温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜基因表达谱的影响

目的 研究中药温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠滑膜基因表达谱的影响,探讨其治疗CIA的作用机制。方法 选用健康雄性Wistar大鼠40只,采用大鼠尾根部注射牛Ⅱ型胶原乳剂的方法建立CIA模型。选取造模成功的16只大鼠随机分为模型组和中药组,每组8只。中药组给予温化蠲痹方22.9 g/（kg·d）灌胃,模型组以生理盐水灌胃,均每天1次,连续30天。给药结束后,提取两组大鼠滑膜总RNA,运用Illumina基因表达谱芯片分析每个样本基因变化。结果 与模型组比较,温化蠲痹方干预后大鼠滑膜差异表达基因有222条,其中上调基因76条,如防御素3b（RatNP-3b）等;下调基因146条,如血管生成素样蛋白2(Angptl 2)、黏蛋白1（Muc1）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）等。差异表达基因主要涉及细胞凋亡、血管生成素、防御素基因、细胞因子、信号转导、癌基因等。结论 中药温化蠲痹方可能通过对多基因表达进行调控,从而发挥多靶点治疗CIA的作用。     

抗环瓜氨酸肽抗体阳性和阴性类风湿关节炎患者外周血单个核细胞基因表达谱差异的研究

目的 运用基因芯片技术研究抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体阳性和阴性类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)基因表达谱差异,探索差异存在的基因表达基础.方法 提取各5例抗CCP抗体阳性、阴性RA患者、健康人PBMC中总RNA,运用Ⅲumina基因表达谱芯片分析每个样本47231个基因变化.结果 与健康对照组相比,抗CCP抗体阳性和阴性RA患者有88个差异表达基因,其中上调表达基因51个,下调表达基因37个,这些差异表达基因主要涉及细胞因子、细胞凋亡、细胞周期、细胞因子、信号转导、趋化因子等.抗CCP抗体阳性和阴性RA患者之间有20个基因表达差异有统计学意义,其中上调表达基因9个,下调表达基因11个,这些差异表达基因主要涉及传递蛋白、转录调控、信号转导、代谢、细胞周期等.结论 抗CCP抗体阳性和阴性RA患者之间存在差异表达基因,筛选到的差异基因如杀伤细胞免疫球蛋白受体基因、干扰素诱导基因、几丁质酶家族成员CHI3L1等为进一步研究RA发病机制及发现新治疗靶标提供重要线索.     

汉族妇女妊娠期糖尿病的基因相关性研究

目的:探讨SLC30A8和CDKAL1基因三个位点rs13266634、rs7756992、rs7754840基因多态性与衢州汉族妇女妊娠期糖尿病(GDM)的相关性.方法:从160例糖尿病妊娠妇女和160例健康孕妇外周血中提取基因组DNA,采用PCR-RFLP法对SLC30A8和CDKAL1基因三个位点rs13266634、rs7756992、rs7754840进行基因分型,明确这些位点与妊娠期糖尿病的关系.结果:SLC30A8基因rs13266634位点KK型和EK型在GDM组的基因频率分别为71.6％和20.0％,高于对照组(59.2％,14.3％),两组相比有统计学意义(P＜0.05),E、K基因频率在两组间分布无统计学意义.CDKAL1基因rs7756992位点在两组人群中的基因频率和等位基因频率无统计学差异(P＞0.05)；rs7754840位点G/A型基因型频率在GDM组为31.7％,对照组为8.2％,两组间有统计学意义(P＜0.05),A基因在两组的基因频率分别为16.7％和4.1％,两组间有统计学意义(P＜0.05).结论:SLC30A8基因rs13266634位点和CDKAL1基因rs7754840位点基因多态性可能与GDM发生有相关性.     

