基于PI3K/AKT通路探讨防己黄芪汤对气虚水负荷模型大鼠胃肠道水通道蛋白的影响

目的 基于PI3K/AKT通路，探讨防己黄芪汤对气虚水负荷模型大鼠胃肠道水通道蛋白的影响。方法 采用“饮食不节+游泳疲劳”法复制气虚大鼠模型，再在气虚模型基础上进行水负荷试验，观察防己黄芪汤对该模型大鼠一般状态、体质量、水负荷指数、排尿量、尿-D木糖排泄率、脾脏指数、胸腺指数、血清胃泌素、胃残留率、小肠推进率的影响；HE染色法观察胃、小肠、结肠组织的病理改变；Western Blot法测定胃肠PI3K、AKT、AQP1、AQP3、AQP4的蛋白表达水平。结果 给药干预后，与模型组相比，防己黄芪汤高剂量组大鼠精神状态良好、食欲渐增、粪便形态有所改善；大鼠体质量、排尿量、尿-D木糖排泄率、脾脏指数、胸腺指数、血清胃泌素含量、小肠推进率均显著提升；水负荷指数、胃残留率均显著下降；胃肠黏膜损伤及炎性等病理改变恢复显著；胃肠道组织AQP1、AQP3、AQP4蛋白表达明显升高，PI3K、AKT蛋白表达明显降低。结论 防己黄芪汤能改善气虚水负荷模型大鼠一般状态、水负荷指数、尿量、胃肠道功能以及胃、小肠、结肠组织形态，以防己黄芪汤高剂量组最为显著；并通过上调胃肠AQP1、AQP3、AQP4的表达来恢复...     

基于PI3K/Akt/mTOR信号通路调控自噬探讨当归四逆汤对痛风性关节炎大鼠的影响

目的 基于磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路,探讨当归四逆汤对痛风性关节炎（GA）大鼠自噬水平的影响。方法 60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组（0.3 mg·kg^-1）和当归四逆汤低、中、高剂量组（6.54、13.08、26.16 g·kg^-1）,每组10只,并分别给予相应药物灌胃,正常组、模型组给予等体积生理盐水灌胃,连续7 d。于第5天给药1 h后向各组（正常组除外）大鼠右侧踝关节注射尿酸钠混悬液（50 g·L^-1）建立GA模型,正常组注射等体积的无菌生理盐水。观察大鼠踝关节肿胀情况;测定血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、IL-1β水平;观察踝关节病理形态变化;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测滑膜PI3K、磷酸化（p）-PI3K、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ/Ⅰ（LC3Ⅱ/Ⅰ）、自噬效应蛋白（Beclin-1）、泛素结合蛋白（p62）表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测PI3K、Akt、mTOR、LC3、Beclin-1、p62 mRNA表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠关节肿胀指数显著升高（P<0.01）,血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高（P<0.01）,踝关节滑膜组织可见明显炎性细胞浸润和纤维组织增生,滑膜组织PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、p62蛋白表达显著升高（P<0.01）,PI3K、Akt、mTOR、p62 mRNA表达显著升高（P<0.01）,LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1蛋白和LC3、Beclin-1 mRNA表达降低（P<0.01）。与模型组比较,当归四逆汤中、高剂量组大鼠关节肿胀明显减轻（P<0.05）;血清中TNF-α、IL-6、IL-1β表达量显著明显降低（P<0.05）;踝关节滑膜组织未见明显炎性细胞浸润,纤维组织增生减轻;滑膜组织PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、p62蛋白表达量均明显降低（P<0.05）,PI3K、Akt、mTOR、p62 mRNA表达量亦明显降低（P<0.05）,而LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1蛋白和LC3、Beclin-1 mRNA表达量均明显上升（P<0.05）。结论 当归四逆汤可以抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,提高大鼠滑膜组织自噬水平,改善痛风性关节炎,并且以高剂量效果最佳。