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目的 构建含有表皮生长因子受体Ⅲ型变异体(EGFRvⅢ)的增强型绿色荧光蛋白表达载体,转染到舌癌Tca8113细胞中,建立稳定表达的细胞系,为研究EGFRvⅢ在舌癌细胞传导通路中的作用奠定实验基础.方法 以从人乳腺癌细胞中提取的总RNA为模板经反转录为cDNA,用RT-PCR的两步法扩增得出含有HindⅢ和Xhol的EGFRvmⅢ目的 基因连接到绿色荧光蛋白pEGFP-N1载体上.将重组质粒通过脂质体转染的方法转染到舌癌细胞中观察,以G418筛选表达目的 基因的单细胞系并通过RT-PCR的方法进行目的 基因的表达水平检测.结果 经过PCR引物扩增得到1218bp基因片段,生物公司测序正确,重组质粒pEGFP-N1-EGFRvⅢ经双酶切分析检测无误;质粒转染舌癌细胞可见荧光信号表达,经过G418筛选后成功获得细胞克隆株.结论 成功构建pEGFP-N1-EGFRvⅢ表达载体,并能够在舌癌细胞中高度表达,为研究EGFRvⅢ在舌癌MAPK传导通路中的作用建立细胞模型奠定了实验基础. 相似文献
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为探讨自动痔疮套扎术(RPH)联合扩压硬化剂注射治疗混合痔的疗效,将212例混合痔患者分为两组,治疗组107例采用RPH联合扩压硬化剂注射治疗,对照组105例采用单纯扩压硬化剂注射治疗,随访观察并评价其疗效。结果显示,治疗组与对照组治愈率分别为99.1%和94.2%,治疗组疗效明显高于对照组(P〈0.05)。结果表明,RPH联合扩压硬化剂注射治疗混合痔疗效明显高于单纯扩压硬化剂注射治疗。 相似文献
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