中药安全性事件的危险因素与防治对策

回顾马兜铃酸、雷公藤、八角莲、槟榔、仙灵骨葆胶囊、鱼腥草注射剂、双黄连注射剂等引发的中药安全性事件,旨在探讨影响中药安全性的危险因素,对中药毒性成分、生产工艺、储藏条件、体质差异、给药剂量、风险管控等方面存在的安全性问题进行探讨,提出加强源头控制以确保质量合格、探明配伍机制以增效减毒、提高生产标准以推进质量统一、完善法规政策以加强管控、健全安全性评价体系以确保质量达标等建议,以期为促进临床合理用药、减少中药安全性事件提供帮助。     

《伤寒论》第230条之我见

《伤寒论》230条居于阳明病篇,然方用小柴胡汤论治。众多医家对此条文解释不一,有从阳明立论而谈,有从少阳立论而谈。笔者从原文病理机制等分析,试探讨《伤寒论》230条所带来的疑惑问题。     

CRISPR-Cas系统在结核分枝杆菌检测中的应用前景

<正>结核病是由结核分枝杆菌感染引起的慢性传染性疾病。随着新型冠状病毒的大流行,2022年结核病成为全球仅次于新型冠状病毒感染传染病死因^[1],严重危害全球人民的生命与健康。虽然目前有众多的检测手段,但据世界卫生组织(WHO)估计仍有近一半的病例未能确诊。近年来基于成簇规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白(clustered regularly interspaced short palindromic repeats-Cas,CRISPRCas)系统发展迅速,其研发成果已应用于基因编辑和体外分子诊断,     

基于UPLC-Q-TOF/HRMSE小陷胸汤化学成分定性分析

目的 采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF/HRMS^E）对小陷胸汤的化学成分进行研究。方法 色谱柱使用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.8 μm）,流动相使用0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈进行梯度洗脱,柱温为35℃,体积流量为0.3 mL/min,采用电喷雾电离源ESI,在正、负离子模式下分别进行质谱检测分析。结果 根据化合物精确分子量及质谱裂解二级碎片离子,结合相关文献及UNIFI 1.8软件对小陷胸汤进UPLC-Q-TOF/HRMS^E分析,共鉴定得到99个化学成分,正离子模式下55种,负离子模式下44种,初步定性63个化学成分,分别为有机酸类23个,姜辣素类（含姜酮、姜二酮、姜油酮、姜酚、姜烯酚）共9个,黄酮类共8个,生物碱类6个,木脂素类共8个,氨基酸类3个,核苷类3个,其他类型3个。结论 该方法快速、准确、便捷,为小陷胸汤药效物质基础及代谢过程的深入研究奠定了基础,也为其进行质量控制提供了参考。     

射频热疗对兔膝骨关节炎形成过程中Ⅱ型胶原表达的影响

目的 探讨射频热疗对兔膝骨关节炎形成过程中Ⅱ型胶原表达的影响。 方法 选取雄性家兔54只,采用改良Hulth造模法将其右后肢制成实验性膝关节骨关节炎模型。待造模成功后,将上述实验兔随机分为模型组、鹿瓜多肽组及射频热疗组。鹿瓜多肽组于制模后给予鹿瓜多肽肌肉注射,射频热疗组于制模后给予射频热疗治疗,模型组制模后未给予特殊处理。于治疗7d、13d及19d时每组分别取6只实验兔处死,取右侧股骨内侧髁软骨,采用改良Mankins评分对其进行形态学评分;同时采用实时定量PCR技术检测各组实验兔右侧股骨内侧髁软骨组织Ⅱ型胶原含量。 结果 经相同天数治疗后,发现模型组、鹿瓜多肽组及射频热疗组右侧股骨内侧髁软骨Mankins评分依次降低,软骨组织Ⅱ型胶原含量依次增高,组间差异均具有统计学意义（P<0.05）。射频热疗组随着治疗时间延长,其Mankins评分逐渐降低,软骨组织中Ⅱ型胶原含量逐渐增高,各时间点间差异均具有统计学意义（P<0.05）。 结论 射频热疗治疗兔膝骨关节炎的疗效明显优于鹿瓜多肽,其治疗机制可能与显著增加软骨中Ⅱ型胶原含量有关。     

射频热疗对膝骨关节炎实验兔血液中白细胞介素-1β及肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的 探讨射频热疗对兔膝骨关节炎形成过程中关节软骨组织形态学及血清中白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响。 方法 选取雄性家兔54只,采用改良Hulth造模法将其右后肢制成实验性膝关节骨关节炎模型。待造模成功后,将上述实验兔随机分为模型组、鹿瓜多肽组及射频热疗组。鹿瓜多肽组于制模后给予鹿瓜多肽肌肉注射,射频热疗组于制模后给予射频热疗干预,模型组制模后未给予特殊处理。于治疗7d、13d及19d时每组分别取6只实验兔处死,取右侧股骨内侧髁软骨,采用改良Mankins标准对其进行形态学评分,同时采用ELISA法检测各组实验兔血清中IL-1β及TNF-α含量。 结果 经相同时间治疗后,发现模型组、鹿瓜多肽组及射频热疗组右侧股骨内侧髁软骨Mankins评分及血清中IL-1β、TNF-α含量均依次降低,组间差异均具有统计学意义（P<0.05）。射频热疗组随着治疗时间延长,其右侧股骨内侧髁软骨Mankins评分及血清中IL-1β、TNF-α含量均逐渐降低,各观察时间点间差异均具有统计学意义（P<0.05）。 结论 射频热疗治疗兔膝骨关节炎的疗效明显优于鹿瓜多肽,其治疗机制可能与调控血清中IL-1β、TNF-α含量有关。     

