抗α-玉米赤霉醇单克隆抗体的研制及初步应用

目的:制备抗α-玉米赤霉醇(α-ZER)的单克隆抗体(mAb),建立对动物源性食品中残留α-ZER及其同系物的检测方法。方法:结合O-羧甲基羟胺法和EDC法制备α-ZER-BSA偶联物,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb。用夹心ELISA测定mAbIg亚类;按Beatty法计算亲和常数;间接ELISA法测定效价;用直接竞争ELISA检测mAb与α-ZER的同系物、己烯雌酚、19-去甲睾酮、链霉素及氯霉素等的交叉反应;绘制α-ZER标准品竞争抑制曲线,检定抗体的灵敏度。用该抗体建立的直接竞争ELISA对37份动物肝组织样品进行检测,并与HPLC检测结果比较。结果:紫外线扫描证明,α-ZER-BSA偶联成功。实验获得8株可稳定分泌抗α-ZERmAb杂交瘤细胞株,其中1株(4E5)分泌的mAb效价较高,为5.142×107,其Ig亚型为IgG1。该mAb能特异识别α-ZER及其同系物,而与其它常用兽药无交叉反应。建立了α-ZER直接竞争ELISA,从HPLC确认为阴性的37份样品中,筛出8份阳性样品。结论:利用mAb建立的直接竞争ELISA检测方法,适合动物源性食品中残留α-ZER及其同系物的快速筛选。     

家族性婴儿重症肌无力:追踪到成年的3个病例

家族性婴儿重症肌无力(FIMG)是一种非自身免疫性疾病。其特征是:肌无力发生在同胞兄弟(姐妹),母亲没有肌无力,出生时严重的呼吸和喂奶困难,无严重眼肌瘫痪。文献提示该病系突触前乙酰胆硷的再合成或动员不足。作者报导了3个病例。例1 26岁,女性,出生后不久出现喘息性呼吸,气管切开维持达一年之久。9岁起爬楼、跑步及举臂均困难,右眼睑轻度下垂。16岁时,因妊娠病情又复恶化,腾喜龙试验阳性,此时开始接受吡啶斯的明治疗。至妊娠第9个月时,无力加重,伴呼吸抑制,经气管切开在辅助呼吸期间分娩一健康婴儿。三周后作了胸腺切除,此后肌无力改善几周。一年后又用强的松治疗,仅第一周有轻度改善。17     

低分子右旋糖酐对血浆粘度的影响

最近作者曾报告动脉瘤致蛛网膜下腔出血病人血浆粘度与脑缺血的关系.静滴低分子右旋糖酐(LMWD)250ml每日两次,平均9天,观察到血浆粘度从治疗前的1.38±0.09mPa/秒,至第七天上升到最高值1.66±0.09mPa/秒,以后又渐降低至第12天时为1.56±0.13mPa/秒.已发现有局灶性神经功能缺失的患者其血浆粘度的升高比无局灶性神经功能缺失患者明显.据此,作者断定:高血浆粘度在脑缺血发生上可能起促进作用.但是作者对血浆粘度增高的可能原因未作评价.Kroemer等用LMWD治疗缺血性脑卒中,也观察到治疗10天期间血浆粘度有类似的升高(开始500m     

应用单克隆抗体精制无病毒的因子Ⅷ制剂

本文就最近正在开发的两种利用单克隆抗体(McAb)亲和层析法高度纯化的因子Ⅷ制剂(Monoclate和AHF-M)的制备、特性及临床效果作了介绍。两种制剂纯化中所用的McAb及制剂的病毒灭活方法有较大差异。 Monoclate利用vW因子的McAb作亲和层析柱。取自血浆提取的冷沉淀,上亲和层析柱,洗净杂蛋白后,用高浓度的钙离子溶液将因子Ⅷ解离洗脱,再经氨基己基琼脂糖层析后透析、过滤、冻干,最后加热灭活病毒。 AHF-M则利用因子Ⅷ促凝成分(Ⅷ∶C)的McAb作亲和层析柱。从血浆中取得的冷沉淀,先经用有机溶剂/表面活性剂处理,以     

