瞿麦正丁醇部位抗肿瘤活性成分筛选

目的:研究瞿麦(Dianthi herba)正丁醇部位中具有抗肿瘤活性的化合物。方法:用乙醇提取瞿麦全草中的化学成分,正丁醇萃取后,在用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Hep G2细胞活性的筛选下,用硅胶凝胶柱色谱以及半制备HPLC分离纯化,得到对肿瘤细胞株的细胞毒活性成分VI3-15-1-1,并通过LC-MS、1H、13C NMR,结合二维核磁图谱,推测出该活性成分为积雪草酸(Asiatic acid,2α,3β,23α-三羟基-熊果-12-烯-28-酸)。结果:通过MTT法分别测定瞿麦正丁醇部位硅胶柱色谱分离得到的8个组分,其中第6个组分(30-33组分)对Hep G2细胞增殖抑制率最高,为28.69%;进一步分离第6个组分得到的VI3-15组分对Hep G2细胞增殖抑制率为91.14%。从VI3-15分离得到的化学成分为积雪草酸,其对Hep G2、SSMC-7721、SK-HEP-1及Bel-7402细胞株的半数抑制率(IC50)分别为55.4、48.9、55.3、58.8μg·m L-1,在体外具有较好地抑制肿瘤细胞增殖的活性。结论:确定瞿麦正丁醇部位抗肿瘤活性成分为五环三萜类化合物积雪草酸。     

瞿麦石油醚萃取物抗肿瘤活性组分筛选及其成分分析

目的:诠释瞿麦石油醚萃取物抗肿瘤的药效物质基础。方法:采用色谱法将瞿麦石油醚萃取物分为8个组分,通过MTT比色法筛选各组分抗肿瘤生物活性,并采用气象色谱-质谱联用(GC-MS)法分析抗肿瘤活性较好的4个组分的化学成分;选择其中2个组分进一步分离和活性筛选,通过GC-MS分析抗肿瘤活性较好的4个二级组分的化学成分。结果:瞿麦石油醚萃取物分离的各组分均显示不同程度抗肿瘤生物活性;较强活性组分的成分鉴定结果表明,主要化学成分为脂肪酸酯化衍生物和苯酚类化合物。结论:瞿麦石油醚萃取物抗肿瘤药效物质基础主要为脂肪酸酯化衍生物和苯酚类化合物。     

鳖甲活性多肽的提取及膜分离纯化工艺优选

目的： 优选鳖甲活性多肽的提取工艺及膜分离工艺。 方法： 以多肽提取量和浸膏得率为指标,通过正交试验考察料液比、提取时间、提取次数对鳖甲多肽提取工艺的影响;以膜渗透通量或膜效能为指标,运用单因素试验优选鳖甲活性多肽的膜分离工艺。 结果： 最佳提取工艺为醋鳖甲粉碎过24目筛,加6倍量水提取3次,每次3 h;多肽提取量达2.442 g,浸膏得率11.71%。膜分离纯化条件为鳖甲多肽质量分数6%,截留相对分子质量20,8 kD的超滤膜操作压力分别为0.18~0.21,0.8 MPa;蛋白质截留率83.67%,相对分子质量<8 000的鳖甲多肽纯度达57.62%。 结论： 膜分离技术可用于鳖甲活性多肽的制备。     

苍术炒焦后氯仿部位增量成分初步研究

目的观察苍术炒焦后氯仿部位的增量成分,并初步建立其含量测定方法。方法对苍术炒焦前后高效液相色谱法(HPLC)色谱图进行比较,确定苍术炒焦后氯仿部位增量明显的色谱峰;进一步分离纯化、鉴定增量化合物结构;采用高效液相色谱法测定确定的增量成分含量,色谱条件为Agilent C_(18)(5 m,4.6mm×250mm)色谱柱,流动相为乙腈-水(5∶95),检测波长284nm,柱温25℃,流速1.0mL/min,进样量为10L。结果苍术炒焦后5-羟甲基糠醛等7个成分含量显著增加,主要增量成分之一确定为5-羟甲基糠醛(5-HMF);测定道地产区6个不同批次的苍术及焦苍术片中5-HMF的平均含量分别为0.0057%,0.105%,其结果表明苍术炒焦后5-HMF的含量是生苍术的15倍以上。结论苍术炒焦后增量成分中5-HMF增加极显著,该结果为阐释苍术炒焦后药效变化提供了物质基础支撑。     

子芩与枯芩UPLC指纹图谱建立及抗炎作用的谱效关系研究

目的：建立子芩和枯芩的指纹图谱,探究子芩与枯芩化学成分差异及与抗炎药效之间的关联性,明确抗炎作用的物质基础。方法：采用UPLC法建立子芩和枯芩指纹图谱,以LPS刺激THP-1巨噬细胞释放的炎症因子IL-1β、TNF-α水平为药效指标,采用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)研究子芩与枯芩差异化学成分及与抗炎作用的谱效关系,筛选子芩与枯芩抗炎作用的物质基础。结果：子芩和枯芩样品UPLC指纹图谱共有峰有17个,OPLS-DA结果发现二者差异化学成分有4个,分别为黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素及汉黄芩素,谱效关系结果发现子芩和枯芩抗炎作用的主要相关成分有2个,分别为黄芩苷、黄芩素。结论：该研究建立的子芩和枯芩指纹图谱方法简单可行,通过谱效关系分析筛选出抗炎活性的重要成分,为明确子芩和枯芩抗炎作用提供物质基础。     

基于药理指标评价子芩与枯芩对大肠湿热证的作用差异

目的:比较子芩与枯芩对大鼠大肠湿热证的药效差异,通过现代药理实验验证将黄芩分为子芩与枯芩分别入药的科学性。方法:将大鼠随机分为空白组,模型组,子芩低、高剂量组(0.9,3.6 g·kg~(-1)),黄芩组(0.9 g·kg~(-1)),枯芩低、高剂量组(0.9,3.6 g·kg~(-1)),复方黄连素片组(0.045 g·kg~(-1)),每组8只。选择大肠湿热证大鼠模型,选择体温、胸腺指数、脾脏指数、回肠病理切片、结肠病理切片、炎症因子以及分泌型免疫球蛋白(SIg)A含量为指标评价子芩与枯芩对大肠湿热证的治疗作用,综合评价子芩与枯芩的药效差异。采用偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)对2种饮片抗大肠湿热证药理指标进行统计学分析。结果:不同剂量的子芩和枯芩均能降低大肠湿热证模型大鼠的体温、胸腺指数和脾脏指数、血清炎症因子白细胞介素(IL)-2,IL-6,IL-1β和肠黏膜SIg A含量,且大部分具有显著性差异(P0.05,P0.01);与等剂量枯芩组比较,相应剂量子芩组效果更好,且大部分具有显著性差异(P0.05,P0.01)。PLS-DA结果显示子芩与枯芩各聚类于一侧。结论:子芩与枯芩对大肠湿热证均具有治疗作用,但两者的作用强度有明显差异,子芩优于枯芩,验证了古方中用子芩专泻大小肠下焦之火的科学性。