宏基因二代测序技术对非结核分枝杆菌肺病的诊断价值

目的: 探讨宏基因二代测序技术(metagenomic next-generation sequencing,mNGS)在非结核分枝杆菌肺病(nontuberculous mycobacterial pulmonary disease,NTM-PD)中的诊断价值。方法: 回顾性搜集2020年1月至2022年2月浙江大学医学院附属杭州市胸科医院结核病诊疗中心收治的123例疑似NTM-PD患者的资料。根据诊断标准,123例疑似NTM-PD患者最终诊断为NTM-PD患者(NTM-PD组;74例)和非NTM-PD患者(非NTM-PD组;49例)。123例患者肺泡灌洗液、痰液、肺组织同时进行mNGS、PCR荧光探针法、BACTEC MGIT 960分枝杆菌全自动快速液体培养(简称“液体培养”),比较3种方法的诊断效能。结果: 以最终临床诊断结果为标准,mNGS、液体培养及PCR荧光探针法检测NTM-PD的敏感度分别为83.8%(62/74)、78.4%(58/74)、67.6%(50/74),特异度分别为65.3%(32/49)、91.8%(45/49)、87.8%(43/49),诊断一致率分别为76.4%(94/123)、83.7%(103/123)、75.6%(93/123),Kappa值分别为0.524、0.647、0.521。以液体培养结果为标准,mNGS和PCR荧光探针法检测NTM-PD的敏感度分别为87.1%(54/62)和75.8%(47/62),特异度分别为59.0%(36/61)和85.2%(52/61),诊断一致率分别为73.2%(90/123)和80.5%(99/123),Kappa值分别为0.462和0.587。对74例NTM-PD患者菌株进行mNGS及基因芯片法菌种鉴定,以基因芯片法为菌种鉴定标准,mNGS检测的准确率为63.8%(37/58)。结论: 在NTM-PD的诊断中,mNGS检测的敏感度较高,可直接鉴定至菌种水平,但特异度较低,应重点提高检测特异度,以更好地服务于临床工作。     

“量-权-证”网络毒理学的提出与应用:以八角莲醇提液致肝毒性为例

该研究首次提出"量-权-证"网络毒理学的研究方法,通过将毒性成分含量及成分作用靶点的频次赋予靶点权重,将传统定性网络转为定量网络,不断提高获取数据的信度,为系统性评价中药安全性及毒理学研究提供研究思路。首先,给予大鼠灌胃八角莲50%醇提物,基于血清药物化学辨识其中成分。随后从SwissTargetPrediction、PharmMapper等数据库获取成分靶点,以成分相对含量和钓靶频次赋予靶点权重,Comparative Toxicogenomics Database(CTD)、GeneCards等数据库预测肝毒性靶点,通过STRING数据库进行蛋白质互作分析及通路富集分析。最后,构建"毒性成分-加权靶点-效应通路"定量网络。八角莲体内外成分分析共筛选得到鬼臼毒素、鬼臼毒酮、去氧鬼臼毒素、6-甲氧基鬼臼毒素等11个潜在毒性物质,涉及肝毒性作用靶点106个,加权靶点涉及Cdk2、Egfr、Cyp2c9等65个。京都基因与基因组百科全书数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析表明其可能通过作用于PI3K-AKT、MAPK、Ras等信号通路呈现炎症反应、氧化应激、细胞凋亡、介导细胞色素P450(CYP450)酶系发挥肝毒性作用,然传统方法显示AKT1、Alb、Stat3等51个靶点可能通过介导炎症作用、细胞增殖等导致肝损伤,可知从不同层面获取的毒性机制有较大差异。综上,该研究提出并系统性应用"量-权-证网络毒理学"于八角莲致大鼠肝毒性机制研究,证实其广泛应用于中药毒理学评价的可行性,进一步完善中药安全性系统评价的思路。     

基于内在成分含量差异辨别玄参药材品质优劣可行性研究

目的 以玄参Scrophularia ningpoensis为研究对象,分析药材中内在化学成分与其法定指标整体间的关联性,探讨以内在成分快速辨别药材品质优劣的可行性.方法 取玄参药材按《中国药典》2020年版一部玄参项下测定,采用等权比值综合评分法对玄参药材进行品质优劣排序,使用色谱指纹图谱筛选共有成分并进行主成分分析...