滑膜细胞中蛋白酪氨酸激酶的克隆和鉴定

0　引言　在类风湿性关节炎 (Rheumatoid Arthritis,RA)中 ,关节内滑膜细胞 (Fibroblast- like synovial cells,FL S)的过度增生是造成关节软骨破坏和关节畸形的根本原因 ,所以研究滑膜细胞发生过度增殖的机理及找到控制其增殖的关键环节对于阻止 RA病人发生关节功能障碍具有重要意义 .目前关于滑膜细胞发生恶性增殖的机理尚不清楚 .蛋白酪氨酸激酶 (Protein tyrosine kinases,PTKs)是一大类介导细胞增殖分化和凋亡的细胞内信号分子 ,它们的活化将直接或间接导致细胞发生增殖或凋亡行为 .William s等研究发现 ,在 RA滑膜组织中蛋白酪…     

用差示PCR法筛选类风湿性关节炎滑膜细胞中的高表达基因

目的 筛选类风湿性关节炎（RA）滑膜细胞中的高表达基因,以探讨RA滑膜细胞发生肿瘤样增殖和侵蚀软骨的分子机理。方法 以骨性关节炎（osteoarthritis,OA)滑膜细胞作对照,采用差示PCR（differentially display PCR)方法,克隆RA滑膜细胞中高表达的cDNAs片段,经反向点杂交排除假阳性克隆后,将阳性克隆进行基因序列分析,结果共回收76仆差异条带,得到42个有插段的克隆,经反向点杂交后得到22个阳性克隆,对其中19个克隆进行基因序列分析表明,最长片段为501bp长,最短片段为145bp长,大部分在300bp,有13个克隆为已知基因,其中包括组织蛋白酶,其它6个克隆为未知序列,这些未知序列中除一个序列外酶,其它6个克隆为未知序列,这些未知序列中除一个序列外都为基因的非编码区,结论 差示PCR方法在筛选差异表达基因方面存在着很大的局限性,组织蛋白酶B可能与RA滑膜细胞的软骨侵蚀性有关。     

一种新的抑癌候选基因──NDR2在人类正常组织及相应肿瘤中的表达

为观察 NDR2基因在人类正常组织及相应肿瘤组织中的表达分布特点 ,收集人脑与胶质瘤、肺与肺癌、胃与胃癌、结肠与结肠癌组织标本 ,分别进行组织石蜡切片和总 RNA提取 ,应用免疫组化方法和 RT- PCR技术检测 NDR2蛋白质及 m RNA表达水平 ,并通过 DNA测序验证 PCR产物的正确性 .免疫组化结果表明 ,在上述各组织均有 NDR2蛋白不同程度的表达 .RT- PCR结果显示 ,在人脑和胶质瘤组织、肺与肺癌组织、胃与胃癌组织、结肠与结肠癌组织中均有 NDR2 m RNA表达 ,其表达水平以脑组织为最高 .NDR2 m RNA在正常脑和肺组织的表达水平分…     

结合酪氨酸蛋白激酶受体EphB2的功能短肽的筛选

目的 筛选能结合酪氨酸蛋白激酶受体ＥｐｈＢ２的功能短肽。方法 ＰＣＲ扩增ＥｐｈＢ２的配体结合区,定向克隆到融合表达质粒载体ｐＲＳＥＴ Ａ中,阳性克隆经ＩＰＴＧ诱导表达融合蛋白,并利用Ｎｉ－ＮＴＡ金属螯合亲和层析在变性条件下对表达的蛋白进行纯化,以此纯化蛋白为靶,将其包被于ＥＬＩＳＡ板上,进行３轮亲和筛选。结果 电泳分析表明：表达的融合蛋白主要以包涵体的形式存在,纯化蛋白质的纯度大于９５％。从噬菌体     

