鱼鳞胶原蛋白对小鼠皮肤伤口愈合的影响

目的：探索鱼鳞胶原蛋白对糖尿病小鼠皮肤伤口愈合的影响。方法通过水提法提取鱼鳞胶原蛋白,利用链脲佐菌素建立小鼠糖尿病模型,实时定量荧光PCR （ real time PCR ）检测糖尿病小鼠伤口处血管生长因子（ vascular endothelial growth factor,VEGF）、表皮细胞生长因子（Epidermal Growth Factor,EGF）mRNA表达,并检测伤口处超氧化物歧化酶（Superox-ide Dismutase,SOD）、过氧化氢酶（ catalase,CAT）含量。结果鱼鳞胶原蛋白0.5 mg组及1 mg组可促进糖尿病小鼠伤口愈合。治疗第15天,鱼鳞胶原蛋白1 mg组愈合率可达94.14％;鱼鳞胶原蛋白1 mg组可明显促进伤口处VEGF、EGF mRNA表达,并且可增加伤口处SOD、CAT含量。结论水提法提取的鱼鳞胶原蛋白具有良好的相容性,可促进糖尿病小鼠伤口愈合,具有潜在的临床应用价值。     

小儿哮喘发作期中医证候与呼出气一氧化氮等炎性标志物的相关性分析

目的 通过研究分析哮喘发作期患儿不同证候类型与呼出气一氧化氮(FeNO)及外周血嗜酸性粒细胞(EOS)绝对值、白细胞计数(WBC)水平的相关性,探索小儿哮喘发作期辨证分型客观化参考依据.方法 采用横断面调查研究设计,选择北京中医药大学东直门医院儿科门诊哮喘急性发作期轻、中度患儿,进行中医辨证并测定患儿FeNO及外周血E...     

加味芎蝎散对咳嗽变异性哮喘大鼠气道平滑肌组织表型转化的干预作用研究

目的观察咳嗽变异性哮喘大鼠气道平滑肌细胞表型转化及加味芎蝎散的干预作用。方法将雄性SD大鼠40只随机分为空白对照组、模型组、加味芎蝎散组(中药组)、孟鲁司特钠组,每组10只,除正常对照组外,其余组采用腹腔注射卵蛋白法制备咳嗽变异性哮喘大鼠模型。各组造模后予相应药液灌胃。给药4周后,取肺组织HE染色,光镜下观察气道结构改变,Masson染色测量气道基底膜下纤维化率、标准化气道平滑肌厚度及支气管壁厚度,电子显微镜观察气道平滑肌组织超微结构改变;免疫组化法检测气道平滑肌组织中收缩和分泌蛋白表达。结果与空白对照组比较,模型组气道平滑肌层增生、肥厚,气道平滑肌细胞内肌丝减少,粗面内质网及核糖体等分泌颗粒增多,平滑肌α肌动蛋白和钙调蛋白表达降低。与模型组相比,中药组有明显的缓解作用。结论咳嗽变异性哮喘大鼠气道平滑肌可由"收缩表型"向"分泌表型"转化,而加味芎蝎散能明显减低CVA气道平滑肌增生,抑制气道重塑,其机制可能与逆转气道平滑肌细胞表型转化有关。     

基于网络药理学及分子对接探究定喘汤治疗儿童咳嗽变异性哮喘的作用机制

[摘要]目的：通过网络药理学和分子对接探究定喘汤治疗儿童咳嗽变异性哮喘（cough variant asthma,CVA）的作用机制。方法：基于文献研究和中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）数据库挖掘定喘汤中各个药物的活性成分,并利用TCMSP数据库预测活性成分作用靶点,借用Uniprot数据库校正靶点蛋白对应基因;通过GeneCards、OMIM数据库获得咳嗽变异性哮喘的疾病靶点。取药物靶点和疾病靶点的交集靶点并制作韦恩图,运用Cytoscape 3.7.2软件制作“中药-活性成分-靶点”网络并进行网络拓扑分析,利用String数据库构建蛋白互作网络并筛选出核心靶点。基于DAVID对交集靶点进行GO生物过程分析和KEGG通路富集分析;通过AutoDock Vina和Pymol将得到的核心成分和核心靶点进行分子对接。结果：收集定喘汤复方中活性成分218个,得到相关潜在靶点452个,CVA相关靶点689个,得到交集靶点131个。核心靶点主要为丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1（AKT1）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子（TNF）,共有靶点主要富集于PI3K-Akt信号通路、TNF信号通路、Toll样受体信号通路。分子对接结果显示核心成分与靶点具有较好的结合活性。结论：定喘汤治疗CVA具有多成分、多靶点、多通路的特点,为进一步研究定喘汤治疗CVA的作用机制奠定了基础。     

加味芎蝎散对咳嗽变异性哮喘大鼠气道平滑肌增殖及MMP-9，TIMP1表达的影响

目的:探讨加味芎蝎散对咳嗽变异性哮喘大鼠气道平滑肌组织增殖以及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)表达水平的影响。方法:雄性SD大鼠48只,随机选取其中8只作为正常组,剩余大鼠随机分成CVA模型组,孟鲁司特钠组(0.4 mg·kg~(-1)·d~(-1)),加味芎蝎散组(6 g·kg~(-1)·d~(-1)),趋化因子受体1/2(CXCR1/2)抑制剂组(G31P,隔日颈部注射0.5 mg·kg~(-1)),CXCR1/2抑制剂+加味芎蝎散组,每组8只。腹腔注射卵蛋白(OVA)2 mg及氢氧化铝[Al(OH)_3]200 mg,15 d后1%OVA雾化激发建立咳嗽变异性哮喘(CVA)模型,模型建立后各组给予相应的给药处理,正常组及模型组给予10 m L·kg~(-1)·d~(-1)蒸馏水灌胃。苏木素-伊红(HE)染色后镜下观察肺组织病理形态学变化,测量气道平滑肌层厚度、细胞个数及管壁厚度;免疫组化和蛋白免疫印迹法检测肺支气管平滑肌组织中细胞增殖核抗原(PCNA),MMP-9和TIMP1蛋白表达水平。结果:与正常组比较,CVA模型组大鼠支气管表现为平滑肌层增生、肥厚,管壁上及周围多量炎性细胞浸润等为主要表现的病理变化,平滑肌层厚度、细胞个数及管壁厚度均增加;与模型组比较,其他药物干预组均有不同程度地减轻。与正常组比较,CVA模型组支气管平滑肌组织中PCNA,MMP-9,TIMP1蛋白明显升高(P0.05),MMP-9/TIMP1蛋白明显升高(P0.05);与CVA模型组比较,各药物干预组明显降低PCNA,MMP-9,TIMP1蛋白表达及MMP-9/TIMP1蛋白(P0.05)。结论:加味芎蝎散可以减轻CVA模型大鼠气道平滑肌组织的厚度,可能与抑制CXCR1/2通路,从而降低平滑肌组织的增殖活性以及抑制相关基质金属蛋白酶的表达有关。