诃子水提物对球形马拉色菌及其生物被膜的抑制作用

目的 探究诃子水提物（water extract of Terminalia chebula,TRW）对球形马拉色菌的体外抗菌活性及对生物被膜的抑制作用,并初步探讨其抗菌机制。方法 采用微量稀释法测定TRW对马拉色菌的体外抗菌活性;活菌计数法测定TRW对球形马拉色菌作用的时间-杀菌曲线。通过微板法构建球形马拉色菌生物被膜体外模型,用XTT法测定生物被膜代谢活性;采用活菌计数法和扫描电子显微镜分别检测TRW对球形马拉色菌生物被膜活菌量以及微观形态的影响。采用山梨糖醇保护实验、碘化丙啶（PI）染色分别测定TRW对球形马拉色菌细胞壁和细胞膜的作用影响。结果 TRW对7株马拉色菌的最低抑菌质量浓度为0.90～4.59 mg/mL,其中对TRW敏感性最强的是球形马拉色菌MC14。时间-杀菌曲线结果显示TRW对MC14整个生长周期均有抑制作用。球形马拉色菌MC14生物被膜的初黏附期、聚集期和成熟期分别为0～24 h、24～96 h和96～168 h。TRW可降低MC14各个阶段生物被膜的活菌量,作用效果由强到弱排列为聚集期>黏附期>成熟期;且对MC14各个阶段的生物被膜均有清除作用,可...     

黄绵马酸BB对皮肤软组织感染致病菌的抗菌活性及机制研究

目的研究黄绵马酸BB对皮肤软组织感染致病菌的抗菌活性,并探讨其对金黄色葡萄球菌的抗菌机制。方法采用微量稀释法测定黄绵马酸BB对皮肤软组织感染相关致病菌的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(minimumbactericidalconcentration,MBC);以对黄绵马酸BB敏感的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)临床分离株和金黄色葡萄球菌标准株ATCC29213为受试菌,考察黄绵马酸BB对其生长活力和菌体形态结构的影响,采用酶标仪考察黄绵马酸BB对其细胞壁通透性的影响,采用荧光分光光度计考察黄绵马酸BB对细胞膜电位的影响,采用qRT-PCR法考察黄绵马酸BB对青霉素结合蛋白1(penicillin-binding protein1,PBP1)m RNA表达的影响。结果黄绵马酸BB对ATCC29213的MIC为10.0~20.0μg/mL,MBC为10.0~40.0μg/mL,且对MRSA临床分离株的MIC小于头孢唑啉;与对照组比较,黄绵马酸BB组ATCC29213和MRSA生长受到抑制,菌体细胞形态结构改变,细胞膜电位显著降低(P<0.05),1/2MIC黄绵马酸BB可显著下调PBP1 mRNA表达水平(P<0.01),2MIC黄绵马酸BB可显著上调PBP1 mRNA表达水平(P<0.01)。结论黄绵马酸BB对MRSA临床分离株表现出良好的抗菌活性,且其抗菌作用与破坏菌体细胞结构、降低细胞膜电位、影响PBP1 mRNA表达有关。     

黄绵马酸BB对革兰阳性致病菌的抗菌活性和生物被膜清除作用研究

目的探究黄绵马酸BB对3种革兰阳性致病菌的抗菌活性及生物被膜的清除作用。方法采用微量稀释法测定黄绵马酸BB对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis,EFA)及屎肠球菌(Enterococcus faecium,EFM) 15株临床分离株的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC);考察黄绵马酸BB对MRSA2、EFA13和EFM15生长周期的影响;采用CCK-8法、扫描电子显微镜(SEM)考察黄绵马酸BB对MRSA2、EFA13和EFM15生物被膜的清除作用。结果黄绵马酸BB对MRSA的MIC为11.49～63.50μg/mL、MBC为22.98～160.00μg/mL,对EFA的MIC为7.07～160.00μg/mL、MBC为28.28～160.00μg/mL,对EFM的MIC为16.82μg/mL、MBC为56.57μg/mL,其中黄绵马酸BB对MRSA1、2和EFA14、15的MIC均小于莫匹罗星;黄绵马酸BB对MRSA2、EFA13和EFM15的生长具有抑制作用,能延迟受试菌进入对数生长期;MIC黄绵马酸BB对MRSA2、EFA13和EFM15生物被膜的清除率分别达到85.15%、76.48%、82.31%,均优于莫匹罗星、万古霉素、达托霉素;黄绵马酸BB对MRSA2生物被膜聚集及成熟阶段的清除效果优于达托霉素,对EFA13生物被膜聚集及成熟阶段的清除效果优于莫匹罗星、万古霉素、达托霉素,对EFM15生物被膜成熟阶段的清除效果优于莫匹罗星、万古霉素、达托霉素。结论黄绵马酸BB具有良好的体外抑菌活性以及对生物被膜的清除作用。