麻仁软胶囊预防急性心肌梗死后便秘临床疗效

急性心肌梗死后由于心肌缺血、缺氧,心肌细胞坏死,心室壁变薄,在不适当的心室压力下会造成梗死区的扩展、心室壁破裂及恶性心律失常等严重不良后果。有研究证实心肌梗死后并发便秘者病死率显著增加,因此心肌梗死后保持大便通畅是患者能否顺利渡过急性期的重要措施。应用麻仁软胶囊进行临床观察,以期为心肌梗死后便秘的预防提供有效方药。     

住院患儿静脉输液工具使用及留置现况的调查研究

目的调查住院患儿静脉输液时不同工具的使用情况以及静脉导管留置期间存在的问题,从而为临床提供指导。方法采用方便抽样的方法,于2018年7月24—31日,选择北京儿童医院医联体范围内49家医院的住院患儿静脉输液治疗情况进行调查。应用自行设计的儿童静脉输液情况横断面调查表及拍摄静脉输液工具的照片进行资料收集。采用SPSS 17.0软件进行统计学分析。结果调查期间49家医院共有住院患儿18316例,输液患儿14421例,输液比例为78.73%。静脉导管的应用情况为外周静脉短导管(留置针)占87.94%;静脉导管的连接以肝素帽连接为主,占64.23%,6398例(44.37%)患儿应用的输液工具为聚氯乙烯(PVC)材质且含邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP);在敷料选择方面以无菌透明敷料固定为主。导管留置期间存在问题主要是导管或输液接头内有回血发生率、导管夹夹闭位置不正确或未夹闭,导管脱出,且留置针存在的问题多于中心静脉导管,其中管道内有陈旧回血、输液接头内有回血发生率,外周留置针和中心导管比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论住院患儿静脉输液率较高,虽然静脉输液工具种类繁多,但对于儿童患者输液工具的选择以外周静脉留置针穿刺和肝素帽连接为主,导管维护方面尚存在不足。     

用改良消减法克隆类风湿性关节炎滑膜细胞中的高表达基因

0　引言　在类风湿性关节炎 (rheumatoid arthritis,RA)中 ,关节内滑膜细胞 (fibroblast- like synovial cells,FL S)的过度增生是造成关节软骨破坏和关节畸形的关键环节 ,为了研究滑膜细胞发生增殖的机制 ,我们采用赵忠良等人设计的改良消减杂交法[1 ] ,并以骨性关节炎 (osteoarthritis,OA)滑膜细胞为对照筛选 RA滑膜细胞中的高表达基因 .1　方法　将 RA滑膜细胞和 OA滑膜细胞分别设定为实验组和扣除组 ,用扣除组的 c DNAs杂交扣除掉实验组中与前者相同的 c DNAs,得到的就是目的产物 :实验组中高拷贝数的或独有的 c DNAs,也就是 …     

38例川崎病患儿的护理体会

目的:探讨38例川崎病患儿的护理方法.方法:回顾性总结38例川崎病住院患儿经过药物治疗及症状护理、用药护理、心理护理、健康宣教等措施并总结护理经验.结果:34例经精心治疗护理治愈出院,4例好转出院,出院后定期复查心脏彩超,4例冠状动脉轻度扩张患儿全部恢复正常.结论:规范药物治疗加上正确有效护理措施,并重视远期随访,才能获得最佳治疗效果.     

现代儿科住院患儿及家属对护理服务需求之分析

目的 分析儿科住院患儿及家属对护理服务需求及满意度的评分、探讨及影响之因素。方法 选取住院患儿及家属共100例,发放调查问卷,回收有效问卷94份进行分析。结果 患儿及家属需求广泛,渴望值太高,对医院的硬件设施需求比例较高。结论 现成儿科护理服务内容应增多,软硬件需要加强,以促进宝宝早日康复。     

72例支气管哮喘患者的护理观察

支气管哮喘是一种临床常见病,本文通过对72例支气管哮喘患者予以基础护理、氧疗护理、药物治疗护理、心理护理、饮食护理等综合护理措施,观察患者病情变化及临床康复情况,总结对该病的最佳护理经验,指导临床护理工作。