版纳微型猪近交系AQP3克隆、序列分析及组织表达

目的 克隆版纳微型猪近交系aquaporin 3(AQP3)基因,并利用生物信息学方法分析其序列特征,研究其在猪各组织中的表达情况.方法 从版纳微型猪近交系脾脏中提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增猪AQP3编码区序列,将纯化的片段与pMD18-T载体连接,转化宿主菌DH 5α,筛选阳性克隆进行测序.并采用半定量RT-PCR方法分析版纳微型猪近交系不同组织中AQP3基因的表达情况.结果 成功克隆出AQP3基因编码区全长873 bp的序列,GenBank登录号为HQ888860,其编码290个氨基酸.氨基酸序列同源性分析表明,与牛的AQP3基因同源性最大,达99％.多组织半定量RT-PCR研究表明AQP3 mRNA在BMI猪的脾脏、肾脏、肺、小肠中均有表达,其中脾脏中表达最高.结论 成功克隆出了版纳微型猪近交系AQP3基因全长编码区,并对其编码的蛋白质功能进行了预测,为进一步的功能研究奠定了基础.     

主动护理干预联合中药熏洗在混合痔围手术期患者中的实施及效果评价

目的 探讨分析主动护理干预联合中药熏洗在混合痔围手术期患者中的应用价值.方法 选取2015年9月～2016年9月我院接受治疗的72例混合痔患者,随机分为试验组和对照组,每组36例,对照组行常规护理方法,试验组采取主动护理干预联合中药熏洗,严密观察患者术后并发症和恢复情况.利用统计学方法对此两组患者的术后并发症发生率、住院时间、遵医嘱行为和护理满意度进行比较分析.结果 试验组的术后并发症发生率、住院时间均明显低于对照组,且患者的遵医嘱行为与护理满意度也优于对照组,两组对比具有显著差异性(P<0.05),具有统计学意义.结论 混合痔围手术期患者通过主动护理干预联合中药熏洗,可有效地降低术后并发症发生率,缩短术后住院天数,有利于患者的早日康复,提高患者依从性和护理满意度,值得在临床上应用和推广.     

游离桡侧副动脉穿支皮瓣修复手部软组织缺损

目的 探讨应用游离桡侧副动脉穿支皮瓣修复手部中小面积皮肤软组织缺损的方法和疗效。方法 2018年3月-2021年6月,收治合并深部组织外露的手部皮肤软组织缺损18例,软组织缺损面积：2.5 cm×5.0 cm～5.0cm×10.0 cm,应用游离桡侧副动脉穿支皮瓣修复。皮瓣轴线为三角肌止点至肱骨外上髁连线,同时解剖分离臂外侧或后侧皮神经分支重建皮瓣感觉,供区直接缝合。术后通过门诊和微信随访,观察皮瓣外形、感觉功能、患手活动功能及供区等恢复情况。结果 术后18例皮瓣全部成活,其中1例皮瓣术后血管蒂部血肿卡压,引起静脉危象,经拆线后,静脉危象解除,皮瓣顺利成活。18例均获得3～20个月随访,平均11个月。皮瓣外形美观,不臃肿,质地柔软,与受区相当。皮瓣感觉恢复S2～S3。患手各指屈伸功能恢复良好,供区仅遗留一线性瘢痕。按照中华医学会手外科分会功能评定：优15例,良3例。结论 游离桡侧副动脉穿支皮瓣修复手部软组织缺损,皮瓣外形美观,质地柔软,操作简便,解剖恒定,可重建皮瓣感觉,是修复手部软组织缺损较为理想的一种方法。     

布地奈德辅治妊娠期支气管哮喘对孕妇症状缓解情况及安全性的影响分析

目的探讨布地奈德辅治妊娠期支气管哮喘对孕妇症状缓解情况及安全性的影响。方法回顾性分析2016年5月～2018年4月80例支气管哮喘发作入院孕妇资料,根据治疗方法分为观察组和对照组,每组40例,对照组患者采用常规方法对妊娠患者进行治疗,观察组在对照组的基础上加用布地奈德雾化治疗,比较两组患者临床症状改善时间、肺功能改善状况以及妊娠不良结局发生率。结果观察组患者喘憋消失、哮鸣音消失以及住院总时间均较对照组短,差异有统计学意义(P 0.05);两组患者治疗后肺功能指标均明显改善,且观察组患者1s用力呼气末容积占正常预计值百分比(FEV1%)、1s用力呼气末容积与用力肺活量比值(FEV1/FVC)、最大呼气流量占正常预计值百分比(PEF%)水平均高于对照组,差异有统计学意义(P 0.05);两组患者不良妊娠结局发生差异无统计学意义(P 0.05)。结论布地奈德辅治妊娠期支气管哮喘有效改善患者临床症状,提高患者肺功能,对确保患者早日恢复健康具有重要意义,安全性较高。     