复合PCR鉴定沙门菌的方法

沙门菌属于肠杆菌科，是具有鞭毛、能运动的革兰阴性杆菌，而且它是导致食源性疾病的主要病原菌之一。为了加强口岸执法管理、缩短检验检疫流程和提高检验检疫工作效率，本实验拟建立复合聚合酶链反应快速检验鼠伤寒沙门菌的方法，以求提高检验工作准确性和速度。本实验在参考国内外文献的基础上，设计了两对引物，建立了较稳定的PCR检测系统。本实验中，使用了不同的菌株作为比较，证实了系统特异性良好，并且从不同的食品来源检出的沙门菌，皆能被本实验系统鉴定检出。使用复合PCR技术，能快速、准确的鉴定肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌，并且较之经典的鉴定方法，时间上提前了2—3d。     

化痰的中成药辨证应用

本文介绍化痰中成药的临床应用。根据化痰中成药的功用不同,可以分为清热化痰、温化寒痰、燥湿化痰、润燥化痰、攻下消痰、扶正化痰等六个方面,可供读者选择运用。     

脂质体的制备和应用

脂质体是目前在体外实验中能将各种物质引入细胞内的最有效的载体,它可以作为水溶性和脂溶性物质的载体。现已有数百种不同的物质可包被于脂质体中,其中包括酶、糖脂、免疫球蛋白、单克隆抗体、药物(尤其是抗肿瘤、抗关节炎和抗寄生虫药物)、抗原、生物反应调节剂(如淋巴因子和胞壁酰二肽)、抗真菌药物、螯合剂、标记物、抗生素、离子、疫苗和染色体。定义脂质体是人工磷脂类囊泡。根据纽约科学院提出的定义,脂质体有下列三种:多层大囊泡(MLV),其大小为0.1～5μm;小单     

桃拉综合征病毒VP1高变区蛋白抗体制备及初步特性分析

目的:制备高效价的桃拉综合征病毒主要结构蛋白VP1高变区蛋白抗体,分析其免疫特性,为研究免疫诊断试剂做参考。方法:将p ET-VP1重组载体转化入大肠杆菌BL21,在IPTG诱导下进行表达。重组VP1蛋白纯化后免疫新西兰家兔,用琼脂扩散试验及ELISA检测抗体效价,用与VP1纯化蛋白特异性结合的单克隆噬菌体做竞争抑制试验。结果:p ETVP1重组蛋白在大肠杆菌BL21中呈可溶性高效表达。抗血清经琼扩试验鉴定效价达1∶26,ELISA效价达1∶217。与VP1蛋白特异结合的单克隆噬菌体能阻断部分抗血清与VP1蛋白的结合活性,但不影响最终检测阳性的判断。结论:制备的VP1高变区蛋白抗体效价高,VP1蛋白少数区域的位点变异并不影响多克隆抗体的结合活性,可用作免疫检测诊断试剂。     

1997年12月至2009年12月成人接种卡介苗对支气管哮喘防控作用监测研究

目的 探讨成人接种卡介苗能否预防支气管哮喘（简称哮喘）发生和控制已患哮喘急性发作.方法 以分层整群随机抽样确定科研点的县、乡,以乡辖村为单位分为研究组和对照组,对村中20～55岁非肿瘤、结核病现症患者的自愿村民按性别、年龄分别配对,对研究组人群进行卡介苗接种,每6个月1次连续3次;依靠县、乡、村三级防疫网络,对哮喘的发生和已患哮喘的发作进行监测.结果 抽得4个乡、83个村,共有哮喘患者1 406例,患病率为1.3% （1 406/108 189）;纳入监测的20～55岁村民共24 830人,哮喘患者149例,患病率0.6%,其中研究组81例,对照组68例;在1997年12月至2009年12月监测期间研究组死亡3例,尚存的78例急性发作35例,共计233次;对照组死亡7例,尚存的61例发作59例,共计2 131次.哮喘患者的急性发作率比较及发作次数（人次）比较研究组与对照组间的差异均有统计学意义（χ2=42.07,P＜0.01;t=9.46,P＜0.01）;研究组原非哮喘患者12 334人中已经死亡432人,新发哮喘13例,哮喘发生、发作共计167次;对照组原非哮喘患者12 347人中已经死亡511人,新发哮喘39例,哮喘发生、发作共计1 907次.哮喘发病率比较及发生、发作的次数（人次）比较研究组与对照组间的差异亦均有统计学意义（χ2=13.17,P＜0.01;t=6.31,P＜0.01）.结论 成人接种卡介苗对哮喘的发生有一定预防作用,对哮喘急性发作有一定治疗、控制作用.