腹膜间皮瘤组织体细胞突变的分析

［摘要］目的：探讨临床标本全基因组测序中体细胞突变测定技术的应用。方法：对1例手术切除的腹膜间皮瘤肿瘤组织和其癌旁组织进行了第二代全基因组测序,并将结果与人类基因组数据库的参考序列进行比对。结果：发现639 717个肿瘤组织和癌旁组织细胞共有的单核苷酸变异（single nucleotide variation,SNV）,20 302个肿瘤组织独有的SNV和2 185个癌旁组织独有的SNV,还有223个位点,在肿瘤组织和癌旁组织以及人类基因组参考序列三者之间均不相同。结论：仅仅对个体2种组织样本和人类基因组参考序列比对,尚不能准确定位病变细胞的所有体细胞突变。因此,建立个体出生时的全基因组序列或预留出生时的DNA样本有助于排除正常组织体细胞突变的干扰。     

胶原诱导性关节炎大鼠滑膜基因表达谱特征研究

目的:运用基因芯片技术研究胶原诱导性关节炎(collagen-inducing arthritis,CIA)大鼠滑膜基因表达谱特征,探讨CIA相关致病基因。方法:选用健康雄性Wistar大鼠40只,随机分为造模组、正常对照组(n=8,简称正常组),造模组采用牛Ⅱ型胶原乳剂于大鼠尾根部注射,建立CIA模型。在造模成功大鼠中随机选取8只作为模型组(n=8)。于造模成功后30天,提取各大鼠滑膜总RNA,运用Illumina基因表达谱芯片分析每个样本基因变化。结果:正常组与模型组大鼠滑膜差异表达基因有271条,其中上调基因131条,下调基因140条。差异表达基因主要涉及细胞凋亡、基质金属蛋白酶、癌基因、热休克蛋白、骨桥蛋白、细胞周期、代谢、信号传导通路、趋化因子、黏附分子等。结论:CIA是一涉及多基因表达异常的自身免疫性疾病,筛选到的差异基因如上调表达基因Map3k11、Mmp8、OPN5、Rgs5、Hsph1、Ccl20、Robo4、Hyal4及下调表达基因Cabp1等,有利于阐释RA分子机制,提供RA防治新靶点。     

ICU院感脓毒症人群病原菌检测、耐药性及预后分析

目的:通过对ICU院感脓毒症患者病原菌检测、耐药性及预后分析,为临床合理用药和控制院感提供科学依据。方法:回顾性分析206例ICU院感脓毒症患者的临床资料。结果:感染者以有基础性疾病的老年人、长期用药、病情危重、接受侵入性检查与治疗的患者居多;感染部位以呼吸道、泌尿道、导管相关性疾病感染为最多见;共分离病原菌394株,常见病原菌主要是G-杆菌190株(铜绿假单胞菌为主),其次是G+球菌118株(金黄色葡萄球菌为主)、真菌86株(白色假丝酵母菌为主);常见病原菌耐药性较高;预后主要影响因素是重视并加强临床护理及心血管、呼吸、泌尿、血液、消化、神经等多系统、多脏器功能障碍等。经临床综合治疗,采取有效预防和护理措施,改善预后。结论:由于ICU院感脓毒症患者常见病原菌耐药性较高,应根据药敏试验结果合理用药;有效预防和护理措施及心血管、呼吸、泌尿、血液、消化、神经等多系统、多脏器功能障碍等是影响其预后主要因素,临床应积极防治并加强护理,改善预后。     

联合检测血清PCT、CRP水平变化对脓毒症患者的诊断价值

目的:观察血清降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)联合检测对脓毒症患者的诊断价值,为临床合理用药和控制院感提供科学依据。方法:采用回顾性分析方法,选择104例ICU患者,根据脓毒症诊断标准分轻度脓毒症组45例,严重脓毒症组29例,非脓毒症组30例,另选40例健康人群为对照组;采用免疫层析法检测PCT水平;7060型全自动生化分析仪检测CRP水平,观察各指标诊断脓毒症患者的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Youden指数;绘制ROC曲线并加以分析,明确检测最佳阈值。结果:轻度脓毒症组、严重脓毒症组血清PCT、CRP水平较对照组、非脓毒症组明显升高;非脓毒症组血清CRP水平较对照组明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01);PCT指标敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Youden指数与ROC曲线下的面积值均好于CRP;联合检测血清PCT、CRP的敏感性及准确率好于各指标独立诊断。结论:血清PCT指标对脓毒症患者有较好的临床诊断价值,联合检测血清PCT、CRP水平变化对脓毒症患者可以提高其诊断的敏感性及准确率。