兔阴茎海绵体平滑肌细胞的原代培养和鉴定

用酶消化法分离兔阴茎海绵体平滑肌细胞（CCSM），筛选适合的酶作用条件进行原代细胞培养；用免疫细胞化学方法鉴定细胞纯度。结果采用0．05％胶原酶I预消化1h，再用0．5％酶液消化3h的方法，可以快速有效地分离CCSM细胞。免疫细胞化学鉴定所分离的细胞为平滑肌细胞，纯度达98％。证实原代细胞培养方法可以简便、快速、稳定、可靠地获得大量CCSM细胞，可为勃起功能障碍（ED）治疗药物的筛选和药效学检测提供较好的细胞模型。     

靶向血管生成的抗肿瘤海洋药物的研制策略

实体瘤的生长、发育以及转移都依赖于新生血管生成提供营养,阻断肿瘤的血管生成成为新型抗肿瘤药物研究的重要方向.针对血管生成的不同生物学过程发展新型的血管生成抑制剂为肿瘤的治疗形成了新的研究领域.迄今为止,多种以血管生成为靶点的抗肿瘤药物已经在国内外上市.海洋生物是新型药物的重要分子库,由海洋生物中发现的多种血管生成抑制剂显示了独特的分子结构与作用机制.现对发现的数种海洋来源的血管生成抑制剂的作用机制进行论述,提出了研发新型抗肿瘤药物的发展战略.     

中华猕猴桃根的化学成分研究

目的：研究中华猕猴桃Actinidia chinensis根的化学成分。方法：中华猕猴桃根的95％乙醇提取物,依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取,应用多种色谱技术对醋酸乙酯部分进行分离纯化,通过波谱数据分析(MS,IR,¹H-NMR,¹³C-NMR)进行结构鉴定。结果：从醋酸乙酯部分分离得到7个化合物,经鉴定为2α-羟基齐墩果酸(1),2α-羟基乌苏酸(2),蔷薇酸(3),23-羟基乌苏酸(4),3β-O-乙酰乌苏果酸(5),麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮(6),β-谷甾醇(7)。结论：所有化合物均为首次从该植物中分离鉴定。     

抗癌抗生素C1027活性片段的克隆及其在变铅青链霉菌中的表达

C1027是由放线菌Streptomyces globisporus C1027产生的大分子多肽类抗肿瘤抗生素，其分子由一个烯二炔发色团及一个蛋白以非共价键结合而成．C1027通过抑制DNA合成对肿瘤细胞发挥强烈的抑制作用，是迄今已报道的活性最强的多肽类抗肿瘤抗生素。对C10271的分子构成与抗肿瘤活性关系的研究表明，     

猪肝铜锌超氧物歧化酶的研究

由猪肝中分离得到铜锌超氧物歧化酶,在分子量、铜、锌含量、氨基酸组成等方面与其它来源一致。该酶对角叉菜胶致小鼠足跖肿胀有明显的抑制作用,并能显著提高经~(60)Coγ射线照射小鼠的存活率。     

真菌PHF-9化学成分及其抗肿瘤活性研究

目的:分离鉴定土壤来源的真菌菌株PHF-9中的抗肿瘤活性成分并研究其抗肿瘤机制。方法:采用多种色谱方法对乙酸乙酯提取物中的化学成分进行分离,并通过波谱数据鉴定化合物结构;通过MTT法测定细胞增殖抑制率,Hoechst 33342染色法观察细胞形态变化,Annexin V/PI双染法分析细胞凋亡。结果:从菌株PHF-9的发酵产物中分离得到4个化合物,包括一个吲哚生物碱类新天然产物,命名为Exopi-siod 1。MTT检测显示Exopisiod 1对A-549,Hela,PANC-28和BEL-7402肿瘤细胞株的IC50分别为76.3,77.2,107.5和89.5μmol·L-1。Exopisiod 1作用后的A549细胞在荧光显微镜下可见凋亡相关的形态学变化;Annexin V/PI双染法显示细胞凋亡百分率呈剂量依赖关系。结论:土壤来源的外瓶霉属真菌可以代谢具有抗肿瘤活性的吲哚生物碱,初步推断其通过诱导细胞凋亡抑制肿瘤细胞生长。     

RSK4基因表达及其对U87细胞增殖的影响

背景与目的:RSK4是非生长因子依赖的丝/苏氨酸蛋白激酶,参与多种信号通路。本研究构建了人RSK4基因的真核表达系统,研究其对胶质瘤的调控作用,为阐明RSK4功能奠定基础。方法:采用RT-PCR法从人正常乳腺上皮细胞MCF-10A细胞中扩增获得RSK4基因的编码区,定向克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-)上,构建真核表达载体pcDNA3.1(-)/RSK4。脂质体法介导pcDNA3.1(-)/RSK4质粒转染至U87细胞中,RT-PCR和Western blot检测表达情况。采用MTT法检测RSK4基因对U87细胞生长的影响。结果:转染pcDNA3.1(-)/RSK4组U87细胞增殖明显被抑制(P<0.05)。结论:RSK4可以抑制胶质瘤细胞的增殖。     

力达霉素通过下调VEGF表达抑制斑马鱼胚胎血管生成

本研究采用斑马鱼胚胎模型研究力达霉素在整体动物水平对血管生成的影响。力达霉素处理胚胎后, 利用形态学观察、血管染色法、转基因斑马鱼检测其对胚胎血管生成影响, 以荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测VEGF基因的表达情况。结果显示: 力达霉素处理后, 胚胎出现心包水肿、血流速度减缓等症状; 血管生长率降低, 肠下静脉生成受到抑制。荧光定量PCR和蛋白免疫印迹检测表明, 力达霉素对胚胎的VEGF mRNA表达水平没有影响, 但VEGF蛋白的表达受到显著抑制。研究结果表明, 力达霉素可以下调VEGF蛋白表达, 从而抑制斑马鱼胚胎血管生成。     

猪肝铜锌超氧物歧化酶的研究

本文研究了猪肝铜锌超氧物歧化酶(Cu-Zn·SOD)的提纯方法、理化性质及药理作用。猪肝经匀浆、加热提取、丙酮分级、     

海洋中度嗜盐菌whb36的分离、鉴定和生物活性研究

目的从海洋中度嗜盐细菌中发现具有抗菌和抗肿瘤活性的物质。方法从盐场的底泥和海水中分离嗜盐细菌,采用抗菌模型和细胞毒模型进行活性筛选,对活性较强的菌株whb36进行形态学和生理生化特性研究,测定其16S rRNA序列并通过同源性比对进行系统发育分析。结果菌株whb36为中度嗜盐菌;whb36与Halomonas ventosae在形态和生理生化特征方面最接近,16S rRNA序列相似性为99%。whb36的粗提物具有较强的抗菌和抗肿瘤活性。结论中度嗜盐细菌whb36可以提供新的活性物质。