低氧对Caco-2细胞P-gp表达及功能的影响

目的：低氧会改变许多药物的口服生物利用度,其中也包括多种P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的底物(药物),提示低氧可能影响肠上皮细胞P-gp的功能。Caco-2细胞单层膜模型是当前研究肠上皮P-gp功能的经典模型。本研究通过结合Caco-2细胞单层膜模型与低氧处理,研究低氧对Caco-2细胞P-gp表达和功能的影响,有助于阐明高原低氧环境改变肠上皮药物转运的机制。方法：正常培养的Caco-2细胞在1%的O₂浓度条件下分别培养24、48、72 h,提取膜蛋白后,采用蛋白质印迹法检测P-gp的表达水平,选择表达变化最显著的缺氧时间用于后续研究。于transwell小室中培养Caco-2细胞21 d,建立Caco-2细胞单层膜模型后,将其分为常氧对照组与低氧组,常氧对照组以正常条件继续培养72 h,低氧组在1%的O₂浓度条件下继续培养72 h,通过跨膜电阻(transepithelial electrical resistance,TEER)、荧光黄表观渗透系数(apparent permeability coefficient,P...     

槟榔醇提物对H9C2心肌细胞的抗缺氧保护作用

目的 研究槟榔无水醇提物对低氧H9C2心肌细胞的作用及其保护机制。方法 建立H9C2心肌细胞低氧模型,CCK-8法检测槟榔无水醇提物对H9C2细胞存活率的影响;通过检测细胞内丙二醛（MDA）含量,过氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）活力,研究槟榔无水醇提物对H9C2细胞的保护作用;RT-PCR法检测细胞内Nrf2、Caspase-3 mRNA水平的表达,从分子水平研究槟榔无水醇提物对低氧H9C2细胞的保护机制。结果 与常氧对照组相比,低氧24 h时细胞存活为28.46%（P<0.01）,细胞内MDA含量升高44.33%（P<0.05）,SOD、GSH活力分别下降16.18%、30.64%（P<0.05或P<0.01）。RT-PCR实验结果表明,Nrf2被激活,其mRNA表达上升1.74倍（P<0.05）。与低氧模型组相比,槟榔无水醇提物处理组H9C2细胞存活率明显升高（P<0.01）,且呈现剂量依赖性,槟榔无水醇提物处理组细胞内SOD、GSH活力分别增加14.90%、28.94%（P<0.05）,Nrf2基因mRNA相对表达下降66%（P<0.05）。结论 槟榔无水醇提物对低氧H9C2细胞有显著的保护作用,其保护机制可能与提高细胞内抗氧化物酶活力,减轻细胞氧化应激损伤,提高细胞耐低氧能力有关。     

高原环境影响治疗监测药物代谢的研究进展

高原环境会影响药物在体内的代谢，使得药动学参数、药物代谢酶及转运体的表达及功能均会发生变化。随着医药行业的快速发展，治疗药物监测（TDM）作为个体化用药的依据被广泛的关注，高原环境对监测药物有何影响?笔者通过查阅国内外相关文献，对临床上常用的治疗监测药物种类、治疗窗以及检测血样进行了归纳和总结，分析高原低氧环境对临床常用监测药物代谢的影响。为高原临床治疗药物监测提供参考，更好的保证高原人群合理用药，也为后期课题组开展高原治疗药物监测以及研究药物的遴选提供参考。     

高原低氧对大鼠左乙拉西坦药代动力学特征及脑血分布的影响

目的：高原低氧暴露易引起药物药动学参数及脑血分布的改变,其中包括多种P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的底物。抗癫痫药物左乙拉西坦是P-gp的底物,但高原低氧暴露是否改变其药代动力学特征及脑血分布尚不明确。本研究旨在探讨高原低氧对大鼠左乙拉西坦药代动力学特征及脑血分布的影响。方法：将Wistar大鼠分为低海拔对照组、高海拔组、溶剂对照组和P-gp诱导组,其中高海拔组大鼠急性暴露于4 010 m高原环境24 h后口服或静脉注射左乙拉西坦,口服给药后分别于第0.083、0.25、0.5、0.83、1.25、2、4、6、8、10、12、24 h采集血浆,静脉注射给药后分别于第5、45、60、120、240 min采集血浆及脑组织;P-gp诱导组大鼠连续3 d腹腔注射地塞米松后,静脉注射左乙拉西坦,于第120 min采集血浆及脑组织。采用高效液相色谱串联质谱(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)测定血浆和脑内药物浓度,采用蛋白质印迹法检测大鼠血脑屏障P-gp的表达。...