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目的 制备肝癌细胞Hep1-6外泌体并对化疗药物阿霉素(DOX)进行包载,以期实现对肿瘤细胞更高的靶向活性与杀伤作用。方法 采用梯度离心法对肿瘤细胞Hep1-6来源的外泌体进行制备分离;采用透射电镜技术、表面标记蛋白表征以及纳米颗粒追踪分析技术对外泌体的形态、特征蛋白、粒径分布和浓度进行表征;采用电穿孔方法实现外泌体对DOX的有效包载,制备包载阿霉素外泌体(EXODOX)。采用CCK-8法检测EXODOX与DOX(0.5、1、2、3、5、10 μg·mL-1)体外对 Hep1-6细胞增殖的影响,采用激光共聚焦显微镜观察体外 Hep1-6细胞对 EXODOX与 DOX(1 μg·mL-1)的靶向摄取作用。结果 所制备的外泌体具有形态良好 、 粒度均一的特性且具备外泌体特征膜蛋白 CD63、 CD81、 肿瘤易感基因101(TSG101)的表达;在电穿孔条件为150 V和75 μF下外泌体对DOX具备良好的包载特性;相比于单独给药DOX,在同等质量浓度下 EXODOX对 Hep1-6细胞增殖抑制作用显著增强(P<0.05、0.01),同时肿瘤细胞对 EXODOX的摄取更具靶向性。结论 制备的EXODOX较DOX具有更强的体外细胞毒活性,EXODOX表现出对肿瘤细胞更高的靶向特性。 相似文献
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目的 基于网络药理学整合体内实验对比四物汤中4种单味药(川芎Chuanxiong Rhizoma、白芍Paeoniae Radix Alba、当归Angelicae Sinensis Radix、熟地黄Rehmanniae Radix Praeparata)治疗胆汁淤积性肝损伤(cholestatic liver injury,CLI)的药效差异,并探讨各单味药的作用机制。方法 利用TCMSP数据库获取川芎、白芍、当归、熟地黄的主要活性成分及作用靶点,通过Gene Cards数据库获取CLI靶点,使用Cyctoscape 3.10.1软件分析并构建“单味药-活性成分-作用靶点”网络,借助在线网站获取各单味药与CLI之间的交集靶点,并绘制韦恩图。将靶点基因导入DAVID数据库进行基因富集分析。构建胆总管结扎(bile duct ligation,BDL)动物模型,给予各单味药水提物后,检测血清肝功能相关生化指标,并对肝组织进行病理染色对比药效作用。同时结合qRT-PCR检测CLI相关靶点的基因表达。结果 网络药理学结果显示,四物汤中川芎、白芍、当归、熟地黄与CLI之间均存在3个交集靶点[... 相似文献
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肝纤维化表现为炎症细胞浸润、肝星状细胞激活、细胞外基质沉积及瘢痕组织形成,是各类慢性肝病向各类终末期肝病转变的关键病理过程。近年来,中医药被证明在防治肝纤维化方面成果突出,中医学对肝纤维化具有极富特色的诊疗理念,认为肝纤维化基本证候病机中“虚损”为其根本,并集中表现为气虚络瘀、肝郁脾虚和肝肾阴虚等证型,通过对以上3种常见肝纤维化证型总结相应常用效验方剂的临床及药理学研究进展,归纳其调控肝星状细胞命运、调节胆汁酸代谢、促进细胞外基质降解、抑制肝窦内皮血管化等潜在作用机制,为临床防治肝纤维化提供新思路。 相似文献
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