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目的 探讨siRNA干扰对人乳腺癌细胞株SKBr3表皮生长因子受体2(HER2)表达的影响.方法 构建2个针对HER2基因表达短发夹状siRNA的真核表达载体(psiRNA-HER2),并转染人乳腺癌细胞株SKBr3,采用RT-PCR法和流式细胞仪检测转染后48h HER2 mRNA和蛋白表达,从中筛选出基因沉默效果好的靶位点.同时构建针对绿色荧光蛋白(GFP)基因的短发夹状siRNA的真核表达载体psiRNA-GFP作为阳性对照.结果 psiRNA-HER2-1、psiRNA-HER2-2转染后均能抑制人乳腺癌细胞株SKBr3 HER2 mRNA和蛋白表达,抑制率分别为32.0%和65.5%.荧光显微镜下见psiRNA-GFP转染后明显抑制GFP的表达.结论 HER2 siRNA真核表达载体可在人乳腺癌细胞株SKBr3中产生RNA干扰效应,不同的siRNA下调mRNA和蛋白表达的效率不同.作为基因沉默的一个重要工具,siRNA干扰有望成为治疗乳腺癌的一种新方法. 相似文献
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