丝氨酸-精氨酸蛋白激酶2与前列腺癌细胞周期的相关性

目的:探讨丝氨酸-精氨酸蛋白激酶2(SRPK2)与前列腺癌细胞周期的相关性。方法:通过皮尔森相关性分析探索癌症基因组图谱(TCGA)数据库中前列腺癌和SRPK2的相关基因集,并进一步将SRPK2相关基因集导入蛋白质相互作用关系检索工具(STRING)蛋白互作网络在线分析网站,通过Cytoscape软件进行可视化,提取与...     

聚乙二醇-聚乙烯亚胺/四氧化三铁纳米磁流体的毒性及其生物相容性

背景:为实现纳米基因药物在治疗肿瘤中实现高靶向性,课题采用聚乙二醇和聚乙烯亚胺修饰的磁性四氧化三铁纳米粒(PEG-PEI/Fe_3O_4)作为基因药物载体,在提高载体载药能力的同时,使载体具有超顺磁性,增加药物靶向性能.目的:评价PEG-PEI/Fe_3O_4纳米磁流体体外和体内毒性.方法:对制备的PEG-PEI/_3O_4纳米磁流体进行表征达到纳米材料水平后,过滤稀释5～20倍培养7702细胞和HpG_2细胞,进行体外MTT毒性试验;通过体内溶血试验和微核试验测定生物相容性和体内毒性.结果与结论:MTT结果显示,PEG-PEI/Fe_3O_4纳米磁流体对7702细胞毒性0～1级,对正常肝细胞无害;PEG-PEI/Fe_3O_4纳米磁流体对HpG_2细胞有轻微的旁观者抑制效应;PEG-PEI/Fe_3O_4纳米磁流体溶血率为0.372%,远小于5%;微核试验结果表明PEG-PEI/Fe_3O_4纳米磁流体无致畸、致突变作用.     

聚乳酸-羟基乙酸共聚物/硅酸钙三维多孔骨组织工程支架的构建与性能

BACKGROUND: Some disadvantages exsist in commonly used poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) scaffolds, including acidic degradation products, suboptimal mechanical properties, low pore size, poor porosity and pore connectivity rate and uncontrollable shape. OBJECTIVE: To construct a scaffold with three-dimensional (3D) pores by adding calcium silicate to improve the properties of PLGA, and then detect its degradability, mechanical properties and biocompatibility. METHODS: PLGA/calcium silicate porous composite microspheres were prepared by the emulsion-solvent evaporation method, and PLGA 3D porous scaffold was established by 3D-Bioplotter, and then PLGA/calcium silicate composite porous scaffolds were constructed by combining the microspheres with the scaffold using low temperature fusion technology. The compositions, morphology and degradability of the PLGA/calcium silicate porous composite microspheres and PLGA microspheres, as well as the morphology, pore properties and compression strength of the PLGA 3D scaffolds and PLGA/calcium silicate composite porous scaffolds were measured, respectively. Mouse bone marrow mesenchymal stem cells were respectively cultivated in the extracts of PLGA/calcium silicate porous composite microspheres and PLGA microspheres, and then were respectively seeded onto the PLGA 3D scaffolds and PLGA/calcium silicate composite porous scaffolds. Thereafter, the cell proliferation activity was detected at 1, 3 and 5 days. RESULTS AND CONCLUSION: Regular pores on the PLGA microspheres and internal cavities were formed, and the PH values of the degradation products were improved after adding calcium silicate. The fiber diameter, pore, porosity and average pore size of the composite porous scaffolds were all smaller than those of the PLGA scaffolds. The compression strength and elasticity modulus of the composite porous scaffolds were both higher than those of the PLGA scaffolds (P < 0.05). Bone marrow mesenchymal stem cells grew well in above microsphere extracts and scaffolds. These results indicate that PLGA/calcium silicate composite porous scaffolds exhibit good degradability in vitro, mechanical properties and biocompatibility.     

