不同寄主桑寄生水提物对斑马鱼模型的急性毒性及肝损伤

目的 用斑马鱼模型对桑树、漆树、油茶、柳树、苦楝和夹竹桃6种寄主桑寄生水提物进行急性毒性及肝损伤研究,探索寄主对桑寄生毒性的影响,为桑寄生用药安全提供理论依据。方法 以受精后3 d（3 dpf）发育正常的AB系斑马鱼为对象进行急性毒性研究,根据毒性预实验结果,对不同寄主桑寄生水提物分别设置6个不同剂量浓度对斑马鱼进行处理,统计其72 h死亡率,采用GraphPad Prism 6.0软件绘制量-毒曲线,计算不同寄主桑寄生水提物的半数致死浓度（LC₅₀）和10%致死浓度（LC₁₀）。以受精后4 d（4 dpf）发育正常的gz15Tg/+（AB）肝脏荧光蛋白转基因斑马鱼为对象进行肝损伤研究,将不同寄主桑寄生水提物分别设置低、中、高3个剂量浓度组,设对乙酰氨基酚组,以胚胎水为空白组,给药72 h后观察斑马鱼肝脏形态和荧光面积变化,检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（AST）活性。结果 急性毒性实验结果显示,桑树、漆树、油茶、柳树、苦楝和夹竹桃寄主桑寄生水提物的LC₅₀分别为1.24,0.94,0.51,0.38,0.11,0.09 g·L^-1;LC₁₀分别为0.70,0.60,0.35,0.28,0.08,0.07 g·L^-1。肝损伤实验结果,与空白组比较,对乙酰氨基酚组的斑马鱼的肝脏形态变形和荧光面积减小（P<0.01）,ALT和AST活性升高（P<0.01）,结果表明对乙酰氨基酚对斑马鱼有肝毒。桑树寄主桑寄生水提物低、中、高3个剂量浓度组斑马鱼的肝脏形态和荧光面积均无变化,ALT和AST活性均降低;漆树、油茶、柳树、苦楝和夹竹桃5种寄主桑寄生水提物中、高剂量浓度组斑马鱼均不同程度地表现出肝脏形态变化和荧光面积减小（P<0.05,P<0.01）,ALT和AST活性均明显升高（P<0.05,P<0.01）。结果表明桑树寄主桑寄生对斑马鱼没有肝脏毒性,漆树、油茶、柳树、苦楝和夹竹桃5种寄主桑寄生对斑马鱼表现出不同程度的肝损伤。结论 桑寄生毒性有无或强弱具有寄主依赖性,桑树寄主桑寄生无肝损伤,其他5种寄主桑寄生均不同程度地表现出一定的肝损伤,规范寄主来源可能是实现桑寄生用药安全的重要举措。     

中药桑寄生的应用特点与临床研究概况

桑寄生始载于《神农本草经》,被广泛应用于中成药生产和中医临床.本文对桑寄生的应用特点、历代本草的应用和临床研究进行总结整理,并针对寄主植物来源多样复杂分析桑寄生临床安全用药存在的问题,从而为桑寄生药材的质量控制以及临床用药提供参考意见.     

多波长高效液相法同时测定土炒白术中3种白术内酯含量

目的:建立同时测定土炒白术中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量的检测方法,比较不同产地土炒白术质量差异。方法:采用高效液相法,时间波长程序220 nm(0～9 min)、276 nm(9～15 min)、220 nm(15～30min),同时测定不同产地10批白术土炒品中白术内酯Ⅲ、Ⅱ、Ⅰ含量,运用化学模式识别技术分析其差异性。结果:不同产地土炒白术中3种白术内酯平均质量分数(ωB)之和分别为:1. 216、3. 376、2. 828、1. 185、2. 842、2. 674、1. 034、1. 206、1. 147、2. 441 mg·g-1;系统聚类与主成分分析分析表明不同产地10批白术土炒品可分为3类。结论:本含量测定方法准确、稳定,不同产地白术土炒品中内酯类成分含量存有差异。     

基于化学模式识别技术的不同产地土炒白术质量比较研究

目的:比较不同产地白术土炒品中所含化学成分差异,为评价土炒白术质量提供参考依据。方法:采用高效液相法,建立不同产地10批白术土炒品HPLC图谱,运用指纹图谱与化学模式识别技术分析其差异性。结果:土炒白术HPLC图谱共有峰特征明显;系统聚类将不同产地10批白术土炒品分为3类;经主成分分析、偏最小二乘法-判别分析发现白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ等5个成分是造成不同产地白术土炒品之间成分差异的主要标记物。结论:不同产地白术土炒品中化学成分存有差异,该法可为白术土炒品的质量控制与评价提供依据。     

不同寄主植物桑寄生水提物对斑马鱼胚胎心脏发育毒性及机制研究

目的 研究不同寄主植物桑寄生Taxilli Herba水提物对斑马鱼胚胎心脏发育毒性及其机制，为桑寄生用药安全提供理论依据。方法 以受精后6 h(6 h post fertilization，6 hpf)正常发育的斑马鱼胚胎为动物模型，将桑树Morus alba、柳树Salix babylonica、油茶Camellia oleifera、夹竹桃Nerium indicum、苦楝Melia azedarach和漆树Toxicodendron trichocarpum 6种寄主植物桑寄生水提物各设置低、中、高3个药物浓度，分别处理斑马鱼胚胎，检测72 hpf孵化仔鱼的心脏形态、心率、心包面积、静脉窦(sinus venosus，SV)和动脉球(bulbus arteriosus，BA)间距、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)和过氧化氢酶(catalase，CAT)活性、心肌细胞的凋亡情况以及氧化应激相关酶基因［SOD1、CAT、谷胱甘肽S-转移酶2(glutathione S-transferase 2，GSTP2)]、心脏发育相关基因[GATA结合蛋白5(GATA binding protein 5，GATA5)、NK2同源框5(NK2 homeobox 5，NKX2.5)、肌球蛋白重链6(Myosin，heavy chain 6，MYH6)]及心肌细胞凋亡相关基因[B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2，Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein，Bax)]的表达水平。结果 与空白组比较，除桑树寄主桑寄生外，其他5种桑寄生水提物处理的斑马鱼胚胎均出现不同程度的心包水肿、心率降低、心包面积和SV-BA间距增大(P＜0.05、0.01)，SOD和CAT活性降低(P＜0.05、0.01)，SOD1、CAT、GSTP2、GATA5、NKX2.5、MYH6的表达表现出明显的上调或下调(P＜0.05、0.01)。夹竹桃、苦楝和漆树3种寄主桑寄生还观察到心肌细胞凋亡，Bcl-2表达和Bcl-2/Bax值明显降低(P＜0.05、0.01)。结论 桑寄生对斑马鱼胚胎心脏发育毒性具有明显的寄主相关性，除桑树寄主桑寄生外，其他5种寄主桑寄生均表现出不同程度的心脏发育毒性，寄主植物不同，毒性机制也不同。