芒果甙对柔红霉素致大鼠心肌毒性细胞中铁调节蛋白表达的影响

目的:探讨铁调节蛋白1(IRP1)及铁调节蛋白2(IRP2)在芒果甙保护柔红霉素致大鼠心肌细胞毒性作用中的表达及其意义。方法:以4μmol/L柔红霉素单用或联合应用25～200μmol/L芒果甙为处理因素作用于大鼠心肌细胞24,48h及72h,应用qRT-PCR法检测各组心肌细胞IRP1、IRP2mRNA表达。结果:25～200μmol/L芒果甙模型组在干预24h后IRP1、IRP2表达水平较柔红霉素组(4μmol/L)降低,干预48,72h后,二者表达较柔红霉素组升高。结论:芒果甙能改变柔红霉素致大鼠心肌毒细胞中铁调节蛋白的表达水平,对细胞内铁代谢产生影响。     

芒果苷对柔红霉素所致大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用

目的:研究芒果苷对柔红霉素致心肌细胞凋亡的拮抗作用及其可能机制。方法:取原代培养心肌细胞以1μmol/L柔红霉素(daunorubicin,DNR)建立心肌细胞凋亡模型,以不同浓度芒果苷(25、50、100μmol/L)干预,选择银杏叶提取物EGB761(25μg/mL)作为阳性对照药物。应用光学倒置显微镜及电子显微镜观察凋亡细胞形态改变,用流式细胞术(Annexin V–FITC/PI双染色法)检测细胞凋亡率,用分光光度法检测细胞裂解液中Caspase-3酶活性,用实时荧光定量RT-PCR方法检测P53、Fas及FasL表达水平。结果:芒果苷作用于柔红霉素诱导的心肌细胞凋亡模型后,能明显抑制柔红霉素诱导的心肌细胞凋亡,降低心肌细胞凋亡率,下调Fas和FasL表达、抑制Caspase-3活化,随着药物浓度增加,抑制凋亡作用增强,其作用强度与芒果苷浓度有关,呈剂量依赖性。结论:芒果苷能有效抑制柔红霉素诱导的心肌细胞凋亡,其作用机制可能与下调Fas和FasL表达水平及抑制Caspase-3活化有关。     

芒果甙保护柔红霉素致大鼠心肌细胞毒性中铁代谢的改变

目的:探讨铁代谢在芒果甙保护柔红霉素致大鼠心肌毒性细胞中的改变,并对其作用机制进行初步研究。方法:以4μmol/L柔红霉素单用或联合应用25～200μmol/L芒果甙为处理因素作用于大鼠心肌细胞24小时、48小时及72小时,应用qRT-PCR法检测各组心肌细胞铁调节蛋白1(IRP1)、铁调节蛋白2(IRP2)mRNA表达,应用RT-PCR法检测铁蛋白(Fn)mRNA表达,同时采用免疫细胞化学染色法检测转铁蛋白(Tf)及转铁蛋白受体(TfR)表达。结果:25～200μmol/L芒果甙模型组在干预24小时后IRP1、IRP2表达水平较柔红霉素(4μmol/L)组降低,干预48小时、72小时后,二者表达较柔红霉素组升高;干预24小时、72小时25～200μmol/L芒果甙模型组Fn表达较柔红霉素组随浓度升高逐渐降低,干预48小时后则较柔红霉素组均升高;柔红霉素组及25～200μmol/L芒果甙模型组24小时的Tf、TfR表达均明显高于空白对照组;72小时柔红霉素组的TfR表达明显低于空白对照组,而25～200μmol/L芒果甙模型组表达较柔红霉素组升高。结论:芒果甙能改变柔红霉素心肌毒性细胞的铁代谢水平,由此可推测,铁代谢可能是芒果甙保护柔红霉素致大鼠心肌细胞毒性的机制之一。     

芒果甙对柔红霉素致大鼠心肌细胞过氧化损伤的保护作用

目的:研究芒果甙的抗氧化性对柔红霉素心肌细胞毒性的保护作用及可能机制。方法:以4μmol/L柔红霉素(DNR)制作心肌细胞损伤模型,加入不同浓度芒果甙作用后,用MTT法检测心肌细胞存活率(Viability);用全自动生化仪检测培养基中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB);用分光光度计检测超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量;用流式细胞术(FCM)检测细胞内活性氧(ROS)及线粒体膜电位(Δm)水平;用荧光定量PCR检测热休克蛋白70(Hsp70)及过氧化氢酶(CAT)基因表达变化。结果:浓度为4μmol/L柔红霉素能明显损伤心肌细胞,MTT法及心肌酶检测显示芒果甙作用浓度为25μmol/L时即有保护作用。100μmol/L芒果甙组与柔红霉素模型组、维生素C对照组比较,心肌细胞存活率明显提高;心肌酶LDH、CK、CK-MB漏出减少,SOD消耗和MDA生成减少;心肌细胞内ROS浓度明显减少;100μmol/L芒果甙与柔红霉素模型组、维生素C对照组比较能明显恢复Δm水平,而维生素C组与柔红霉素组比较无显著差异。芒果甙随浓度增加,HSP70、CAT基因的表达水平逐渐降低。结论:在体外试验中,芒果甙能减轻柔红霉素所致的心肌细胞毒性,其机制可能与芒果甙有效清除氧自由基,减轻过氧化损伤有关。