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目的 建立乙肝表面抗体(抗HBs)阳性者EBV永生化的B淋巴母细胞系(B-LCLs),筛选、获得人源抗HBs及其分泌细胞.方法 常规技术获得乙肝疫苗强化免疫后志愿者的特异性外周血单核细胞(PBMC),EBV转染,加入CpGDNA免疫调节基序诱导B淋巴细胞增殖,环孢菌素A(CyA)抑制T淋巴细胞活性.雅培法定量动态检测水生化细胞培养上清中的抗HBs滴度,取高滴度抗HBs孔的B-LCLs细胞有限稀释法培养.用免疫组化SP法观察细胞分化状况及抗HBs表达.结果 成功构建了分泌抗HBs的永生化.B-LCLs;培养上清抗HBs滴度维持较高水平3周左右,之后逐渐降低;免疫组化鉴定B-LCLs细胞培养3个月时,永生化细胞仍然为抗HBs合成细胞.结论 采用改进的EBV永生化技术转化强化接种后获得的特殊PBMC,可高效获得永生化的B-LCLs,并有效表达抗HBs. 相似文献
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目的构建大容量且能高效展示于哺乳动物细胞表面的全长人源膀胱癌特异性抗体基因库。方法分离膀胱癌患者的外周血单核细胞(PBMC),提取PBMC的总RNA,用RT-PCR方法扩增全套IgG1重链可变区(VH)和Kappa型轻链全长(LCκ)基因,经过相应的限制性内切酶酶切后分别插入pDGB-HC-TM载体,分别构建膀胱癌特异性的抗体重链基因库和轻链基因库(一级抗体库)。随机挑取20个单克隆测定抗体基因序列,并瞬时转染FCHO细胞,结合流式细胞仪检测细胞表面抗体的表达。将上述构建好的轻重链基因库通过4片段连接方法插入双表达载体pDGB4,构建二级抗体库,转染FCHO后用流式细胞仪检测细胞表面抗体表达。结果分别成功构建了膀胱癌特异性的重链基因库和轻链基因库,随机挑取的轻重链单克隆各有7个和9个含有正确的抗体基因编码序列,且能展示于哺乳动物细胞表面,理论库容量达到3.32×1011[(1.7×106×70%)×(3.1×105×90%)]。成功构建了膀胱癌二级抗体库,库容量为9×105。结论利用哺乳动物细胞表面展示技术,我们成功构建了膀胱癌特异性的全长人源抗体基因库,一级抗体库的库容量达到3.32×1011,二级抗体库库容量达到9×105,为下一步筛选特异性、高亲和力抗膀胱癌抗体奠定了基础。 相似文献
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目的 通过检测矮小症患儿生长激素(GH)-胰岛素样生长因子(IGF)轴功能,探讨其在矮小症病因诊断中的意义.方法 50例矮小症患儿采用精氨酸激发试验和可乐定激发试验检测血清生长激素(GH)水平,同时检测其血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)水平,根据GH和IGF-1检测结果,对矮小症儿童进行病因分类:(1)GH、IGF-1皆缺乏,为生长激素缺乏症(GHD);(2)GH正常但IGF-1缺乏,为GH不敏感综合征(GHIS);(3)GH缺乏但IGF-1正常,为可疑GHD;(4)GH和IGF-1皆正常,为特发性矮小(ISS).结果 50例矮小症患儿中,GHD 8例(占16%),怀疑GHIS 1例(占2%),可疑GHD 7例(占14%),ISS 34例(占68%).结论 通过检测GH-IGF轴功能,可对矮小症进行病因诊断.矮小症中最多是ISS,其次是GH-IGF轴功能缺陷. 相似文献
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急性乳腺炎是发生在乳房部的一种急性化脓性疾病,相当于中医的乳痈,多见于哺乳期妇女,尤其是产后1~3月的初产妇。其发病特点是:初则恶寒发热,继而患侧乳房肿大、结块、猩红热痛,由于部分病人重视不够,治疗不及时,可迅速化脓,现代医学对其治疗一般行扩大切口排脓,组织损伤较大,病程长,疤痕大,需停止哺乳,且易造成乳漏和不愈合。 相似文献
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情志干预法治疗乳腺增生病42例 总被引:1,自引:0,他引:1
娄海波 《浙江中医药大学学报》2010,34(3)
[目的]观察中医情志干预疗法对乳腺增生病的疗效。[方法]将84例乳腺增生病患者随机分为两组,治疗组42例进行情志干预,对照组42例内服乳癖散结胶囊。[结果]治疗组治愈率50.0%,对照组治愈率26.2%(P0.05)。治疗组在减轻乳房疼痛、乳房肿块及改善月经、情绪症状方面均明显优于对照组。[结论]中医情志干预对乳腺增生病有较好的疗效。 相似文献
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六味地黄汤加味治疗男性乳房异常发育症31例 总被引:2,自引:0,他引:2
男性乳房异常发育症是指男子单侧或双侧乳房肥大、乳晕下触及盘状结节的病症,有时伴有乳房胀痛或触痛。现代医学多认为与内分泌失调有关。属中医学“乳疬”范畴,笔者运用六味地黄汤加味治疗男性乳房异常发育症,疗效较为满意,现介绍如下: 相似文献
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目的 通过生物信息学分析HBV感染相关免疫机制,找出定位于HBV感染相关免疫微环境的潜在治疗靶点。方法 从基因表达综合数据库下载GSE121248和GSE55092数据集。使用limma R软件包筛选HBV阳性肝组织样本与正常肝组织样本间的差异表达基因(DEGs)。从GeneCards数据库中下载免疫相关基因集,与上述两组DEGs取交集后得到免疫相关的差异表达基因(i-DEGs)。利用i-DEGs构建蛋白质-蛋白质互作(PPI)网络,以筛选可能与HBV感染相关的枢纽基因;使用多种网络工具评估枢纽基因与miRNA、转录因子、小分子药物的关联性。结果 从GSE55092和GSE121248分别获得1417和789个DEGs,二者与免疫相关基因集取交集后得到324个i-DEGs。通过构建PPI网络,鉴定出TOP2A、CDK1、AURKA、NCAPG、KIF11、CCNB1、CDC20、BUB1B、CCNB2、CCNA2共10个枢纽基因。通过探索DGIdb数据库,鉴定出可以调控TOP2A、CDK1、AURKA、CCNA2表达的36种小分子药物。进一步研究发现,CDK1对于HBV感染的诊断效能最... 相似文献
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目的:通过对比观察清热凉血方与祛风湿方分别对IgA肾病大鼠肾转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达的影响,从药物反证的角度探讨两方对IgA肾病大鼠肾功能及症状的改善作用。方法:将大鼠随机分为4组。采用改良口服牛血清白蛋白(BSA)和尾静脉注射葡萄球菌肠毒素B(SEB)的免疫复合法建立大鼠IgA肾病模型,造模成功4周后,分别用清热凉血方和祛风湿方灌服IgA肾病模型大鼠,给药12周后尾静脉取血,最终检测各项指标进行系统评价。结果:清热凉血方与祛风湿方和实验对照组相比,能降低大鼠24h尿量、尿蛋白量、肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)各值及肾TGF-β1蛋白均显著降低(P0.05)。结论:清热凉血方与祛风湿方对IgA肾病大鼠均有治疗效果,在一定时期内降低24h尿蛋白定量、肾脏TGF-β1含量。 相似文献
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