基于UPLC-MS/MS的大黄酸偶联物载药胶束在大鼠及比格犬体内药动学研究

目的 建立准确可靠的大鼠、比格犬体内紫杉醇(paclitaxel, PTX)血药浓度的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)含量测定方法,对大鼠尾静脉注射、比格犬静脉滴注泰素?(Taxol?)注射液和载紫杉醇的D-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯(D-α-tocopheryl polyethylene glycol 1000 succinate, TPGS)修饰的羧甲基壳聚糖(carboxymethyl chitosan, CMCS)-大黄酸(rhein, Rh)偶联物(PTX/TPGS-CR)纳米胶束后的药动学进行研究。方法 测定PTX/TPGS-CR胶束与0.9%氯化钠注射液、质量分数5%葡萄糖注射液输液配伍稳定性。血浆样品采用甲基叔丁基醚进行提取,通过UPLC-MS/MS分析测定大鼠尾静脉注射、比格犬静脉滴注PTX/TPGS-CR胶束和Taxol?后血浆样品中的药物浓度,绘制药-时曲线并计算药动学参数。结果 PTX/TPGS-CR胶束在0.9%氯化钠注射液复溶后8 h内粒径均无明显变化,无沉淀现象,粒径和多分散系数(polydispersity, PDI)较小。PTX...     

载紫杉醇聚乙二醇修饰的大黄酸偶联物胶束制剂稳定性研究

目的 优选载紫杉醇（PTX）聚乙二醇（PEG）修饰的大黄酸偶联物胶束（PTX/CRmP胶束）的冻干保护剂,并对添加最佳冻干保护剂后的PTX/CRmP胶束制剂稳定性进行评价。方法 以PTX/CRmP胶束制剂的外观、复溶性、粒径、多分散系数（PDI）、载药量及包封率作为指标,优选分别以0.1%、0.2%、0.4%葡萄糖、甘露醇、蔗糖、乳糖作为冻干保护剂的最佳方案;并探讨添加最佳冻干保护剂的PTX/CRmP胶束制剂与注射用水、0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液进行配伍后以及在高温、高湿、长期储存条件下的稳定性。结果 以0.2%甘露醇作为冻干保护剂的PTX/CRmP胶束制剂具有良好的外观及复溶性、较高的载药量和包封率、较小的粒径与PDI,故0.2%甘露醇是最佳冻干保护剂;添加0.2%甘露醇的PTX/CRmP胶束制剂与0.9%氯化钠溶液配伍后,在24 h内粒径、PDI均有减小,故选0.9%氯化钠作为最佳配伍溶剂;在高温、高湿以及储存3个月的条件下,添加0.2%甘露醇的PTX/CRmP胶束制剂的外观、粒径、载药量及包封率、PDI、电位均无明显变化,稳定性良好。结论 添加0.2%甘露醇的PTX/...     

载紫杉醇的聚乙二醇修饰的大黄酸偶联物胶束的体内安全性及抗肿瘤药效学研究

目的 探讨载紫杉醇(paclitaxel,PTX)的聚乙二醇修饰的羧甲基壳聚糖-大黄酸(CRmP)偶联物胶束(PTX/CRmP胶束)作为静脉注射给药制剂的安全性,并对PTX/CRmP胶束在小鼠体内的抗肿瘤效果进行研究。方法 测定PTX/CRmP胶束的pH值及渗透压。以新鲜兔血红细胞检测溶血性。新西兰白兔耳缘静脉注射PTX/CRmP胶束溶液、CRmP偶联物溶液,光镜下对血管连同周围组织切片进行组织学检查。建立H-22荷瘤小鼠模型,随机分组,分别尾静脉注射给予0.9%氯化钠注射液、注射用PTX脂质体、PTX注射液和PTX/CRmP胶束低、中、高剂量(5,10,15 mg·kg^-1)。给药过程中每天观察小鼠活动情况,记录小鼠体质量变化、肿瘤体积,绘制体质量变化曲线、肿瘤体积变化曲线,计算抑瘤率,HE染色观察肿瘤组织切片。结果 不同浓度PTX/CRmP胶束溶液的pH值与血液pH值相近,渗透压为286～292 mOsm·kg^-1。浓度在0.01～0.05mg·mL-1内,CRmP偶联物及PTX/CRmP胶束的溶血率<5%;经耳缘静脉注射后,注射部...     

载紫杉醇的PEG修饰的大黄酸偶联物胶束的表征、体外释放及药动学研究

目的 对载紫杉醇(paclitaxel,PTX)的聚乙二醇修饰的大黄酸偶联物[PEGylated carboxymethyl chiosan-rhein conjugate (polymeric),PTX/CRmP]胶束进行形态与结构表征,考察其体外(模拟血液环境中)释放情况及药动学特征。方法 通过透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)、差示扫描量热法(differential scanning calorimetry,DSC)、X射线衍射(X-ray diffraction,XRD)对胶束的粒径、形态及结构等方面进行评价;在pH 7.4磷酸盐缓冲液(含0.8 mol·L^-1水杨酸钠)中进行PTX/CRmP胶束的体外释放研究,计算PTX的累积释放率,绘制累积释放曲线;以大鼠为模型,尾静脉注射PTX/CRmP胶束后,通过药-时曲线、药动学参数等对其进行药动学研究。结果 TEM显示PTX/CRmP胶束呈类球形,粒径约160 nm,分布均匀;DSC和XRD显示PTX几乎全部被CPmP胶束包载入其内核中。PTX/CRmP胶束在pH 7.4磷酸盐缓冲液(含0.8 mol·L^-1水杨酸钠)中24 h内累积释放率为92.2%,药物释放速率显著慢于Taxol^®。药动学研究表明,与Taxol^®组相比,PTX/CRmP胶束中药物的分布和消除较慢,药-时曲线下面积显著增加,CRmP胶束能延长PTX半衰期及其在血液循环系统中的循环时间。结论 CRmP偶联物物理包载PTX于内核中所得的PTX/CRmP胶束,粒径小,在体外模拟血液pH环境中缓释,PTX生物利用度提高。     

载紫杉醇的PEG修饰的大黄酸偶联物胶束的细胞摄取及活体成像研究

目的 探究载紫杉醇(paclitaxel,PTX)的聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)修饰的大黄酸偶联物胶束的细胞摄取及活体成像情况。方法 将环境响应型荧光探针P4/P2与药物PTX共载于mPEG-羧甲基壳聚糖-大黄酸(CRmP)偶联物胶束中,制备(P4+PTX)/CRmP胶束。以MCF-7细胞为细胞模型,利用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪分析该胶束被MCF-7细胞摄取的情况;以H22皮下移植瘤小鼠为模型,在体和离体成像分析该胶束在体内的分布情况。结果 (P4+PTX)/CRmP胶束以完整的胶束形式被MCF-7细胞内吞摄入,分布于细胞质。(P2+PTX)/CRmP胶束在荷瘤小鼠的肝脏和肿瘤部位较多聚集,并于实验时间内在肿瘤部位不断累积。结论 该胶束以完整的胶束形式被肿瘤细胞摄取,在体内有一定的肝靶向性和肿瘤靶向性。