不同来源赶黄草的ISSR分析

目的对不同来源的赶黄草进行遗传多样性分析,为进一步开发利用和保护赶黄草药用资源提供理论基础。方法利用ISSR分子标记方法对7个不同来源110个赶黄草样品进行DNA分子水平的评价,采用PAUP 4.0b软件处理进行聚类分析。结果筛选出19个ISSR引物,利用其中3条引物进行了不同来源赶黄草样品的ISSR-PCR分析,共获得34条多态性条带,多态位点百分率为100%,同时进行了居群间遗传多样性差异分析。结论赶黄草四川居群与其他两个居群间存在着一定的分化。本方法在评价赶黄草遗传多样性、亲缘关系、品种鉴别、遗传进化等方面有很好的适用性,可为赶黄草及其近缘属植物的系统学研究提供更多信息。     

光照对黄芩黄酮类活性成分积累及其相关基因表达的影响

目的:研究光照对黄芩悬浮细胞中黄芩苷、黄芩素的积累及相关基因表达的影响。方法:采用HPLC法检测黄芩悬浮细胞中黄芩苷、黄芩素的含量,应用半定量RT-PCR的方法对相关基因的表达进行分析。结果:光照对黄芩悬浮细胞中有效成分的积累有显著的促进作用,与黑暗条件相比,细胞生长13 d后黄芩苷含量显著增长了806.1%,黄芩素含量显著增长了42.5%,PAL基因在光照条件下的转录水平高于在黑暗条件,光照条件下UBGAT同黄芩素显著相关(r=-0.995)。结论:光诱导对黄芩悬浮细胞中有效成分的积累有显著的促进作用,光诱导刺激了与有效成分的积累相关基因(PAL,UBGAT)的表达。     

黄芩延长因子1a基因全长cDNA的克隆及其功能

目的:克隆黄芩延长因子1a全长cDNA序列,并分析温度对其表达水平的影响。方法:通过构建黄芩全长cDNA文库克隆黄芩延长因子1a,利用生物信息学手段分析该基因的序列特征;利用RT-PCR分析温度对黄芩延长因子1a基因表达水平的影响。结果:黄芩延长因子1a基因长1 672 bp,开放阅读框位于97～1 446,共449个氨基酸,具有典型的延长因子1a结构域;高温和低温处理后,黄芩EF1a的转录水平均显著提高。结论:黄芩EF1a的克隆为进一步研究其在黄芩生长代谢过程中的功能和作用提供了基础。     

外源生长素对黄芩悬浮细胞有效成分和内源激素含量的影响

目的:探讨外源生长素对黄芩悬浮细胞有效成分和内源激素含量的影响。方法:将稳定继代的黄芩愈伤组织在含有不同浓度NAA或KT的MS液体培养基悬浮震荡培养,光照16 h黑暗8 h进行培养18 d后,采用HPLC的方法,测定黄芩苷的含量,采用酶联免疫吸附法测定内源激素的含量,以黑暗条件为对照。结果:①与对照组相比,光照和黑暗条件下分别加入0.2 mg.L-1NAA后,黄芩苷含量显著降低,分别为未加入NAA时的2.56%,3.36%。②黑暗条件下,加入外源NAA后,ZR含量显著降低,但IAA,ABA和GAs含量变化不明显。③0.2 mg.L-1 NAA和不同浓度KT的协同作用对黄芩苷的含量呈现先增长后降低的趋势。其中1.0 mg.L-1的KT作用下黄芩苷含量最高,且黑暗条件下显著高于光照条件,达到2.13μg.L-1。结论:外源生长素不利于黄芩有效成分黄芩苷的积累,0.2 mg.L-1 NAA+1.0 mg.L-1 KT的组合对黄芩苷的积累量具有显著的促进作用。     

光照对黄芩悬浮细胞内源激素与有效成分相关性的影响

目的 :研究光照对黄芩悬浮细胞内源激素与有效成分相关性的影响。方法:采用HPLC法检测黄芩悬浮细胞中黄芩苷含量,酶联免疫吸附法检测内源激素。 结果: 研究结果表明在光照条件下,伴随着IAA含量的降低,黄芩苷含量也随之降低,两者变化曲线显著相关(r=0.972)。相对较高的IAA含量和相对较低的GAs含量有利于黄芩苷的积累,而绝对的GAs含量在本研究中并没有表现出与黄芩苷有很强的相关性。 结论 :黄芩悬浮细胞有效成分与内源激素绝对含量以及相对含量具有相关性。     

水分胁迫对黄芩内源激素与有效成分相关性的影响

目的:研究水分胁迫条件对黄芩内源激素与有效成分积累相关性的影响。方法:利用ELISA法测定黄芩根中内源激素(indole-3-acetic acid,IAA;abscisic acid,ABA;gibberellin,GAs;zeatin riboside,ZR)的含量;利用HPLC法测定黄芩苷、黄芩素含量。结果:水分胁迫处理70d,黄芩素含量显著高于对照,ZR与黄芩素含量呈正相关。水分胁迫条件下,GAs/IAA,GAs/ABA和GAs/ZR比值均呈上升趋势,与黄芩素含量变化显著相关。结论:GAs在水分胁迫影响了黄芩有效成份积累的过程中可能发挥了重要的作用。