蒙药蜀葵花HPLC指纹图谱及rbcL序列分子鉴定研究

目的 建立蜀葵花HPLC指纹图谱及rbcL序列DNA条形码（barcoding）分子鉴定方法。方法 色谱柱为Welchrom Column C₁₈（300 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相、梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，柱温35℃，检测波长365 nm，进样量10 μL；采用"中药色谱指纹图谱相似度评价软件（2012版A版）"进行相似度评价；同时以rbcL为引物，对11份蜀葵花进行PCR扩增并测定序列，运用DNDMAN和MEGA7.0及CodonCode Aligner17.0软件进行分析。结果 建立了11份蜀葵花的HPLC指纹图谱，得到21个共有峰，相似度均大于0.88，并标定了金丝桃苷（7号峰）、槲皮素（15号峰）、芹菜素（19号峰）、山柰素（20号峰）4个成分；rbcL序列扩增和测序成功率100%，测序到的长度500 bp，GC含量为44.10%~44.40%，种内遗传距离0~0.004 0，平均遗传距离0.001 4，变异位点数10个，相似度为99.00%。结论 建立的HPLC指纹图谱方法稳定可靠、rbcL序列DNA barcoding分子鉴定方法重复性好，可用于蜀葵花的质量控制。