左归丸对初老大鼠循环EPCs及其促动员因素E_2、VEGF水平的影响

目的:观察补肾中药复方左归丸对初老雌性大鼠外周血循环内皮祖细胞EPCs及其促动员因素雌二醇E2、内皮细胞生长因子VEGF水平的影响。方法:采用自然衰老动物模型,予以左归丸灌胃治疗,观察卵巢组织形态学变化,计算卵巢、子宫的脏器指数,采用流式细胞术检测外周血单个核细胞中CD34+/CD133+/VEGFR2+三阳性EPCs的比例,ELISA法检测促EPCs动员因素E2、VEGF水平。结果:左归丸33 g/kg组可明显增加初老大鼠各级生长卵泡数、黄体数、血管数、血清E2、VEGF及EPCs水平。结论:左归丸可能通过上调E2、VEGF水平,动员EPCs,从而促进卵巢血管生成,改善初老大鼠卵巢功能。     

养精种玉汤对小鼠卵母细胞体外成熟及PDGFA和PDGFRα表达的影响

目的:探讨养精种玉汤对小鼠卵母细胞体外成熟及血小板源性生长因子A亚基(platelet-derived growth factor subunit A,PDGFA)和血小板源性生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptorα,PDGFRα)表达的影响。方法:SPF级雌性KM小鼠灌胃养精种玉汤后取血制备血清,养精种玉汤血清用于未成熟卵母细胞-颗粒细胞复合体培养。体外培养后,观察并计算小鼠卵母细胞成熟率、受精率和卵裂率,采用Western blot和real-time PCR分别检测卵母细胞PDGFA和PDGFRα的蛋白及mRNA表达情况。结果:养精种玉汤能明显提高卵母细胞体外成熟率和受精率(P<0.05或P<0.01),下调PDGFA和PDGFRα的蛋白和mRNA表达(P<0.01)。结论:养精种玉汤可能通过下调PDGFA和PDGFRα的表达促进小鼠卵母细胞体外成熟。     

左归丸对大鼠卵巢血管生成与胎盘生长因子、肝细胞生长因子及其受体关系的影响

目的?观察左归丸对初老大鼠卵巢中胎盘生长因子（PLGF）及酪氨酸激酶受体（Flt-1）和肝细胞生长因子（HGF）及间质上皮细胞转化因子（c-Met）受体表达的影响。方法?初老大鼠40只按随机数字表法分为模型组、结合雌激素组、左归丸11、33 g/kg剂量组，每组10只，另取10只4月龄大鼠作为正常对照组。正常对照组以蒸馏水20 g/kg灌胃；结合雌激素组灌胃65 μg/kg结合雌激素混悬液；左归丸11、33 g/kg组分别灌胃左归丸浸膏11、33 g/kg，1次/天，连续20天；观察大鼠生殖器官形态学变化，计算卵巢、子宫、阴道脏器指数，采用免疫组化法及Western Blot法检测大鼠卵巢 PLGF、Flt-1、HGF、c-Met 蛋白表达水平，原位杂交技术检测PLGF、Flt-1、HGF、c-Met mRNA表达水平，ELISA 法检测雌二醇（E2）、孕激素（P）、促卵泡生成激素（FSH）水平。结果?与正常对照组比较，模型组大鼠生长卵泡数、黄体数、血管数更少，闭锁卵泡数多，卵巢、子宫、阴道指数及E2、P含量明显降低，FSH含量明显升高，大鼠卵巢PLGF、Flt-1、HGF、c-Met蛋白及mRNA水平显著降低（P<0.01)；与模型组比较，左归丸11、33 g/kg组及结合雌激素组的生长卵泡数、黄体数、血管数增多，闭锁卵泡数明显减少，卵巢指数、子宫指数、阴道指数及E2、P水平明显升高，FSH水平明显降低，PLGF、Flt-1、HGF、c-Met蛋白及mRNA水平显著升高（P<0.05，P<0.01）；与结合雌激素组比较，左归丸33 g/kg组E2、P升高（P<0.05 ），左归丸11、33 g/kg组中生长卵泡数、黄体数、血管数更少，闭锁卵泡数更多，卵巢、子宫、阴道指数，FSH水平，PLGF、Flt-1、HGF、c-Met蛋白及mRNA水平比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；与左归丸11 g/kg组比较，左归丸33 g/kg组生长卵泡数、黄体数、血管数增多，锁卵泡数减少，卵巢、子宫、阴道指数及E2、P水平均有所上升，FSH水平下降，PLGF、Flt-1、HGF、c-Met蛋白及mRNA水平升高（P<0.05，P<0.01）。结论?左归丸可能通过上调 PLGF、Flt-1、HGF、c-Met 蛋白及mRNA水平，促进初老大鼠卵巢血管生成，进而改善大鼠卵巢功能，且高剂量优于低剂量。