二苯乙烯苷对冈田酸诱导的AD细胞模型磷酸激酶MAPK1、JNK、 CK1、PKA的影响

目的:探讨二苯乙烯苷(TSG)对阿尔茨海默病细胞模型磷酸激酶MAPK1、JNK、CK1、PKA表达的影响。方法:采用冈田酸诱导NG108-15细胞制备阿尔茨海默病细胞模型,取对数生长期的NG108-15细胞,分为正常对照组、模型组和TSG低、中、高剂量组(50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L)。观察TSG作用于NG108-15细胞24h时的增殖情况和细胞形态学变化,采用蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测磷酸激酶PKA、CK1、MAPK1、JNK蛋白的表达。结果:与正常对照组比较,模型组中磷酸激酶PKA、CK1、MAPK1、JNK蛋白的表达显著升高(P0.01);与模型组比较,TSG高、中、低剂量组的磷酸激酶CK1、MAPK1、JNK、PKA表达显著降低(P0.01)。结论:二苯乙烯苷治疗阿尔茨海默病的机制可能与下调Tau蛋白相关的磷酸激酶PKA、JNK、MAPK1、CK1有关。     

二苯乙烯苷对APP/PS1/Tau三转基因小鼠痴呆模型GSK3β，PKA，PP2A的影响

目的 观察二苯乙烯苷（TSG）对淀粉样前体蛋白/早老蛋白-1/Tau（APP/PS1/Tau）三转基因小鼠阿尔茨海默病（AD）模型脑组织中糖原合成酶激酶3β（GSK3β）,环磷酸腺苷依赖的蛋白激酶（PKA）,磷酸丝氨酰/磷酸苏氨酰蛋白磷酸酶2A（PP2A）的表达影响。方法 8月龄APP/PS1/Tau三转基因小鼠45只,随机分为模型组、石杉碱甲组（石杉碱甲,0.15 mg·kg^-1）,TSG低、中、高剂量组（TSG,0.033,0.1,0.3 g·kg^-1）,每组9只。另取同龄C5B7L/6J小鼠9只为正常组。各组灌胃60 d相应药物后,采用苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠海马神经元的一般结构;免疫组化（IHC）检测各组小鼠脑组织PKA蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测GSK3β,PKA,PP2A mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测GSK3β,PP2A蛋白表达情况。结果 与正常组比较,模型组小鼠神经元细胞的凋亡水平显著升高,GSK3β,PKA蛋白及mRNA表达水平显著升高（P<0.01）,PP2A蛋白及mRNA表达水平显著下调（P<0.01）;与模型组比较,各给药组小鼠神经元细胞凋亡水平显著下调,GSK3β,PKA蛋白及mRNA表达水平明显下调（P<0.05,P<0.01）,PP2A蛋白及mRNA表达水平明显升高（P<0.05,P<0.01）。结论 TSG治疗AD的机制可能与降低GSK3β和PKA mRNA表达水平与蛋白表达水平,提高PP2A的mRNA表达水平与蛋白表达水平等机制有关。