江苏名中医孙浩“乐膳散”梳理研究

本研究拟就江苏名医孙浩治疗小儿厌食效方“乐膳散”进行梳理。主要应用文献资料和访谈法,筛选出与“乐膳”相关的临床及实验文献,通过梳理研究阐明“乐膳散”是疗效卓著的治疗小儿厌食的验方、经方。     

抗氧化反应元件调控的EGFP在HepG2细胞中的表达

目的:采用增强绿色荧光蛋白(EGFP)作为报告基因,用HepG2细胞构建可敏感、快速、方便地筛选出Ⅱ相酶诱导剂的评价体系。方法:通过分子生物学技术,将TK启动子克隆到pEGFP-N1上,再将人工合成的抗氧化反应元件(ARE)序列插入TK启动子上游,并转染入HepG2细胞株,经G418筛选,挑取单克隆扩大培养。结果:重组载体经酶切和PCR鉴定,发现有TK和ARE-TK基因特异条带。DNA测序发现ARE-TK-EGFP框架正确。转染细胞在荧光显微镜下可见大量的绿色荧光颗粒,该细胞经不同浓度已知Ⅱ相酶诱导剂tBHQ作用后,与EGFP表达量有剂量效应关系。结论:ARE调控的EGFP在HepG2细胞中成功表达。为进一步高通量筛选Ⅱ相酶诱导剂奠定了基础。