胚脑组织提取液神经营养活性成分的分析

目的通过对胚脑组织的分离纯化，分析不同组份中的神经营养物质对神经细胞的营养作用。方法：采用超滤器超滤，透析袋透析以及SephadexS-200凝胶层析方法将胚胎脑组织提取液分离纯化。得到9种不同分子量组分的脑活性因子（BCF），分别加入原代培养的新生SD大鼠大脑皮层神经细胞悬液中，培养24h和15d后以MTT微量快速自动比色法检测细胞活性。结果发现培养24h后，有5种组分具有促进培养的大脑皮层神经元的存活的作用，与对照组相比有显著性差异（P〈0．05）；培养15d后，有4种组分具有促进培养的大脑皮层神经元的存活的作用，与对照组相比有显著性差异（P〈0．05）。结论胚脑组织提取液可促进培养的大脑皮层神经元的成活、成熟和分化。不同的组分蛋白对神经元的作用不一样。     

黄精多糖对新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡的影响

目的:探讨黄精多糖对体外培养的新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡的保护作用.方法:采用"Neurobasal加B27 Supplement"体外培养新生大鼠大脑皮层神经细胞,使用Hoechst 33342荧光染色、免疫细胞化学染色观察黄精多糖对缺氧复氧性神经细胞凋亡的保护作用.结果:缺氧前加入500μg/ml～1.5mg/ml的黄精多糖能显著地降低缺氧复氧培养诱导的神经细胞凋亡率,增加缺氧的神经细胞Bcl-2蛋白的表达,减少Bax蛋白的表达,提高Bcl-2/Bax比值.而缺氧12h后加入黄精多糖则无明显的抗凋亡作用.结论:缺氧前加入黄精多糖可以通过上调缺氧神经细胞Bcl-2表达、下调Bax表达和提高Bcl-2/Bax的比值以避免缺氧的神经细胞凋亡.     

肾素-血管紧张素-醛固酮系统基因多态性与大动脉粥样硬化性卒中的相关性:中国南方汉族人群研究

目的 研究肾素-血管紧张素-醛固酮系统血管紧张素原(angiotensinogen,AGT)基因M235T、血管紧张素Ⅱ1型受体(angiot ensinⅡtype 1 receptor,AGTR1)基因A1166C、醛固酮合酶( aldosterone synthase,CYP11B2)基因- 344C/T多态性与中国南方汉族人群大动脉粥样硬化性卒中(large-artery atherosclerosis,LAA)的相关性.方法 采用聚合酶链反应和基因测序技术对中国南方汉族LAA患者和正常对照者AGT基因M235T、ATGR1基因A1166C和CYP11B2基因- 344C/T多态性进行基因分型,并通过二分类logistic回归分析确定这3种基因多态性与LAA的相关性.结果 共纳入LAA患者107例和142名健康对照者.LAA组AGT基因235TT基因型(66.36％对50.70％,x2=6.122,P=0.047)和T等位基因(79.44％对70.07％,x2=5.581,P=0.018)频率显著高于对照组,AGTR1基因1166CC基因型(0％对0％,x2=1.494,P=0.222)和C等位基因(7.48％对4.93％,x2=1.399,P=0.237)频率与对照组无显著性差异,CYP11B2基因- 344CC基因型(9.35％对4.23％,x2=3.603,P=0.165)和C等位基因(27.10％对26.06％,x2=0.069,P=0.793)频率与对照组亦无显著性差异.二分类logistic回归分析显示,这3种基因多态性与单纯性LAA患病均无显著相关性.合并高血压的LAA患者AGT基因235TT基因型(68.00％对41.90％,x2=12.446,P=0.002)和T等位基因(79.33％对64.76％,x2=8.993,P=0.003)频率均显著高于血压正常对照组,logistic回归分析显示,暴露于TT基因型的优势比(odds ratio,OR)为2.153[ 95％可信区间(confidence interval,CI)0.789 ～5.872],T等位基因的OR值为2.089(95％ CI1.285 ～3.396).结论 AGT基因M235T多态性与南方汉族人群单纯性LAA无关,但可能与合并高血压的LAA患病风险相关;CYP11B2基因- 344C/T多态性和AGTR1基因A1166C多态性与南方汉族人群LAA发病无关.     

大鼠脑梗死后脑组织TNF-α、GFAP、NSE、BDNF、Nestin的表达和神经功能变化

目的探讨大鼠大脑中动脉缺血再灌注(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型不同时期梗死区周围组织胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)、巢蛋白(Nestin)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达变化及其意义。方法采用线栓法制作大鼠MCAO模型,并随机分为模型1、3、7、14、21d组。采用免疫组化观察大鼠模型脑组织GFAP、NSE、BDNF、Nestin、TNF-α的表达。采用改良神经功能缺损严重程度量表(modified neurological severity score,mNSS)对MCAO模型大鼠进行神经功能评价。结果大鼠神经功能评分随MCAO术后时间延长而逐渐下降(F=121.282,P<0.05)。GFAP阳性细胞数量随MCAO术后时间推移呈双向反应,术后1、3、7d组逐渐升高,而至14d组和21d组则又逐步降低,其中7d组高于1d组、3d组(P<0.05)。NSE累积光密度(integrated optical density,IOD)随时间延长逐渐上升,其中1d组小于3d组、7d组、14d组、21d组,21d组大于3d组、7d组(P<0.05)。BDNF IOD值呈双向表达,1d组、3d组、7d组、14d组表达逐步降低,21d表达升高,其中1d组和21d组大于14d组(P<0.05)。Nestin+细胞数量随时间的推移呈双向反应,1d组～7d组逐步升高,随后逐步降低,其中7d组高于1d组、3d组(P<0.05)。MCAO后TNF-α表达无统计学差异(P=0.12)。结论 MCAO在急性期(7d前)受损脑组织产生炎症及抗炎反应明显,急性期后(7d后)以神经生长因子产生并促进神经再生为主。     