PEG-PEI/Fe_3O_4纳米磁流体-TK对裸鼠移植性肝癌细胞靶向杀伤作用研究

目的研究PEG-PEI／Fe3O4纳米磁流体-TK对人肝癌细胞系SMMC-7721裸鼠移植瘤模型的靶向性治疗作用。方法建立人原发性肝癌稞鼠皮下移植瘤模型，将荷瘤裸鼠随机分成肿瘤对照组、纯自杀基因组、PEG-PEI／Fe3O4纳米磁流体-TK组3组。对照组不作任何处理，实验组于瘤体内分别直接注射纯自杀基因、PEG-PEI／Fe3O4纳米磁流体-TK，同时于裸鼠腹腔内注射GCV，观察不同时段皮下肿瘤的生长情况并做病理学检查，免疫组化法检测肿瘤微血管密度（MVD）以及血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达量，原位末端标记（TUNEL）法检测细胞原位凋亡。同时，用RT-PCR检测肿瘤鼠心，肝，肾的自杀基因表达情况。结果裸鼠皮下成瘤率100％；研究PEG-PEI／Fe3O4纳米磁流体-TK组的肿瘤体积、血清AFP含量、肿瘤MVD和VEGF表达强度均明显低于对照组、纯自杀基因组（P〈0．05），细胞凋亡指数都明显高于后两组（P〈0．05），可见较多的凋亡细胞。RT—PCR测示肿瘤鼠心，肝，肾未见自杀基因表达，而肿瘤细胞则出现自杀基因表达。结论PEG-PEI／Fe3O4纳米磁流体-TK可显著抑制肿瘤的生长，并对肿瘤治疗具有靶向性，是一种较为理想的肝脏肿瘤靶向给药系统，有望成为治疗原发性肝癌的新型生物制剂之一。     

纳米磁流体介导的重组质粒PEGFP-AFP-hTN Fα对肝癌细胞HepG2的体外杀伤作用

目的探讨纳米磁流体作为肝癌基因治疗载体的可行性及AFP增强子能否使外来基因在AFP阳性细胞内高表达。方法构建重组质粒PEGFP-AFP-hTNFα并通过纳米磁流体分别转染入AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2及AFP表达阴性的宫颈癌细胞Hela。转染12h后，于荧光显微镜下动态观察；48h后，RT-PCR和Westemblot分析HepG2细胞中hTNFα基因的表达情况，用MTT法检测HepG2细胞的存活，用流式细胞分析HepG2细胞的凋亡。结果纳米磁流体能将重组质粒PEGFP-AFP-hTNFα转入HepG2细胞，并且其转染效率高于脂质体；RT-PCR及Westemblot证明转染的HepG2细胞有hTNFα基因的表达；MTT及流式细胞分析说明hTNFα基因发挥杀伤细胞作用。结论纳米磁流体能将重组质粒PEGFP-AFP-hTNFα转染HepG2细胞并获得表达，可作为肝癌基因治疗的基因载体。采用AFP增强子可使目的基因在HepG2细胞中定向而特异性表达。     

聚乙二醇-聚乙烯亚胺/四氧化三铁纳米磁流体的毒性及其生物相容性

背景：为实现纳米基因药物在治疗肿瘤中实现高靶向性,课题采用聚乙二醇和聚乙烯亚胺修饰的磁性四氧化三铁纳米粒(PEG-PEI/Fe3O4)作为基因药物载体,在提高载体载药能力的同时,使载体具有超顺磁性,增加药物靶向性能。 目的：评价PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体体外和体内毒性。 方法：对制备的PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体进行表征达到纳米材料水平后,过滤稀释5~20倍培养7702细胞和HpG2细胞,进行体外MTT毒性试验;通过体内溶血试验和微核试验测定生物相容性和体内毒性。 结果与结论：MTT结果显示,PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体对7702细胞毒性0~1级,对正常肝细胞无害;PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体对HpG2细胞有轻微的旁观者抑制效应;PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体溶血率为0.372%,远小于5%;微核试验结果表明PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体无致畸、致突变作用。 关键词：磁流体;细胞毒性试验;生物相容性;溶血试验;微核试验 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.03.016