采取辐射防护措施,在辐射防护屏障内操作者人体重要器官相应体表部位放置热释光剂量计,测量制备过程人体不同部位接受辐射剂量。读取热释光剂量计的相应数据,对操作者人体各部位采取辐射防护后所接受辐射量进一步计算评估,评价制备过程,操作者的辐射安全性。结果 人体各部位所受辐射的当量剂量为:眼部1.01mSv、颈部1.00mSv、心脏1.02mSv、上臂1.02mSv、前臂1.10mSv、手部1.35mSv、腰部1.00mSv。按照人体质量比例换算,操作者人体接受有效剂量小于0.62mSv;眼部当量剂量为1.01mSv,皮肤当量剂量最大为1.19mSv/cm²。结论 热释光剂量仪测量证实,¹³¹I-Herceptin制备过程操作者人体及各重要器官所接受辐射量小于《电离辐射防护与辐射源安全基本标准》规定的职业人员年有效剂量,该过程操作者是安全的。