调节性T细胞与肾移植急性排斥反应的关系

目的：探讨调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）水平变化与肾移植急性排斥反应之间的关系。方法选取54例肾移植受者（其中男26例,女28例）,根据术后12周内是否发生急性排斥反应分为急性排斥组和稳定组,于术前1-2d、术后1周、4周、8周、12周分别取外周静脉血样本,应用流式细胞仪检测外周血中Treg细胞水平。结果术前第1-2d,急性排斥组和稳定组的Treg细胞水平比较有明显差异（P〈0.05）。术后4周内两组Treg细胞水平均急剧下降。术后第4-8周,稳定组受者的Treg细胞水平开始回升,而急性排斥组继续下降。术后第8-12周,稳定组的Treg细胞水平明显回升,但排斥组则仍维持在较低水平,且此阶段两组Treg细胞水平的差别具有统计学意义（P〈0.05）。结论外周血中的Treg细胞水平的检测可协助预测肾移植急性排斥反应发生的高危群体,有助于术后急性排斥反应的早期诊断。     

人参皂甙Rb1、黄芪抗大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡研究

目的研究人参皂甙Rb1、黄芪对体外培养的新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡的保护机理。方法应用Neurobasal加B27 Supplement体外培养大鼠大脑皮层神经细胞;流式细胞仪检测神经细胞凋亡率;Hoechst33342荧光染色法检测神经细胞凋亡率。结果(1)流式细胞仪测定结果:正常对照组神经细胞凋亡率为0.78%,凋亡阳性组细胞凋亡率为31.61%,人参皂甙Rb1 1、2、3组细胞凋亡率分别为8.52%、4.86%、1.43%,黄芪注射液1、2、3组细胞凋亡率分别为16.06%、7.03%、1.22%;(2)神经细胞凋亡阳性组可见有明显的凋亡梯状条带,而正常对照组、人参皂甙Rb1 2组、黄芪注射液2组未见有明显的凋亡梯状条带;(3)Hoechst 33342荧光染色结果:正常对照组神经细胞凋亡率为(8.24±0.31)%,凋亡阳性组细胞凋亡率为(41.30±2.56)%;与凋亡阳性组比较,缺氧前加BDNF组细胞凋亡率为(21.06±0.72)%(P<0.05),缺氧后加BDNF组细胞凋亡率为(27.82±3.65)%(P<0.01);缺氧前加人参皂甙Rb1 3组细胞凋亡率为(12.57±1.61)%(P<0.05),缺氧后加人参皂甙Rb1 4组细胞凋亡率为(23.71±2.24)%(P<0.01);缺氧前加黄芪注射液1、2、3组细胞凋亡率分别为(20.28±1.00)%、(18.67±0.57)%、(13.84±0.79)%(P<0.05),缺氧后加黄芪注射液4组细胞凋亡率为(26.46±2.18)%(P<0.01)。结论人参皂甙Rb1在100μg/mL,黄芪在10~100 mg/mL的浓度范围內,具有抗缺氧的神经细胞凋亡的作用。     

黄精多糖对神经细胞的毒性及抗缺氧性坏死和凋亡作用研究

目的:探讨黄精多糖对体外培养的神经细胞的毒性反应及抗缺氧性坏死和凋亡的保护作用。方法:采用Neurobasal加B27Supplement体外无血清培养、缺氧复氧培养、免疫细胞化学染色、Trypanblue拒染法、Hoechst33342荧光染色法以及AnnexinV/PI双染流式细胞仪测定法观察对体外培养新生大鼠神经细胞的影响。结果:黄精多糖在6mg/ml以内对正常培养的神经细胞无明显毒性作用,在500μg/ml~1.5mg/ml范围内随着浓度增加抗缺氧复氧培养诱导的神经细胞坏死作用增大。黄精多糖在500μg/ml~1.5mg/ml范围内有抗缺氧复氧培养诱导的神经细胞凋亡作用,且随着浓度增加而增大。流式细胞仪测定显示500μg/ml~1.5mg/ml的黄精多糖有抗缺氧性神经细胞坏死作用,1mg/ml~1.5mg/ml范围内有抗缺氧性神经细胞凋亡作用。结论:黄精多糖有抗缺氧性神经细胞坏死和凋亡作用。     

急性白血病免疫分型研究

白血病免疫诊断分型较好地克服了ＦＡＢ分型的缺陷,可更准确地区分白血病细胞来源及分化阶段,从而为临床治疗提供指导［１,２］。我们使用一组单克隆抗体对２８例急性白血病（ＡＬ）进行免疫学分型,现将结果报告如下。１材料与方法１．１病例及标本２８例患者为江西省...     

家庭必备中药——蕲艾

随着人们保健意识的增强,人参、鹿茸、冬虫夏草等名贵中药材逐渐走进千家万户。您听说过中药"蕲艾"吗?你家备着了吗?你可能会说"我知道艾,还有叫蕲艾的吗?"。其实,蕲艾也叫芙蓉菊,它味苦微甘,性微温,比一般艾更香,入药治病疗效更好。据《蕲州志》载,"白艾蕲州出"。因