知母栽培品和野生品的指纹图谱建立及差异性成分确认

目的建立知母栽培品和野生品的指纹图谱,确认两者的差异性成分。方法采用蒸发光散射检测器,以高效液相色谱法结合《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立14批知母栽培品和14批知母野生品的指纹图谱,并进行相似度评价,通过与混合对照品色谱图比对指认共有峰。同法测定知母栽培品和野生品中指认共有峰对应成分的含量,通过主成分分析和正交偏最小二乘法-判别分析确认两者的差异性成分,并比较其含量。结果在28批知母药材中共有10个共有峰,指认出新芒果苷(峰1)、芒果苷(峰2)、异芒果苷(峰3)、知母皂苷BⅡ(峰7)、知母皂苷BⅢ(峰8)、知母皂苷Ⅰ(峰9)、知母皂苷AⅢ(峰10)7个成分;各样品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均不低于0.963。知母栽培品与野生品中7个成分的平均总含量分别为74.18、84.72 mg/g,二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。知母栽培品与野生品可被分为两类,差异性成分为新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BⅡ、知母皂苷AⅢ(变量投影重要性值均大于1)。知母栽培品中新芒果苷含量明显高于野生品(P<0.05),芒果苷、知母皂苷BⅡ和知母皂苷AⅢ含量均明显低于野生品(P<0.05)。结论成功建立了知母的指纹图谱,并初步确认了知母栽培品和野生品的差异性成分。     

经典名方中防己的本草考证

通过查阅相关历代本草、医籍、方书,结合近现代文献资料,对经典名方中所用防己的名称、基原、产地、传统品质评价、采收加工及炮制方法等进行了系统梳理与考证。结果表明历代本草记载的主流正名为防己,因其产于汉中,又称“汉中防己”,唐代之后逐渐明确分化为汉防己和木防己,并有“汉主水气,木主风气”之说,粉防己及广防己之名始见于民国时期,粉防己曾集散于汉口,因此也被称为“汉防己”,易与传统汉中防己简称的汉防己相混淆。由基原考证可知,清代及以前本草所用防己药材主流基原为马兜铃科植物异叶马兜铃Aristolochia heterophylla(汉中防己),防己科木防己Cocculus orbiculatus应用历史也可追溯到唐代以前,明代以后粉防己Stephania tetrandra逐步成为防己的另一主要基原,民国时出现广防己A. fangchi作为防己入药,至现代因广防己含马兜铃酸类毒性成分而被禁用,粉防己成为当今该类药材的主流法定基原。传统汉中防己道地产区为陕西汉中,当今主流粉防己主产江西等地。由品质评价考证可知,汉中防己以断面放射状纹理作车辐解,黄实而香者为佳,粉防己以质坚实、内白色、粉性足、纤维...     

基于多指标权重分析及正交试验优选知母炮制工艺

目的 采用多指标正交试验优选生知母与盐知母炮制工艺。方法 利用层次分析法(AHP)对新芒果苷、芒果苷及异芒果苷进行分析；在单因素基础上，结合正交试验考察润制时间、烘制温度、烘制时间对生知母质量的影响以及闷润时间、炒炙温度、炒炙时间对盐知母质量的影响，优选生知母和盐知母炮制工艺的技术参数。结果 优选生知母炮制工艺参数为：润制时间20 h,烘制温度70℃,烘制时间8 h;优选盐知母炮制工艺参数为：闷润时间50 min,炒炙温度100～110℃,炒炙时间8 min。结论 优选出的知母炮制工艺稳定可行，为知母规范化生产提供依据。     

基于UPLC-Q-TOF/HRMSE的活血解毒方化学成分定性分析研究

目的 采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF/HRMS^E）技术对活血解毒方中的化学成分进行研究。方法 采用ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.8 μm）,以0.1%甲酸溶液（A）和0.1%甲酸乙腈（B）作为流动相进行梯度洗脱,体积流量为0.3 mL/min,采用ESI源在正、负离子模式下采集数据。根据化合物精确相对分子质量及二级特征碎片离子信息,结合参考文献数据与UNIFI数据库,鉴定活血解毒方的主要化学成分。结果 从活血解毒方中鉴定出66个化学成分,其中黄酮类化合物8个、生物碱类化合物7个、酚类化合物6个、皂苷类化合物30个、木质素类化合物6个、萜类化合物4个和其他类化合物5个。结论 建立的UPLC-Q-TOF/HRMS^E联用技术与UNIFI结合法能够系统、快速、准确地鉴定多种化学成分,为其质量评价指标选择及药效物质基础深入研究提供了参考。     

知母活性成分对脓毒症性心肌损伤模型小鼠的改善作用

目的 为阐明知母改善脓毒症性心肌损伤的作用及可能的活性物质基础提供实验参考。方法 采用热回流法制备知母水提物,大孔吸附树脂法分离知母总双苯吡酮和总皂苷。采用腹腔注射脂多糖建立脓毒症性心肌损伤小鼠模型,考察知母3个提取部位及知母单体成分芒果苷、知母皂苷AⅢ、知母皂苷BⅡ对模型小鼠存活率的影响;HE染色法观察知母单体成分芒果苷、知母皂苷AⅢ、知母皂苷BⅡ对模型小鼠心肌组织形态的影响;检测芒果苷对模型小鼠心肌组织中炎症因子[白细胞介素6(IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)] mRNA表达及活性氧（ROS）水平的影响。结果 知母总双苯吡酮、总皂苷、水提物干预组小鼠存活率较模型组均不同程度升高,其中以知母总双苯吡酮部位效果较佳;芒果苷、知母皂苷AⅢ和知母皂苷BⅡ均可改善模型小鼠心肌细胞肿胀、肌束排列紊乱程度,且以芒果苷的效果更为明显。芒果苷干预后小鼠心肌组织中IL-6、IL-1β、TNF-α mRNA表达水平及ROS水平较模型组不同程度降低。结论 知母不同提取部位均可提高脓毒症性心肌损伤小鼠的存活率,其中以知母总双苯吡酮部位效果较佳。3个知母单体成分中以芒果苷改善脓毒症性心肌损...     

基于指纹图谱结合网络药理学的知母质量标志物预测分析

目的 基于指纹图谱及化学计量法综合分析不同产地知母质量差异，根据质量标志物的理论依据，进一步结合网络药理学对知母质量标志物进行预测分析。方法 采用HPLC建立6个产地20批知母药材的指纹图谱，对其进行相似度评价，结合聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)及正交偏最小二乘法判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)筛选组间主要差异成分；基于质量标志物“五原则”，对差异性成分进行分析，进一步利用网络药理学方法筛选知母药材成分的相关靶点和通路，构建“成分-靶点-通路”网络图，预测知母药材的质量标志物。结果 建立了20批知母药材的指纹图谱，标定10个共有峰，共指认出7个共有峰，分别为新芒果苷、芒果苷、异芒果苷、知母皂苷BⅡ、知母皂苷BⅢ、知母皂苷Ⅰ、知母皂苷AⅢ，相似度均>0.934。HCA、PCA和OPLS-DA将20批样品分为2类，河北、内蒙古为一类，山西、安徽、陕西、山东...